1. 细胞中的HMR蛋白与PIF4蛋白有较强的亲和力,可结合形成蛋白质复合体,从而影响植物的叶生长及根伸长。科研人员构建了酵母双杂交系统进行验证。回答下列问题:
(1) 实验需选取组氨酸缺陷型酵母(无组氨酸合成能力),已知组氨酸是酵母菌生存所必需的。现欲验证实验室存留的酵母品系GS115是否为组氨酸缺陷型酵母,先用挑取保存的菌落,将其置于完全培养液中培养,该操作需在环境下进行;后将酵母培养液涂布于的固体培养基中培养,若结果为,则说明该品系为组氨酸缺陷型酵母。该过程中,先在培养液中培养的目的是
(2) 向该酵母品系中导入下图所示的质粒(仅展示部分片段)。可以采用法完成转化。其中Gal4启动子需要与Gal4蛋白结合才能正常启动转录,Gal4蛋白分为激活区(AD)和结合区(BD)两部分,其中结合区可以识别启动子,其识别的是启动子的,激活区招募酶与启动子结合。两部分共同起作用才能激活Gal4启动子的转录,细胞质中游离的AD、BD亲和力较弱。

(3) 现构建重组载体α以表达融合蛋白HMR—BD,构建重组载体β以表达融合蛋白PIF4—AD(融合蛋白为两个蛋白质末端相连,同时具有两个蛋白质的功能且互不影响)。先将重组载体α、β(选填“分别”或“共同”)转入组氨酸缺陷型酵母,再采用法将该酵母接种到某种固体培养基进行培养,该培养基的营养成分特点是。培养一段时间后,若,则说明HMR与PIF4蛋白有较强的亲和力。
【考点】
微生物的分离和培养; 组织培养基的成分及作用; 基因工程的操作程序(详细);
【答案】

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