下图中甲和乙是两种微生物接种方法的部分操作过程或结果，下列有关叙述错误的是（）

1. 下图中甲和乙是两种微生物接种方法的部分操作过程或结果，下列有关叙述错误的是（）

A. 甲的同一稀释度至少要对3个平板重复计数，一般选择菌落数为30-300的平板 B. 甲中涂布前要将涂布器灼烧，冷却后才能取菌液，乙中接种环需要灼烧5次 C. 乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端 D. 甲、乙操作中只有甲可以用于微生物的计数，结果往往比活菌的实际数目大

【考点】

微生物的分离和培养;

【答案】

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多选题容易

基础巩固

能力提升

变式训练

拓展培优

真题演练

换一批

1. 在分离、纯化细菌的实验中，划线接种（甲）、培养结果（乙）如图所示，a、b、c、d是划线的四个区域。下列叙述错误的是（）

A. 接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧 B. 接种环共灼烧了4次 C. 该方法也可用于细菌的计数 D. 连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落

多选题容易

2. 下列叙述正确的是（）

A. 培养细菌时需将培养基的温度调至15﹣18℃ B. 在进行稀释涂布平板法操作时，首先要将菌液进行一系列的梯度稀释 C. 倒平板操作中，待平板冷却凝固后将平板倒过来放置 D. 大肠杆菌纯化培养可以采用平板划线法或稀释涂布平板法

多选题容易

3. 野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型菌株由于发生基因突变而无法合成某种氨基酸只能在完全培养基上生长，下图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，数字代表培养基，ABC表示操作步骤。有关说法错误的是（）

A. ①②为完全培养基，③④为基本培养基 B. A操作的目的是提高突变菌株的浓度 C. B操作可用涂布器蘸取菌液均匀的涂布在②表面 D. 经C过程影印及培养后，可从④培养基中挑取D菌落进行纯化培养

多选题容易

1. 有人说手机屏幕细菌比马桶按钮上的多。两个兴趣小组分别展开如下图的实验过程。下列分析正确的是（　　）

固定面积用无菌棉取样

A. 以上两组实验在接种过程中均需要用到酒精灯、接种环等 B. 通过观察菌落的形态、大小，可知手机屏幕和马桶按钮上都存在多种微生物 C. 两组实验操作均正确且完全一致，但结果截然不同，原因可能是取样部位不同 D. 该实验对照组可以设置为取相同培养基接种等量无菌水进行培养

多选题普通

2. 儿茶素（C）具弱抗菌性，研究人员用药物M与儿茶素形成配合物M—C，以增强其抗菌效果。为确定配合物M—C中M和C的最佳分配比，用不同分配比（C/M）的配合物M—C处理滤纸片，置于布满菌落的培养基中，结果如图所示。下列叙述错误的是（）

A. 该实验须用平板划线法将菌种接种到培养基上 B. 据实验结果可判断较适宜的C/M为3～5 C. 本实验中的培养基应含有该微生物生长必需的营养 D. 据实验结果推测，不同分配比的配合物M——C抑菌效果均不同

多选题普通

3. 自然沉降法是指让空气中的细菌自然降至琼脂平板表面的方法。某同学采用自然沉降法对大学校园中的细菌进行采集，对其培养后对所有培养皿里生长的菌落数量进行统计，经换算所得对应空气中细菌总数（单位：cfu·m^-3）的结果如表所示。下列相关分析错误的是（）

	14：00-15：00（人流低峰）	18：00-19：00（人流高峰）
男生宿舍	938	1328
女生宿舍	703	859
食堂	508	625
图书馆	352	391

A. 该同学对不同时间的同一地点及同一时间的不同地点的空气进行采样 B. 让空气中的细菌自然降至琼脂平板表面相当于微生物培养中的接种 C. 每个采样点仅需要放置1个已灭菌的培养基 D. 空气中细菌的数量在人流高峰时比在人流低峰时少

多选题普通

1. 在分离、纯化细菌的实验中，划线接种（甲）、培养结果（乙）如图，a、b、c、d是划线的四个区域。下列叙述错误的是（　　）

A. 所用固体培养基中一般添加琼脂 B. 连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落 C. 甲图中的a区域为划线的起始区域 D. 完成该实验过程，接种环共需灼烧处理5次

单选题容易

2. 在微生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。平板划线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法。下列说法错误的是（　　）

A. 平板划线法在每次划线前后都灼烧接种环的目的是防止杂菌污染 B. 用稀释涂布平板法也可用于微生物的计数，有时也可以不稀释直接涂布 C. 两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度 D. 两方法使用的接种工具分别是接种环和涂布器

单选题容易

3. 从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，下列实验操作不正确的是（）

A. 测定土壤中细菌的数量，一般选用 $\text{[math]}$ 倍的稀释液进行平板培养 B. 当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液的一个活菌 C. 用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌 D. 从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株

单选题普通

1. 我国盐碱土面积约9913万hm² ，其中pH值高于9、盐含量大于0.6%的重度盐碱地每年以1.4%的增长率增长。利用固氮微生物改善植物根际环境，是盐碱地改良的重要方法。科研人员欲从热带珊瑚岛礁的土壤中分离并鉴定耐盐碱固氮菌的单菌落，以期应用于盐碱地改良。根据所学内容，回答下列问题：

(1) 分离目的菌株时所利用的培养基从物理形态和功能上划分，属于培养基。培养基中必须添加的营养成分有；调节pH值高于9应在（填“灭菌前”或“灭菌后”）进行。

(2) 得到土壤浸出液后用法接种到培养基上可得到单菌落并进行计数；接种过程中使用的接种工具应采用灭菌；该种计数方法结果往往小于实际细菌数的原因是。

(3) 将接种后的平板置于适宜的环境中进行培养，同时将一个未接种的空白平板置于相同的环境中进行培养的目的是。

(4) 培养一段时间后研究人员可根据菌落的形状、大小、颜色等特征初步区分所获得菌落是否为固氮菌，原因是在一定的培养条件下，。实验过程中还发现在高盐、高pH、无氮培养上进行长时间培养后会出现一些特殊的菌落，将它们单独转移到新制备的高盐、高pH、无氮培养基上时却无法生长，形成这种现象的原因是。

实验探究题普通

2. 木质素是一类复杂的有机聚合物，在维管植物和一些藻类的支持组织中起着重要的结构作用，在细胞壁的形成中特别重要，特别是在木材和树皮中，因为这些部分富含木质素，从而赋予它们刚性并且不容易腐烂的特性。科研团队尝试从木材场土壤中筛选分离出木质素分解菌，实验流程如下图所示。请回答下列问题：

(1) 用于培养微生物的培养基可以为微生物提供的营养物质主要有。实验时，一般对配制的培养基采用法进行灭菌，对培养皿、烧瓶及吸管等玻璃器皿一般用法灭菌。

(2) 若每个环节的稀释倍数与步骤②的稀释倍数相同，则步骤④试管内的无菌水是mL。图示操作过程中，共将1g土壤稀释了倍。实验过程中，纯化细菌的关键是无菌操作和。

(3) ⑤纯化培养过程中所采用的接种方法是，在五个固体培养基上分别接种0.1mL该菌菌液，适宜条件下培养一段时间后，若培养基上的菌落数分别为：28、70、144、139、131，则每克土壤样品中该菌的数量约为个。

实验探究题普通

3. 细胞中的HMR蛋白与PIF4蛋白有较强的亲和力，可结合形成蛋白质复合体，从而影响植物的叶生长及根伸长。科研人员构建了酵母双杂交系统进行验证。回答下列问题：

(1) 实验需选取组氨酸缺陷型酵母（无组氨酸合成能力），已知组氨酸是酵母菌生存所必需的。现欲验证实验室存留的酵母品系GS115是否为组氨酸缺陷型酵母，先用挑取保存的菌落，将其置于完全培养液中培养，该操作需在环境下进行；后将酵母培养液涂布于的固体培养基中培养，若结果为，则说明该品系为组氨酸缺陷型酵母。该过程中，先在培养液中培养的目的是。

(2) 向该酵母品系中导入下图所示的质粒（仅展示部分片段）。可以采用法完成转化。其中Gal4启动子需要与Gal4蛋白结合才能正常启动转录，Gal4蛋白分为激活区（AD）和结合区（BD）两部分，其中结合区可以识别启动子，其识别的是启动子的，激活区招募酶与启动子结合。两部分共同起作用才能激活Gal4启动子的转录，细胞质中游离的AD、BD亲和力较弱。

(3) 现构建重组载体α以表达融合蛋白HMR—BD，构建重组载体β以表达融合蛋白PIF4—AD（融合蛋白为两个蛋白质末端相连，同时具有两个蛋白质的功能且互不影响）。先将重组载体α、β（选填“分别”或“共同”）转入组氨酸缺陷型酵母，再采用法将该酵母接种到某种固体培养基进行培养，该培养基的营养成分特点是。培养一段时间后，若，则说明HMR与PIF4蛋白有较强的亲和力。

综合题困难

1. 下图所示实验方法的应用或原理，不恰当的是（）

实验方法	应用	原理
	A.分离绿叶中的色素	B.不同色素在层析液中溶解度不同
	C.细菌计数	D.逐步稀释

A. A B. B C. C D. D

单选题容易

2. 某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁样品，划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基，经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是（）

A. 培养基pH需偏碱性 B. 泡菜汁需多次稀释后才能划线接种 C. 需在无氧条件下培养 D. 分离得到的微生物均为乳酸菌

单选题普通

3. 为避免航天器在执行载人航天任务时出现微生物污染风险，需要对航天器及洁净的组装车间进行环境微生物检测。下列叙述错误的是（）

A. 航天器上存在适应营养物质匮乏等环境的极端微生物 B. 细菌形成菌膜粘附于航天器设备表面产生生物腐蚀 C. 在组装车间地面和设备表面采集环境微生物样品 D. 采用平板划线法等分离培养微生物，观察菌落特征

单选题困难