超市中酸奶的配料表显示其有乳杆菌、嗜热链球菌等乳酸菌。研究小组计划将酸奶中的不同乳酸菌进行分离纯化，下列操作的顺序正确的是（）①高压蒸汽灭菌、倒固体平板②将酸奶进行系列稀释③准备水、培养皿并配制培养基④挑取单菌落接种到斜面培养基⑤用涂布器涂布并进行37℃厌氧培养

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1. 超市中酸奶的配料表显示其有乳杆菌、嗜热链球菌等乳酸菌。研究小组计划将酸奶中的不同乳酸菌进行分离纯化，下列操作的顺序正确的是（）

①高压蒸汽灭菌、倒固体平板

②将酸奶进行系列稀释

③准备水、培养皿并配制培养基

④挑取单菌落接种到斜面培养基

⑤用涂布器涂布并进行37℃厌氧培养

A. ①→②→③→④→⑤ B. ③→①→②→⑤→④ C. ①→③→②→⑤→④ D. ②→③→①→④→⑤

【考点】

微生物的分离和培养;

【答案】

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单选题普通

基础巩固

能力提升

变式训练

拓展培优

真题演练

换一批

1. 微生物平板划线和培养的具体操作如图所示，下列操作正确的是（）

A. ①②⑤⑥ B. ③④⑥⑦ C. ①②⑦⑧ D. ①③④⑤

单选题容易

2. 某种细菌可以在含蛋白质、牛肉膏、氯化钠和微量维生素的培养基中生长，其中微量维生素对该菌的培养而言属于（）

A. 碳源 B. 氮源 C. 无机盐 D. 生长因子

单选题容易

3. 做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是（）

A. 高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖 B. 倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 C. 为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 D. 用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上

单选题容易

1. 在“酵母菌纯培养”的实验课中，学生进行平板划线的实践操作。下列叙述错误的是（）

A. 开始接种前和划线完毕后都要将接种环进行灼烧 B. 棉塞拔出后和塞上前装有培养液的试管口都要通过火焰 C. 在酒精灯火焰附近用接种环蘸取一环菌液 D. 将皿盖完全打开后用接种环在培养基表面连续划线

单选题普通

2. 棉酚是棉花植株中一种对动物有危害的毒性物质，研究人员试图从棉花田的土壤中分离筛选出高效分解棉酚的菌株。下列叙述错误的是（）

A. 筛选培养基需以棉酚为唯一的营养物质 B. 实验过程中需严格遵循无菌操作原则 C. 稀释涂布平板法或平板划线法均可用来分离纯化棉酚分解菌 D. 棉酚分解菌可分解棉酚根本原因是含有能分解棉酚相应酶的基因

单选题普通

3. 营养缺陷型大肠杆菌需在基本培养基中添加某些物质才能生长。A、B两种缺陷型菌株混合培养后能在基本培养基上出现菌落。如下所示，科学家分别对A、B两种缺陷型菌株进行药物处理，使其停止分裂（不致死），混合培养在基本培养基上。已知两种菌株间可发生DNA转移且仅由A菌株转移到B菌株，不考虑基因突变，下列对实验结果的判断正确的是（）

①药物处理的A菌株+未处理的B菌株→实验结果

②药物处理的B菌株+未处理的A菌株→实验结果

选项	①培养基上是否有菌落	②培养基上是否有菌落
A	有	有
B	无	无
C	有	无
D	无	有

A. A B. B C. C D. D

单选题普通

1. 某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病，其筛选流程及抗性检测如图。下列操作正确的是（）

A. 在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内，从感病植株上采集样品 B. 将采集的样品充分消毒后，用蒸馏水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测 C. 将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落 D. 判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小

多选题普通

2. 三糖铁（TSI）培养基含有牛肉膏、蛋白胨、蔗糖、乳糖、微量葡萄糖、硫酸亚铁、氯化钠、酚红、琼脂等成分，可根据观察单一细菌对三种糖的分解能力及是否产生硫化氢，来鉴别细菌的种类。三糖铁（TSI）琼脂试验方法是：使用笔直的接种针挑取待测菌落，将接种针平稳刺入三糖铁固体斜面培养基内，然后沿原穿刺途径慢慢抽出接种针，最后在斜面上进行“之”字划线，36℃下培养18～24h，观察实验结果。酚红在酸性条件下显黄色，在碱性条件下显红色。细菌产生的硫化氢与铁盐反应生成黑色沉淀。下列叙述正确的是（）

A. 穿刺或划线的目的是为了将纯培养物进行二次传代培养，须严格控制交叉污染 B. 若培养基出现黑色沉淀，可推测该细菌能够分解牛肉膏、蛋白胨 C. 若细菌能分解乳糖和葡萄糖而产酸、产CO₂ ，推测斜面为黄色、底层为红色且有气泡 D. 若底层穿刺线四周出现扩散生长现象，可推测细菌是可以运动的

多选题普通

3. 地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%~60%能被土壤中的某些微生物分解利用，这是因为他们能够产生纤维素酶。研究者从牛的瘤胃中筛选产生纤维酶的纤维素分解菌，其筛选过程如图1所示。将丙中的菌悬液转接于含有稻草作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用刚果红处理，看到如图2所示情况，下列有关叙述，错误的是（）

A. ②过程是涂布器取乙中的菌液均匀的涂布在Ⅰ号培养表面 B. 甲、乙试管中的液体都属于液体培养基，主要作用是稀释菌种 C. Ⅰ号、Ⅱ号培养基都属于固体培养基，配置时先灭菌后调节pH D. 可挑取图2中周围出现透明圈的菌落，用平板划线法继续纯化

多选题普通

1. 木质素是一类复杂的有机聚合物，在维管植物和一些藻类的支持组织中起着重要的结构作用，在细胞壁的形成中特别重要，特别是在木材和树皮中，因为这些部分富含木质素，从而赋予它们刚性并且不容易腐烂的特性。科研团队尝试从木材场土壤中筛选分离出木质素分解菌，实验流程如下图所示。请回答下列问题：

(1) 用于培养微生物的培养基可以为微生物提供的营养物质主要有。实验时，一般对配制的培养基采用法进行灭菌，对培养皿、烧瓶及吸管等玻璃器皿一般用法灭菌。

(2) 若每个环节的稀释倍数与步骤②的稀释倍数相同，则步骤④试管内的无菌水是mL。图示操作过程中，共将1g土壤稀释了倍。实验过程中，纯化细菌的关键是无菌操作和。

(3) ⑤纯化培养过程中所采用的接种方法是，在五个固体培养基上分别接种0.1mL该菌菌液，适宜条件下培养一段时间后，若培养基上的菌落数分别为：28、70、144、139、131，则每克土壤样品中该菌的数量约为个。

实验探究题普通

2. 细胞中的HMR蛋白与PIF4蛋白有较强的亲和力，可结合形成蛋白质复合体，从而影响植物的叶生长及根伸长。科研人员构建了酵母双杂交系统进行验证。回答下列问题：

(1) 实验需选取组氨酸缺陷型酵母（无组氨酸合成能力），已知组氨酸是酵母菌生存所必需的。现欲验证实验室存留的酵母品系GS115是否为组氨酸缺陷型酵母，先用挑取保存的菌落，将其置于完全培养液中培养，该操作需在环境下进行；后将酵母培养液涂布于的固体培养基中培养，若结果为，则说明该品系为组氨酸缺陷型酵母。该过程中，先在培养液中培养的目的是。

(2) 向该酵母品系中导入下图所示的质粒（仅展示部分片段）。可以采用法完成转化。其中Gal4启动子需要与Gal4蛋白结合才能正常启动转录，Gal4蛋白分为激活区（AD）和结合区（BD）两部分，其中结合区可以识别启动子，其识别的是启动子的，激活区招募酶与启动子结合。两部分共同起作用才能激活Gal4启动子的转录，细胞质中游离的AD、BD亲和力较弱。

(3) 现构建重组载体α以表达融合蛋白HMR—BD，构建重组载体β以表达融合蛋白PIF4—AD（融合蛋白为两个蛋白质末端相连，同时具有两个蛋白质的功能且互不影响）。先将重组载体α、β（选填“分别”或“共同”）转入组氨酸缺陷型酵母，再采用法将该酵母接种到某种固体培养基进行培养，该培养基的营养成分特点是。培养一段时间后，若，则说明HMR与PIF4蛋白有较强的亲和力。

综合题困难

3. 磷是植物生长的重要元素，施入土中的磷大多数与Ca²⁺等离子结合形成难溶性磷酸盐。科研人员从贡柑果园土中选出可以将难溶性或不溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌，主要流程见下图，请回答下列问题：

(1) 经步骤③最后一次稀释之后若在3个平板上分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，得到的结果是：39、38、37，则每克土样中的活菌数为个。运用这种方法统计的结果往往比实际值，原因是。

(2) 步骤④中待菌落长好后挑出溶磷圈直径（D）与菌落直径（d）比值较的菌落。通常情况下，对获得的纯菌种可以依据对细菌进行初步的鉴定和分类。

(3) 常采用法对高效解磷菌进行分离和计数，要判断选择培养基是否起到了选择作用，需要设置作为对照。

(4) 为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基中，并在37℃、200r·min^-1摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到曲线：

用摇床进行培养的好处是（写出两点）。结果表明最优良的解磷菌株是。

(5) 纯化菌种时，也可按下图所示接种方法，接种环需要灼烧次。

综合题普通

1. 下图所示实验方法的应用或原理，不恰当的是（）

实验方法	应用	原理
	A.分离绿叶中的色素	B.不同色素在层析液中溶解度不同
	C.细菌计数	D.逐步稀释

A. A B. B C. C D. D

单选题容易

2. 某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁样品，划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基，经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是（）

A. 培养基pH需偏碱性 B. 泡菜汁需多次稀释后才能划线接种 C. 需在无氧条件下培养 D. 分离得到的微生物均为乳酸菌

单选题普通

3. 为避免航天器在执行载人航天任务时出现微生物污染风险，需要对航天器及洁净的组装车间进行环境微生物检测。下列叙述错误的是（）

A. 航天器上存在适应营养物质匮乏等环境的极端微生物 B. 细菌形成菌膜粘附于航天器设备表面产生生物腐蚀 C. 在组装车间地面和设备表面采集环境微生物样品 D. 采用平板划线法等分离培养微生物，观察菌落特征

单选题困难