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1.  孔雀石绿（简称MG）是广泛使用的有机染料，在自然环境中极难降解，容易引起土壤污染，进而危害人体健康，因此从土壤中分离和筛选出高效的MG降解菌有非常重要的意义。已知MG在水中溶解度低，含过量MG的固体培养基不透明。图中1~M是操作过程，回答下列问题：

(1) 培养基的配制：MG降解菌富集培养基成分的特点是。过程I~Ⅲ中需要无菌操作的是，在无菌操作中，为避免被杂菌污染，需要注意的事项有（答出2点即可）。
(2) MG高效降解菌株的富集：如图所示，将1.0g土样接入含上述配制好的培养液的三角瓶中，将三角瓶置于30℃180r/min摇床中振荡培养1～2天，此操作的目的是.
(3) MG高效降解菌株的分离和纯化：过程Ⅲ所利用的接种方法是。在过程Ⅱ中重复次数为3次，在过程Ⅲ中三个培养基长出的菌落数量分别是142、163、154，则推测A中细菌的数量为个/mL。
(4) MG高效降解菌株的鉴定：将纯化获得的菌种接种于含过量MG的固体培养基（其他营养成分等适宜）上，鉴定目的菌的原理是。
【考点】
微生物的分离和培养; 测定某种微生物的数量; 灭菌技术;
【答案】

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1. “民以食为天，食以安为先”，食品安全关系千家万户，食用变质食物、细菌污染的食物都会对人体健康造成严重危害。生物兴趣小组对某网红美食中的细菌数进行调查，如图是食物样品中细菌培养的简化流程。回答下列问题：

(1) 制备培养基时需添加等营养物质，配制好的培养基要用法灭菌。
(2) 本实验所用的接种方法为法，出现图B所示现象的原因是。纯化培养时将单个微生物分散在固体培养基上，除上述方法外还有法，这两种方法均可获得单菌落。
(3) 运用本实验方法计数的结果往往较实际值偏，原因是。
(4) 生物兴趣小组统计得到不同稀释倍数下培养基上的菌落数如下表所示，表中稀释倍数为时适合计数，该稀释倍数下统计得到的数值计算得到的原培养液每毫升含有的细菌数是个。根据以上数据给出的食用建议是。

培养基

不同稀释度平均菌落数/个

101

102

103

1

765

98

20

2

760

85

46

3

890

93

26
综合题 普通
2. 磷是植物生长的重要元素，施入土中的磷大多数与Ca2+等离子结合形成难溶性磷酸盐。科研人员从贡柑果园土中选出可以将难溶性或不溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌，主要流程见下图，请回答下列问题：

(1) 步骤③将土壤悬浮液稀释了倍。经步骤③最后一次稀释之后若在3个平板上分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，得到的结果是：39、38、37，则每克土样中的活菌数为个。运用这种方法统计的结果往往较实际值，原因是。
(2) 步骤④中待菌落长好后挑出溶磷圈直径（D）与菌落直径（d）比值较的菌落。
(3) 要判断选择培养基是否起到了选择作用，需要设置作为对照。
(4) 为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基中，并在37℃、200r·min-1摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到如图所示曲线。

用摇床进行培养的好处、。

图示结果表明最优良的解磷菌株是。
综合题 普通
3.  野生型菌株X能在基本培养基上生长，亮氨酸缺陷型突变株无法合成亮氨酸，只能在完全培养基上生长。如图是运用影印培养法（一种类似“盖章”的接种方法，使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落）纯化亮氨酸缺陷型突变株的部分流程图。回答下列问题：

(1) 培养微生物的培养基通常应含有水、无机盐、等营养成分，培养基灭菌常用的方法是，基本培养基与完全培养基相比，成分不同的是。
(2) 进行过程②操作时，必须先将丝绒布转印至（填“基本培养基”或“完全培养基”）上，从培养基上可获得亮氨酸缺陷型突变菌株。
(3) 利用影印法培养的优点是不同培养基中同种菌株的接种位置相同，所以应挑取（填“菌落A”或“菌落B”）获得亮氨酸缺陷型突变菌株。将该菌种在培养液中扩大培养时，需将菌液充分振荡，目的是。
综合题 普通