某学校利用平板划线法接种进行酵母菌的纯培养，实验中发现了一些异常现象，下列分析不合理的是（　　）选项异常现象原因分析A平板上产生了杂菌菌落，但未接种的平板上无菌落产生培养基灭菌不彻底B接种后的平板上未形成酵母菌菌落接种环灼烧后未冷却处理C平板上有大量水滴未进行倒置培养D平板上未分离出单个菌落每次划线前都重新蘸取菌液

1. 在分离、纯化细菌的实验中，划线接种（甲）、培养结果（乙）如图，a、b、c、d是划线的四个区域。下列叙述错误的是（　　）

A. 所用固体培养基中一般添加琼脂 B. 连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落 C. 甲图中的a区域为划线的起始区域 D. 完成该实验过程，接种环共需灼烧处理5次

单选题容易

2. 在微生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。平板划线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法。下列说法错误的是（　　）

A. 平板划线法在每次划线前后都灼烧接种环的目的是防止杂菌污染 B. 用稀释涂布平板法也可用于微生物的计数，有时也可以不稀释直接涂布 C. 两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度 D. 两方法使用的接种工具分别是接种环和涂布器

单选题容易

3. 下图为微生物平板划线示意图，划线的顺序为1、2、3、4、5。下列叙述正确的是（　　）

A. 在每一区域内画线时接种环上的菌种直接来源于菌液 B. 划线操作时应在酒精灯火焰旁边打开皿盖划线接种，接种完后在皿盖上做上相应标记 C. 每次划线只能从上一次划线的末端开始，才能确保菌种逐步稀释以得到单菌落 D. 第1区和第5区的划线最终要连接起来，以便比较前后的菌落数

单选题容易

1. 从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，下列实验操作不正确的是（）

A. 测定土壤中细菌的数量，一般选用 $\text{[math]}$ 倍的稀释液进行平板培养 B. 当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液的一个活菌 C. 用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌 D. 从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株

单选题普通

2. 如图是实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作步骤，下列说法错误的是（）

A. ①步骤使用的培养基已经灭菌 B. ①②③步骤操作时均需要在酒精灯火焰旁进行 C. ④在恒温培养箱中培养时需要将平板倒置 D. ④操作过程中，需灼烧接种环5次

单选题普通

3. 某地土壤有机物W污染严重，为改善土壤环境，研究人员从土壤中分离出可高效降解W的细菌菌株。以下是研究人员分离该细菌菌株的示意图，使用以W为唯一碳源的培养基培养该细菌，W被降解后会在菌落周围形成透明圈。下列说法正确的是（）

A. 实验前需将土壤高温灭菌后再倒入无菌水进行稀释 B. 实验结果显示E是降解W较理想的菌株，可将其进一步纯化 C. 用平板划线法也可以达到稀释细菌的目的，而且可以对细菌进行计数 D. 纯化培养时应用涂布器从盛有菌液的试管中蘸取菌液均匀涂布于平板上

单选题普通

1. 下图中甲和乙是两种微生物接种方法的部分操作过程或结果，下列有关叙述错误的是（）

A. 甲的同一稀释度至少要对3个平板重复计数，一般选择菌落数为30-300的平板 B. 甲中涂布前要将涂布器灼烧，冷却后才能取菌液，乙中接种环需要灼烧5次 C. 乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端 D. 甲、乙操作中只有甲可以用于微生物的计数，结果往往比活菌的实际数目大

多选题容易

2. 淀粉酶在工业生产上应用最早，迄今仍是用途最广、产量最大的酶制剂产品之一。为了提高淀粉酶的生产水平，首先要从土壤中筛选出产淀粉酶的活性菌株。某研究人员对所取土样进行产淀粉酶的细菌的分离操作（A组）和计数操作（B组），过程如图Ⅰ。图Ⅱ是一种接种方法示意图。请回答下列问题：

（1）步骤③、④所用培养基的成分，最大的区别是种类不同。

（2）步骤④、⑤所用培养基的成分，最大的区别是固体培养基中添加了。步骤⑤、⑧接种时需设置未接种培养基做对照，目的是。

（3）步骤⑦中，将1mL菌液分别稀释10倍和100倍，每种稀释度经过步骤⑧各在3个平板上接种（每个平板的接种量为0.1mL），经适当培养后，2组平板上的菌落数分别为59、57、58和2、7、5。据此可得出每升菌液中的活菌数为个，据此可推测适宜的土壤稀释倍数为倍。

（4）图Ⅱ所用的接种方法（填“能”或“不能”）对活菌进行计数；甲、乙、丙为划线的三个区域，为正确完成整个接种过程，接种环要进行次灼烧灭菌，其中灭菌目的相同的是第次。

综合题普通

3. 有人说手机屏幕细菌比马桶按钮上的多。两个兴趣小组分别展开如下图的实验过程。下列分析正确的是（　　）

固定面积用无菌棉取样

A. 以上两组实验在接种过程中均需要用到酒精灯、接种环等 B. 通过观察菌落的形态、大小，可知手机屏幕和马桶按钮上都存在多种微生物 C. 两组实验操作均正确且完全一致，但结果截然不同，原因可能是取样部位不同 D. 该实验对照组可以设置为取相同培养基接种等量无菌水进行培养

多选题普通

1. 我国盐碱土面积约9913万hm² ，其中pH值高于9、盐含量大于0.6%的重度盐碱地每年以1.4%的增长率增长。利用固氮微生物改善植物根际环境，是盐碱地改良的重要方法。科研人员欲从热带珊瑚岛礁的土壤中分离并鉴定耐盐碱固氮菌的单菌落，以期应用于盐碱地改良。根据所学内容，回答下列问题：

(1) 分离目的菌株时所利用的培养基从物理形态和功能上划分，属于培养基。培养基中必须添加的营养成分有；调节pH值高于9应在（填“灭菌前”或“灭菌后”）进行。

(2) 得到土壤浸出液后用法接种到培养基上可得到单菌落并进行计数；接种过程中使用的接种工具应采用灭菌；该种计数方法结果往往小于实际细菌数的原因是。

(3) 将接种后的平板置于适宜的环境中进行培养，同时将一个未接种的空白平板置于相同的环境中进行培养的目的是。

(4) 培养一段时间后研究人员可根据菌落的形状、大小、颜色等特征初步区分所获得菌落是否为固氮菌，原因是在一定的培养条件下，。实验过程中还发现在高盐、高pH、无氮培养上进行长时间培养后会出现一些特殊的菌落，将它们单独转移到新制备的高盐、高pH、无氮培养基上时却无法生长，形成这种现象的原因是。

实验探究题普通

2. 木质素是一类复杂的有机聚合物，在维管植物和一些藻类的支持组织中起着重要的结构作用，在细胞壁的形成中特别重要，特别是在木材和树皮中，因为这些部分富含木质素，从而赋予它们刚性并且不容易腐烂的特性。科研团队尝试从木材场土壤中筛选分离出木质素分解菌，实验流程如下图所示。请回答下列问题：

(1) 用于培养微生物的培养基可以为微生物提供的营养物质主要有。实验时，一般对配制的培养基采用法进行灭菌，对培养皿、烧瓶及吸管等玻璃器皿一般用法灭菌。

(2) 若每个环节的稀释倍数与步骤②的稀释倍数相同，则步骤④试管内的无菌水是mL。图示操作过程中，共将1g土壤稀释了倍。实验过程中，纯化细菌的关键是无菌操作和。

(3) ⑤纯化培养过程中所采用的接种方法是，在五个固体培养基上分别接种0.1mL该菌菌液，适宜条件下培养一段时间后，若培养基上的菌落数分别为：28、70、144、139、131，则每克土壤样品中该菌的数量约为个。

实验探究题普通

3. 细胞中的HMR蛋白与PIF4蛋白有较强的亲和力，可结合形成蛋白质复合体，从而影响植物的叶生长及根伸长。科研人员构建了酵母双杂交系统进行验证。回答下列问题：

(1) 实验需选取组氨酸缺陷型酵母（无组氨酸合成能力），已知组氨酸是酵母菌生存所必需的。现欲验证实验室存留的酵母品系GS115是否为组氨酸缺陷型酵母，先用挑取保存的菌落，将其置于完全培养液中培养，该操作需在环境下进行；后将酵母培养液涂布于的固体培养基中培养，若结果为，则说明该品系为组氨酸缺陷型酵母。该过程中，先在培养液中培养的目的是。

(2) 向该酵母品系中导入下图所示的质粒（仅展示部分片段）。可以采用法完成转化。其中Gal4启动子需要与Gal4蛋白结合才能正常启动转录，Gal4蛋白分为激活区（AD）和结合区（BD）两部分，其中结合区可以识别启动子，其识别的是启动子的，激活区招募酶与启动子结合。两部分共同起作用才能激活Gal4启动子的转录，细胞质中游离的AD、BD亲和力较弱。

(3) 现构建重组载体α以表达融合蛋白HMR—BD，构建重组载体β以表达融合蛋白PIF4—AD（融合蛋白为两个蛋白质末端相连，同时具有两个蛋白质的功能且互不影响）。先将重组载体α、β（选填“分别”或“共同”）转入组氨酸缺陷型酵母，再采用法将该酵母接种到某种固体培养基进行培养，该培养基的营养成分特点是。培养一段时间后，若，则说明HMR与PIF4蛋白有较强的亲和力。

综合题困难

1. 下图所示实验方法的应用或原理，不恰当的是（）

实验方法	应用	原理
	A.分离绿叶中的色素	B.不同色素在层析液中溶解度不同
	C.细菌计数	D.逐步稀释

A. A B. B C. C D. D

单选题容易

2. 某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁样品，划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基，经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是（）

A. 培养基pH需偏碱性 B. 泡菜汁需多次稀释后才能划线接种 C. 需在无氧条件下培养 D. 分离得到的微生物均为乳酸菌

单选题普通

3. 为避免航天器在执行载人航天任务时出现微生物污染风险，需要对航天器及洁净的组装车间进行环境微生物检测。下列叙述错误的是（）

A. 航天器上存在适应营养物质匮乏等环境的极端微生物 B. 细菌形成菌膜粘附于航天器设备表面产生生物腐蚀 C. 在组装车间地面和设备表面采集环境微生物样品 D. 采用平板划线法等分离培养微生物，观察菌落特征

单选题困难

选项	异常现象	原因分析
A	平板上产生了杂菌菌落，但未接种的平板上无菌落产生	培养基灭菌不彻底
B	接种后的平板上未形成酵母菌菌落	接种环灼烧后未冷却处理
C	平板上有大量水滴	未进行倒置培养
D	平板上未分离出单个菌落	每次划线前都重新蘸取菌液