为提高一株石油降解菌的净化能力，将菌涂布于石油为唯一碳源的固体培养基上，以致死率为90%的辐照剂量诱变处理，下列叙述不合理的是（）

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1. 为提高一株石油降解菌的净化能力，将菌涂布于石油为唯一碳源的固体培养基上，以致死率为90%的辐照剂量诱变处理，下列叙述不合理的是（）

A. 将培养基分装于培养皿中后灭菌，可降低培养基污染的概率 B. 涂布用的菌浓度应控制在30~300个/mL C. 需通过预实验考察辐射时间对存活率的影响，以确定最佳诱变时间 D. 挑取培养基上长出的较大单菌落，给纯化后进行降解效率分析

【考点】

微生物的分离和培养; 测定某种微生物的数量; 灭菌技术;

【答案】

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多选题普通

基础巩固

能力提升

变式训练

拓展培优

换一批

1. 理垃圾的有效方法之一是用微生物对其进行降解，下图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。下列叙述错误的是（）

A. 图中培养基应以淀粉为唯一碳源，将菌液接种到培养基应使用平板划线法 B. 菌落①与②周围透明圈的大小不同原因可能是两个菌群对碘液分解能力不同 C. 若菌落①与②分属细菌和真菌，则二者结构上最主要区别是有无核膜包被的细胞核 D. 实验结束后，为防止造成环境污染，使用过的培养基应灭菌处理后再倒掉

多选题容易

1. 某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病，其筛选流程及抗性检测如图。下列操作正确的是（）

A. 在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内，从感病植株上采集样品 B. 将采集的样品充分消毒后，用蒸馏水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测 C. 将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落 D. 判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小

多选题普通

2. 如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是（）

A. 某一稀释度下至少涂3个平板，该实验方法统计得到的结果常会比实际活菌数目少 B. 3号试管中的样品溶液稀释倍数为10⁴倍 C. 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×10⁸个 D. 该实验需设置牛肉膏蛋白胨培养基作对照，用以判断选择培养基是否有选择作用

多选题普通

3. 为对某样品中噬菌体计数，工作人员将0.1 mL稀释 $\text{[math]}$ 倍的噬菌体样品与敏感细菌混合后平铺在平板上培养一段时间，长满细菌的平板因部分细菌被噬菌体裂解而形成圆形透明斑，即噬菌斑（1个噬菌斑为1个pfu），噬菌体效价可用每毫升样品中含有的pfu数表示。下列叙述正确的是（）

A. 透明的平板培养一段时间后变为不透明状态，是由细菌大量繁殖造成的 B. 噬菌体样品应有足够的稀释度，以保证初期一个细菌最多被一个噬菌体吸附 C. 若平均每个平板的噬菌斑数量为150，则该样品的噬菌体效价为1.5×10⁸ pfu/mL D. 若有少数活噬菌体末能侵染细菌，噬菌斑计数结果比样品中实际活噬菌体数偏低

多选题普通

1. 获取纯净的微生物培养物是发酵工程的基础。下列叙述错误的是（）

A. 获取纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染 B. 稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法 C. 平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法 D. 接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为纯培养物

单选题普通

2. 双层平板法是对噬菌体进行计数的常用方法。在培养皿中倒入琼脂含量为2%的培养基凝固成底层平板后，将琼脂含量为1%的培养基熔化并冷却至45~48℃，然后加入敏感指示菌和待测噬菌体稀释悬液的混合液，充分混匀后立即倒入底层平板上形成双层平板。培养一段时间后，根据噬菌斑的数目可计算原液中噬菌体的数量。下列叙述错误的是（）

A. 倒平板前需利用不同方法对培养基和培养皿进行灭菌 B. 若利用双层平板法对T2噬菌体进行计数，可选用乳酸菌为敏感指示菌 C. 上层平板中出现噬菌斑的原因是噬菌体侵染宿主细菌使其裂解死亡 D. 若上层平板中琼脂浓度较低，可能形成的噬菌斑较大，有利于计数

单选题普通

3. 土壤中的尿素分解菌能产生脲酶，脲酶可将尿素分解成NH₃ ， NH₃再转化为 $\text{[math]}$ $\text{[math]}$ 等被植物吸收。现使用稀释涂布平板法对已分离培养的尿素分解菌进行计数，下列有关叙述正确的是（）

A. 同一稀释度至少需设置3个平板进行重复计数 B. 涂布器灼烧灭菌后立即涂布可以避免感染杂菌 C. 涂布时需注意不能转动培养皿以避免菌液洒出 D. 稀释涂布平板法统计的菌落数比实际活菌数高

单选题容易

1. 杨梅具有很高的营养价值，其鲜果也是酿酒的良好材料。发酵型果酒品质取决于所选择的酵母性能。科研人员为挖掘某杨梅主产区的酵母资源，筛选出酒精转化率高、酒精耐受性强的优质杨梅酿酒酵母，进行的研究如图所示。请回答下列问题：

(1) 图中过程②③④⑤所用培养基为适于酵母菌生长的YPD培养基，其成分包括1%酵母膏、2%蛋白胨、2%葡萄糖等，其中能提供的氮源的有，与过程②所用培养基相比，过程③所用培养基中还添加了（成分）。

(2) 过程③梯度稀释时，先分别向A、B、C三支试管中加入mL无菌水，再依次加入酵母菌培养液的上清液或稀释液1mL，摇匀。取多种稀释倍数的酵母菌培养液0.1mL分别接种到多个平板上，这样做的目的有；甲、乙研究员在10⁵稀释倍数下操作和得到的结果为：甲涂布4个平板，统计的菌落数分别是150、178、259、310；乙涂布4个平板，统计的菌落数分别是152、161、179、188，则1mL培养液中含有的酵母菌数量可能为个。

(3) 过程④中接种环灼烧灭菌的次数为，划线后将培养皿，放入恒温培养箱中培养。

(4) 分离获得的酵母菌还需经过多级筛选才能获取到理想菌株。科研人员利用DY5、RY1、JW14三种菌株，发酵制作杨梅酒，并进行酒精耐受性检测，结果如表、图所示，三种菌株中，最适于杨梅果酒发酵的是，理由有。

菌株名称	酒精度/%	总糖/g·L^-1	总酸/g·L^-1
DY5	7.0	34.23	12.045
RY1	9.0	15.01	12.675
JW14	6.5	33.64	12.099
杨梅汁	-	78.80	10.737

综合题普通

2. 幽门螺杆菌（Hp）是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因子，能分解对热不稳定的尿素。研究人员从带菌者胃黏膜样本中分离出该类细菌，并进行大量培养。所利用的培养基成分如下表。回答下列问题：

成分	葡萄糖	蛋白胨	KH₂PO₄	Na₂HPO₄	尿素	琼脂	H₂O
含量	10.0 g	5.0 g	1.4 g	2.1 g	1.0 g	15.0 g	定容至1 L

(1) 实验室中对培养基进行灭菌常用的方法是；分析培养基的成分可知，上述培养基（填“能”或“不能”）用于分离Hp，理由是。

(2) 向培养基中添加酚红指示剂，利用颜色变化可实现对分离的Hp的初步鉴定，该实验原理是，使培养基的碱性增强，从而使酚红指示剂变红。使用后的培养基，在废弃前一定要进行处理，以免污染环境。

(3) 若要对选择培养后的Hp进行计数，采用法（填接种方法）统计活菌的数目，结果往往比实际值偏小，原因是。

实验探究题普通

3. 孔雀石绿（简称MG）是广泛使用的有机染料，在自然环境中极难降解，容易引起土壤污染，进而危害人体健康，因此从土壤中分离和筛选出高效的MG降解菌有非常重要的意义。已知MG在水中溶解度低，含过量MG的固体培养基不透明。图中1~M是操作过程，回答下列问题：

(1) 培养基的配制：MG降解菌富集培养基成分的特点是。过程I~Ⅲ中需要无菌操作的是，在无菌操作中，为避免被杂菌污染，需要注意的事项有（答出2点即可）。

(2) MG高效降解菌株的富集：如图所示，将1.0g土样接入含上述配制好的培养液的三角瓶中，将三角瓶置于30℃180r/min摇床中振荡培养1～2天，此操作的目的是.

(3) MG高效降解菌株的分离和纯化：过程Ⅲ所利用的接种方法是。在过程Ⅱ中重复次数为3次，在过程Ⅲ中三个培养基长出的菌落数量分别是142、163、154，则推测A中细菌的数量为个/mL。

(4) MG高效降解菌株的鉴定：将纯化获得的菌种接种于含过量MG的固体培养基（其他营养成分等适宜）上，鉴定目的菌的原理是。

综合题普通