随着环保要求的不断提高，作为清洁能源的生物气体备受青睐，而这些气体中混有的H2S容易腐蚀运输管道，并且燃烧后会产生污染物二氧化硫，因此需要将其清除。脱去H2S时生物反应体系中生成的副产物Na2S2O3和Na2SO4需要被降解，并且反应过程中钠盐的浓度会不断升高，所以筛选嗜盐和脱硫（脱去Na2S2O3和Na2SO4中的S2- ）性能优越的菌种均势在必行。已知嗜盐脱硫菌的菌落周围有明显的硫沉淀，颜色会由白色渐变为褐色。下表是两个相关的培养基配方。据此分析下列问题：表1 脱硫富集培养基 NaHCO3 Na2S2O3·5H2O （NH4）2SO4 KNO3 K2HPO4 50g/L 50g/L 1g/L 1g/L 2g/L 表2 嗜盐脱硫选择培养基 NaHCO3 Na2S2O3·5H2O （NH4）2SO4 KNO3 K2HPO4 NaCl 琼脂 50g/L 50g/L 1g/L 1g/L 2g/L 50g/L 20g/L

1. 随着环保要求的不断提高，作为清洁能源的生物气体备受青睐，而这些气体中混有的H₂S容易腐蚀运输管道，并且燃烧后会产生污染物二氧化硫，因此需要将其清除。脱去H₂S时生物反应体系中生成的副产物Na₂S₂O₃和Na₂SO₄需要被降解，并且反应过程中钠盐的浓度会不断升高，所以筛选嗜盐和脱硫（脱去Na₂S₂O₃和Na₂SO₄中的S^2-）性能优越的菌种均势在必行。已知嗜盐脱硫菌的菌落周围有明显的硫沉淀，颜色会由白色渐变为褐色。下表是两个相关的培养基配方。据此分析下列问题：

表1 脱硫富集培养基

NaHCO₃	Na₂S₂O₃·5H₂O	（NH₄）₂SO₄	KNO₃	K₂HPO₄
50g/L	50g/L	1g/L	1g/L	2g/L

表2 嗜盐脱硫选择培养基

NaHCO₃	Na₂S₂O₃·5H₂O	（NH₄）₂SO₄	KNO₃	K₂HPO₄	NaCl	琼脂
50g/L	50g/L	1g/L	1g/L	2g/L	50g/L	20g/L

(1) 筛选菌株时，需先在液体富集培养基中培养，该操作的目的是。

(2) 嗜盐脱硫选择培养基按照物理状态划分属于培养基，制备这种物理状态的培养基的目的是。

(3) 若需要对筛选的菌株进行计数，则应选择的接种方法是，使用的接种工具是，选取的菌落作为计数的目的菌株。

(4) 进一步研究环境对所筛菌株的影响，绘制曲线如图，则该菌株适宜温度范围是（填写6℃的温差范围），适宜pH范围是。

【考点】

微生物的分离和培养;

【答案】

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综合题普通

1. 如表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题

成分	蛋白胨	乳糖	蔗糖	K₂HPO₄	指示剂	琼脂
含量（g）	10.0	5.0	5.0	2.0	0.2	12.0
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到 1000mL

(1) 上表中的指示剂可以是，若根据用途划分，该培养基属于（填“选择”或“鉴别”）培养基。若根据物理状态分，该培养基属于培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌，培养基的营养成分必需怎样更改？。

(2) 培养基配置的过程是称量→溶解→→分装→→

综合题普通

2. 测定水样是否符合饮用水卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。流程如图所示，滤膜法的大致流程：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红美蓝的培养基(EMB 培养基)上培养→统计菌落数目。据图回答问题：

(1) 过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要进行灭菌处理的是。与过滤有关的操作都要在旁进行。

(2) 将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，这属于微生物培养中的操作。从物理状态角度分析，EMB 培养基属于培养基。

(3) 某生物兴趣小组的某同学尝试按照上述方法进行测定，无菌操作下将 10mL 待测水样加入到 90mL 无菌水中，稀释后的菌液通过滤膜法测得 EMB 培养基上的菌落数平均为124，黑色菌落数平均为31，则推测1升待测水样中的大肠杆菌数目为个。

(4) 该同学进一步思考，利用滤膜法也可能用于测定待测水样中其他微生物的数目。他取了两份水样，一份待测水样来自变酸的果酒，从中检测到两种微生物，它们在结构上的主要区别是。另一份来自明德中学屈子湖，若要通过测量蓝藻的数目来研究水华，应更换上述过滤装置中的滤膜，选择孔径(填 “更小”或“不变”或“更大”)的滤膜，而培养基配方中则必需添加(水、无机盐、碳源、氮源)。

综合题普通

3. 某种农药使用量大、毒性强、难降解，进入环境后，对人的健康和农业生态平衡有很多不利影响。利用微生物降解该农药是解决这类问题的主要途径。回答下列问题：

(1) 利用微生物修复被该农药污染的土壤的原理是。

(2) 筛选高效降解菌的样品主要来自的土壤。

(3) 筛选降解该农药微生物的培养基成分除了有蛋白胨、氯化钠、磷酸二氢钾、水、葡萄糖外，还应添加一定浓度的该农药。蛋白胨的作用是（答出2点即可）。氯化钠的作用是（答出2点即可）。可通过法获得降解该农药微生物的菌种。

(4) 为了保证获得的菌种对该农药污染土壤的修复效果，还需要进行的研究有（答出1点即可）。

综合题普通