为避免航天器在执行载人航天任务时出现微生物污染风险，需要对航天器及洁净的组装车间进行环境微生物检测。下列叙述错误的是（）

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1. 为避免航天器在执行载人航天任务时出现微生物污染风险，需要对航天器及洁净的组装车间进行环境微生物检测。下列叙述错误的是（）

A. 航天器上存在适应营养物质匮乏等环境的极端微生物 B. 细菌形成菌膜粘附于航天器设备表面产生生物腐蚀 C. 在组装车间地面和设备表面采集环境微生物样品 D. 采用平板划线法等分离培养微生物，观察菌落特征

【考点】

微生物的分离和培养;

【答案】

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单选题困难

基础巩固

能力提升

变式训练

拓展培优

真题演练

换一批

1. 微生物平板划线和培养的具体操作如图所示，下列操作正确的是（）

A. ①②⑤⑥ B. ③④⑥⑦ C. ①②⑦⑧ D. ①③④⑤

单选题容易

2. 某种细菌可以在含蛋白质、牛肉膏、氯化钠和微量维生素的培养基中生长，其中微量维生素对该菌的培养而言属于（）

A. 碳源 B. 氮源 C. 无机盐 D. 生长因子

单选题容易

3. 做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是（）

A. 高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖 B. 倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 C. 为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 D. 用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上

单选题容易

1. 超市中酸奶的配料表显示其有乳杆菌、嗜热链球菌等乳酸菌。研究小组计划将酸奶中的不同乳酸菌进行分离纯化，下列操作的顺序正确的是（）

①高压蒸汽灭菌、倒固体平板

②将酸奶进行系列稀释

③准备水、培养皿并配制培养基

④挑取单菌落接种到斜面培养基

⑤用涂布器涂布并进行37℃厌氧培养

A. ①→②→③→④→⑤ B. ③→①→②→⑤→④ C. ①→③→②→⑤→④ D. ②→③→①→④→⑤

单选题普通

2. 在“酵母菌纯培养”的实验课中，学生进行平板划线的实践操作。下列叙述错误的是（）

A. 开始接种前和划线完毕后都要将接种环进行灼烧 B. 棉塞拔出后和塞上前装有培养液的试管口都要通过火焰 C. 在酒精灯火焰附近用接种环蘸取一环菌液 D. 将皿盖完全打开后用接种环在培养基表面连续划线

单选题普通

3. 棉酚是棉花植株中一种对动物有危害的毒性物质，研究人员试图从棉花田的土壤中分离筛选出高效分解棉酚的菌株。下列叙述错误的是（）

A. 筛选培养基需以棉酚为唯一的营养物质 B. 实验过程中需严格遵循无菌操作原则 C. 稀释涂布平板法或平板划线法均可用来分离纯化棉酚分解菌 D. 棉酚分解菌可分解棉酚根本原因是含有能分解棉酚相应酶的基因

单选题普通

1. 某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病，其筛选流程及抗性检测如图。下列操作正确的是（）

A. 在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内，从感病植株上采集样品 B. 将采集的样品充分消毒后，用蒸馏水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测 C. 将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落 D. 判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小

多选题普通

2. 三糖铁（TSI）培养基含有牛肉膏、蛋白胨、蔗糖、乳糖、微量葡萄糖、硫酸亚铁、氯化钠、酚红、琼脂等成分，可根据观察单一细菌对三种糖的分解能力及是否产生硫化氢，来鉴别细菌的种类。三糖铁（TSI）琼脂试验方法是：使用笔直的接种针挑取待测菌落，将接种针平稳刺入三糖铁固体斜面培养基内，然后沿原穿刺途径慢慢抽出接种针，最后在斜面上进行“之”字划线，36℃下培养18～24h，观察实验结果。酚红在酸性条件下显黄色，在碱性条件下显红色。细菌产生的硫化氢与铁盐反应生成黑色沉淀。下列叙述正确的是（）

A. 穿刺或划线的目的是为了将纯培养物进行二次传代培养，须严格控制交叉污染 B. 若培养基出现黑色沉淀，可推测该细菌能够分解牛肉膏、蛋白胨 C. 若细菌能分解乳糖和葡萄糖而产酸、产CO₂ ，推测斜面为黄色、底层为红色且有气泡 D. 若底层穿刺线四周出现扩散生长现象，可推测细菌是可以运动的

多选题普通

3. 地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%~60%能被土壤中的某些微生物分解利用，这是因为他们能够产生纤维素酶。研究者从牛的瘤胃中筛选产生纤维酶的纤维素分解菌，其筛选过程如图1所示。将丙中的菌悬液转接于含有稻草作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用刚果红处理，看到如图2所示情况，下列有关叙述，错误的是（）

A. ②过程是涂布器取乙中的菌液均匀的涂布在Ⅰ号培养表面 B. 甲、乙试管中的液体都属于液体培养基，主要作用是稀释菌种 C. Ⅰ号、Ⅱ号培养基都属于固体培养基，配置时先灭菌后调节pH D. 可挑取图2中周围出现透明圈的菌落，用平板划线法继续纯化

多选题普通

1. 细胞中的HMR蛋白与PIF4蛋白有较强的亲和力，可结合形成蛋白质复合体，从而影响植物的叶生长及根伸长。科研人员构建了酵母双杂交系统进行验证。回答下列问题：

(1) 实验需选取组氨酸缺陷型酵母（无组氨酸合成能力），已知组氨酸是酵母菌生存所必需的。现欲验证实验室存留的酵母品系GS115是否为组氨酸缺陷型酵母，先用挑取保存的菌落，将其置于完全培养液中培养，该操作需在环境下进行；后将酵母培养液涂布于的固体培养基中培养，若结果为，则说明该品系为组氨酸缺陷型酵母。该过程中，先在培养液中培养的目的是。

(2) 向该酵母品系中导入下图所示的质粒（仅展示部分片段）。可以采用法完成转化。其中Gal4启动子需要与Gal4蛋白结合才能正常启动转录，Gal4蛋白分为激活区（AD）和结合区（BD）两部分，其中结合区可以识别启动子，其识别的是启动子的，激活区招募酶与启动子结合。两部分共同起作用才能激活Gal4启动子的转录，细胞质中游离的AD、BD亲和力较弱。

(3) 现构建重组载体α以表达融合蛋白HMR—BD，构建重组载体β以表达融合蛋白PIF4—AD（融合蛋白为两个蛋白质末端相连，同时具有两个蛋白质的功能且互不影响）。先将重组载体α、β（选填“分别”或“共同”）转入组氨酸缺陷型酵母，再采用法将该酵母接种到某种固体培养基进行培养，该培养基的营养成分特点是。培养一段时间后，若，则说明HMR与PIF4蛋白有较强的亲和力。

综合题困难

2. 温度是影响微生物生长的重要因素，科研人员应用基因工程以实现通过温度控制工程菌合成所需物质。

(1) 大肠杆菌是一种常见的微生物，常被改造为基因工程菌，其原因包括（写出2点）。

(2) 为实现温度控制蛋白质合成，科研人员设计了方案1，构建表达载体（见图1），将其导入大肠杆菌，获得转基因工程菌。大肠杆菌在30℃和37℃均可生长和繁殖，当培养温度为30℃时，C基因编码的C蛋白形成二聚体，，因而大肠杆菌表达荧光蛋白。

(3) 为更精准调控荧光蛋白表达，将上述表达载体改造为方案 2中的载体（见图2）。与方案1相比，方案2的主要优势是。

(4) 为检测方案2，科研人员将该方案中的工程菌稀释涂布在固体培养基上，形成单菌落，培养温度周期控制见图3.依据方案2，每个菌落生长2天后可出现4个不同的荧光环带，请预测图4所示菌落每个环带的工程菌中荧光蛋白表达情况，在下面表格中按时间顺序，依次写出所表达荧光蛋白的颜色。

菌落环带	1	2	3	4
所表达荧光蛋白的颜色		绿、红、绿

(5) 聚羟基脂肪酸酯（PHA）常用于制备可降解的塑料包装材料。PHA是一种生物大分子，可由单体分子3HB 和4HB 随机聚合，或通过分段聚合形成嵌段共聚物（见图5），其中嵌段共聚物性能更优。共聚物的合成过程如图5.请完善以下表格，通过改造方案 2 以实现应用工程菌大规模生产优质 PHA（不考虑各种酶在不同温度下的活性差异）。

操作	目的
对方案 2表达载体的改造为：。将构建好的表达载体导入大肠杆菌，获得工程菌。	获得可以合成PHA的工程菌。
以葡萄糖为原料配置培养基，灭菌后加入上述工程菌。	配制培养基、接种。
控制发酵条件：。	发酵48 小时，获得3HB 比例为25%的嵌段共聚物。

综合题困难

3. 经人工诱变后，部分细菌由于某种酶被破坏，其细胞中某些化学反应不能正常进行，就形成了营养缺陷型菌株，这在工业生产上有较广阔的应用前景。以下是实验人员利用影印法初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程，请回答下列问题：

(1) 制备如图所示的培养基除含有细菌必需的等营养物质外，还需要加入。

(2) 倒平板时，待平板冷凝后，需要将平板倒置，这样做的目的是；图中过程①采用的接种方法是填（“平板划线法”或“稀释涂布平板法”），该方法用于微生物数量测定时，统计的菌落数往往比活菌数目（填“多”或“少”），原因是。

(3) 根据用途分类，图中基本培养基属于（填“选择”或“鉴别”）培养基。

(4) 进行过程②培养时，应先将丝绒布转印至（填“基本”或“完全”）培养基上，原因是。

(5) 利用影印法培养的优点是不同培养基中同种菌株的接种位置相同，为了完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，实验人员应挑取（填“菌落A”或“菌落B”）进行接种培养，并进一步鉴定。

(6) 科研人员用放射线处理目的菌获得两个突变株C和D，然后对突变株C和D进行实验，结果如表所示。

接种的菌种	一般培养基	实验处理及结果
C	不生长	添加营养物质甲，能生长
D	不生长	添加营养物质乙，能生长
C＋D	能生长	不添加营养物质甲、乙，都能生长

突变株C不能在一般培养基上生长的原因最可能是。将突变株C和D混合在一起，接种于一般培养基上，都能生长的最可能的原因是。

实验探究题困难

1. 下图所示实验方法的应用或原理，不恰当的是（）

实验方法	应用	原理
	A.分离绿叶中的色素	B.不同色素在层析液中溶解度不同
	C.细菌计数	D.逐步稀释

A. A B. B C. C D. D

单选题容易

2. 某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁样品，划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基，经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是（）

A. 培养基pH需偏碱性 B. 泡菜汁需多次稀释后才能划线接种 C. 需在无氧条件下培养 D. 分离得到的微生物均为乳酸菌

单选题普通

3. β-苯乙醇是赋予白酒特征风味的物质。从某酒厂采集并筛选到一株产β-苯乙醇的酵母菌应用于白酒生产。下列叙述正确的是（）

A. 所用培养基及接种工具分别采用湿热灭菌和灼烧灭菌 B. 通过配制培养基、灭菌、分离和培养能获得该酵母菌 C. 还需进行发酵实验检测该酵母菌产β-苯乙醇的能力 D. 该酵母菌的应用有利于白酒新产品的开发

多选题普通