下列关于微生物培养和利用的叙述，正确的是（　　）

1. 下列关于微生物培养和利用的叙述，正确的是（　　）

A. 获得纯净的培养物的关键是防止外来杂菌的入侵 B. 临时保藏菌种可以将菌种接到固体斜面培养基上，一般在 4℃的冰箱中保藏 C. 消毒和灭菌都是为了给微生物的培养提供无菌条件，所以二者没有差别 D. 细菌数目可以通过稀释涂布平板法和滤膜法来测定，通过培养基上的菌落来计数

【考点】

微生物的分离和培养; 灭菌技术;

【答案】

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多选题普通

基础巩固

能力提升

变式训练

拓展培优

真题演练

换一批

1. 理垃圾的有效方法之一是用微生物对其进行降解，下图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。下列叙述错误的是（）

A. 图中培养基应以淀粉为唯一碳源，将菌液接种到培养基应使用平板划线法 B. 菌落①与②周围透明圈的大小不同原因可能是两个菌群对碘液分解能力不同 C. 若菌落①与②分属细菌和真菌，则二者结构上最主要区别是有无核膜包被的细胞核 D. 实验结束后，为防止造成环境污染，使用过的培养基应灭菌处理后再倒掉

多选题容易

1. 某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病，其筛选流程及抗性检测如图。下列操作正确的是（）

A. 在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内，从感病植株上采集样品 B. 将采集的样品充分消毒后，用蒸馏水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测 C. 将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落 D. 判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小

多选题普通

2. 某检测小组为验证使用公筷的必要性，将聚餐时的每道菜品分为两份，一份使用公筷进食，一份不使用公筷进食；另外，还特意设置未食用菜作为空白对照。通过无菌操作采集样品，经冷链运送至实验室，定量稀释后等量接种于牛肉膏蛋白胨培养基上，恒温培养适宜时间，进行细菌菌落总数统计，结果如下表，其中CFU/g表示每克样品在培养基上形成的菌落总数。下列说法正确的是（）

菜名	结果（CFU/g）
	餐前	餐后
	餐前	公筷	非公筷	未食用
凉拌黄瓜	14000	16000	45000	/
香辣牛蛙	60	150	560	130

A. 每道菜品应用公筷和非公筷夹取相同次数，目的是排除无关变量的干扰 B. 使用公筷可明显降低菜品细菌污染，使用非公筷会导致菜品间的交叉污染 C. 实验采用稀释涂布平板法统计活菌数目，实验结果一般比实际值偏高 D. 牛肉膏蛋白脉培养基需经高压蒸汽灭菌后倒平板

多选题普通

3. 三糖铁（TSI）培养基含有牛肉膏、蛋白胨、蔗糖、乳糖、微量葡萄糖、硫酸亚铁、氯化钠、酚红、琼脂等成分，可根据观察单一细菌对三种糖的分解能力及是否产生硫化氢，来鉴别细菌的种类。三糖铁（TSI）琼脂试验方法是：使用笔直的接种针挑取待测菌落，将接种针平稳刺入三糖铁固体斜面培养基内，然后沿原穿刺途径慢慢抽出接种针，最后在斜面上进行“之”字划线，36℃下培养18～24h，观察实验结果。酚红在酸性条件下显黄色，在碱性条件下显红色。细菌产生的硫化氢与铁盐反应生成黑色沉淀。下列叙述正确的是（）

A. 穿刺或划线的目的是为了将纯培养物进行二次传代培养，须严格控制交叉污染 B. 若培养基出现黑色沉淀，可推测该细菌能够分解牛肉膏、蛋白胨 C. 若细菌能分解乳糖和葡萄糖而产酸、产CO₂ ，推测斜面为黄色、底层为红色且有气泡 D. 若底层穿刺线四周出现扩散生长现象，可推测细菌是可以运动的

多选题普通

1. 某兴趣小组为研究“使用公筷对餐后菜品细菌数量的影响”，将每道菜分为3盘，一盘取样冷藏，一盘使用公筷，一盘不用公筷，实验过程如下图。下列相关操作或叙述错误的是（）

A. 配制培养基X需采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌 B. 计数时应选择菌落数在30~300之间的平板 C. 在固体培养基X上用涂布器接种细菌 D. 固体培养基X对菜品中的细菌有选择性

单选题普通

2. 微生物平板划线和培养的具体操作如图所示，下列操作正确的是（）

A. ①②⑤⑥ B. ③④⑥⑦ C. ①②⑦⑧ D. ①③④⑤

单选题容易

3. 苯丙酮尿症（PKU）患者由于苯丙氨酸代谢途径中的酶缺陷，导致苯丙氨酸及其代谢产物苯丙酮酸在体内蓄积，从而对神经系统造成损伤，低蛋白饮食是目前主要的治疗手段。为探究新的治疗手段，科研人员在大肠埃希菌EcN菌株中导入苯丙氨酸裂解酶基因，构建了表达苯丙氨酸裂解酶的工程益生菌EcN-PAL，并分别在有氧、缺氧条件下培养EcN-PAL和EcN，检测苯丙氨酸降解率，结果如图。下列分析错误的是( )

注：苯丙氨酸降解率= $\text{[math]}$ ×100%

A. 培养基应加入一定浓度的苯丙氨酸并进行高压蒸汽灭菌处理 B. 设置EcN组是为了排除苯丙氨酸自然降解对实验结果的干扰 C. 对比有氧、缺氧条件下的表现可帮助评价其在消化道中作用 D. 若EcN-PAL能大量分泌苯丙氨酸裂解酶可以提高其治疗效果

单选题普通

1. 我国盐碱土面积约9913万hm² ，其中pH值高于9、盐含量大于0.6%的重度盐碱地每年以1.4%的增长率增长。利用固氮微生物改善植物根际环境，是盐碱地改良的重要方法。科研人员欲从热带珊瑚岛礁的土壤中分离并鉴定耐盐碱固氮菌的单菌落，以期应用于盐碱地改良。根据所学内容，回答下列问题：

(1) 分离目的菌株时所利用的培养基从物理形态和功能上划分，属于培养基。培养基中必须添加的营养成分有；调节pH值高于9应在（填“灭菌前”或“灭菌后”）进行。

(2) 得到土壤浸出液后用法接种到培养基上可得到单菌落并进行计数；接种过程中使用的接种工具应采用灭菌；该种计数方法结果往往小于实际细菌数的原因是。

(3) 将接种后的平板置于适宜的环境中进行培养，同时将一个未接种的空白平板置于相同的环境中进行培养的目的是。

(4) 培养一段时间后研究人员可根据菌落的形状、大小、颜色等特征初步区分所获得菌落是否为固氮菌，原因是在一定的培养条件下，。实验过程中还发现在高盐、高pH、无氮培养上进行长时间培养后会出现一些特殊的菌落，将它们单独转移到新制备的高盐、高pH、无氮培养基上时却无法生长，形成这种现象的原因是。

实验探究题普通

2. 木质素是一类复杂的有机聚合物，在维管植物和一些藻类的支持组织中起着重要的结构作用，在细胞壁的形成中特别重要，特别是在木材和树皮中，因为这些部分富含木质素，从而赋予它们刚性并且不容易腐烂的特性。科研团队尝试从木材场土壤中筛选分离出木质素分解菌，实验流程如下图所示。请回答下列问题：

(1) 用于培养微生物的培养基可以为微生物提供的营养物质主要有。实验时，一般对配制的培养基采用法进行灭菌，对培养皿、烧瓶及吸管等玻璃器皿一般用法灭菌。

(2) 若每个环节的稀释倍数与步骤②的稀释倍数相同，则步骤④试管内的无菌水是mL。图示操作过程中，共将1g土壤稀释了倍。实验过程中，纯化细菌的关键是无菌操作和。

(3) ⑤纯化培养过程中所采用的接种方法是，在五个固体培养基上分别接种0.1mL该菌菌液，适宜条件下培养一段时间后，若培养基上的菌落数分别为：28、70、144、139、131，则每克土壤样品中该菌的数量约为个。

实验探究题普通

3. 酵母菌的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母菌可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母菌，并进行大量培养。如图所示为操作流程，请回答下列问题：

(1) 配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的，并进行灭菌，然后及时。

(2) 取步骤②中不同梯度的稀释液加到标记好的无菌培养皿中，在步骤③中将温度

约 (填“25℃”“50℃”或“80℃”)的培养基倒入培养皿混匀，选此温度的原因为：。冷凝后倒置培养，倒置培养的目的为：。

(3) 挑取分离平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线。下列叙述不合理的

有。

a. 为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌

b.划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落

c. 挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母菌细胞中甲醇的含量

d. 可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株

(4) 步骤⑤中为使酵母菌数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和供应。为监测酵母菌的活细胞密度，经等体积台盼蓝染液染色，理论上应统计色细胞的个数。

实验探究题普通

1. β-苯乙醇是赋予白酒特征风味的物质。从某酒厂采集并筛选到一株产β-苯乙醇的酵母菌应用于白酒生产。下列叙述正确的是（）

A. 所用培养基及接种工具分别采用湿热灭菌和灼烧灭菌 B. 通过配制培养基、灭菌、分离和培养能获得该酵母菌 C. 还需进行发酵实验检测该酵母菌产β-苯乙醇的能力 D. 该酵母菌的应用有利于白酒新产品的开发

多选题普通

2. 为提高一株石油降解菌的净化能力，将菌涂布于石油为唯一碳源的固体培养基上，以致死率为90%的辐照剂量诱变处理，下列叙述不合理的是（）

A. 将培养基分装于培养皿中后灭菌，可降低培养基污染的概率 B. 涂布用的菌浓度应控制在30~300个/mL C. 需通过预实验考察辐射时间对存活率的影响，以确定最佳诱变时间 D. 挑取培养基上长出的较大单菌落，给纯化后进行降解效率分析

多选题普通

3. 人体皮肤表面存在着多种微生物，某同学拟从中分离出葡萄球菌。下述操作不正确的是（　　）

A. 对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌 B. 使用无菌棉拭子从皮肤表面取样 C. 用取样后的棉拭子在固体培养基上涂布 D. 观察菌落的形态和颜色等进行初步判断

单选题普通