双层平板法是对噬菌体进行计数的常用方法。在培养皿中倒入琼脂含量为2%的培养基凝固成底层平板后，将琼脂含量为1%的培养基熔化并冷却至45~48℃，然后加入敏感指示菌和待测噬菌体稀释悬液的混合液，充分混匀后立即倒入底层平板上形成双层平板。培养一段时间后，根据噬菌斑的数目可计算原液中噬菌体的数量。下列叙述错误的是（）

1. 微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，以防止杂菌污染，请分析下列操作，错误的是（）

①煮沸消毒可以杀死微生物的细胞和部分芽孢

②接种操作要在酒精灯火焰附近进行

③培养基要进行高压蒸汽灭菌

④加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌

⑤紫外线消毒可以对接种室、超净工作台和操作人员进行消毒，以杀死物体表面或者空气中的微生物

⑥在接种过程中，试管口、瓶口等易被污染的部位，也可以通过火焰灼烧来灭菌

A. ①② B. ⑤⑥ C. ③⑤ D. ④⑤

单选题容易

2. 下列操作能达到灭菌目的的是（）

A. 使用紫外灯照射教室 B. 使用开水烫洗玻璃罐 C. 用免洗酒精凝胶擦手 D. 在火焰上灼烧接种环

单选题容易

3. 防止杂菌污染和获得纯净微生物培养物是研究和应用微生物的前提，也是发酵工程的重要基础。下列关于无菌操作技术的叙述，正确的是（）

A. 将培养基转移到三角瓶和试管中时必须使用三角漏斗 B. 接种环在划线前后都要进行灼烧并立即划线以免灭菌失效 C. 无菌技术只能用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染 D. 高压蒸汽灭菌时，灭菌时间应从高压蒸汽灭菌锅开始加热时计时

单选题容易

1. 苯丙酮尿症（PKU）患者由于苯丙氨酸代谢途径中的酶缺陷，导致苯丙氨酸及其代谢产物苯丙酮酸在体内蓄积，从而对神经系统造成损伤，低蛋白饮食是目前主要的治疗手段。为探究新的治疗手段，科研人员在大肠埃希菌EcN菌株中导入苯丙氨酸裂解酶基因，构建了表达苯丙氨酸裂解酶的工程益生菌EcN-PAL，并分别在有氧、缺氧条件下培养EcN-PAL和EcN，检测苯丙氨酸降解率，结果如图。下列分析错误的是( )

注：苯丙氨酸降解率= $\text{[math]}$ ×100%

A. 培养基应加入一定浓度的苯丙氨酸并进行高压蒸汽灭菌处理 B. 设置EcN组是为了排除苯丙氨酸自然降解对实验结果的干扰 C. 对比有氧、缺氧条件下的表现可帮助评价其在消化道中作用 D. 若EcN-PAL能大量分泌苯丙氨酸裂解酶可以提高其治疗效果

单选题普通

2. 如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析错误的是（）

A. 某一稀释度下至少涂3个平板，该实验方法统计得到的结果常会比实际活菌数目少 B. 3号试管中的样品溶液稀释倍数为10⁴倍 C. 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×10⁸个 D. 该实验需设置牛肉膏蛋白胨培养基作对照，用以判断选择培养基是否有选择作用

单选题普通

3. 鸡蛋表面污染的细菌会逐渐侵入蛋内，缩短鸡蛋保质期。对某地不同季节及不同养殖模式下生产的鸡蛋取样，按每克鸡蛋用1mL无菌生理盐水清洗鸡蛋表面，收集清洗液，培养计数结果如下表。下列叙述错误的是（）

季节	菌落数（个·g^-1）
季节	半封闭式养殖模式	全封闭式养殖模式
夏季	3.92×10⁴	7.24×10³
冬季	7.60×10⁴	1.24×10⁴

A. 表中数据是对清洗液稀释1×10²倍后涂板获得的 B. 稀释涂布平板法得到的鸡蛋表面菌落数比实际数略少 C. 比较两种养殖模式可知鸡蛋表面的细菌主要来自环境 D. 冬季鸡舍更需要消毒以减少鸡蛋表面的细菌污染

单选题普通

1. 杨梅具有很高的营养价值，其鲜果也是酿酒的良好材料。发酵型果酒品质取决于所选择的酵母性能。科研人员为挖掘某杨梅主产区的酵母资源，筛选出酒精转化率高、酒精耐受性强的优质杨梅酿酒酵母，进行的研究如图所示。请回答下列问题：

(1) 图中过程②③④⑤所用培养基为适于酵母菌生长的YPD培养基，其成分包括1%酵母膏、2%蛋白胨、2%葡萄糖等，其中能提供的氮源的有，与过程②所用培养基相比，过程③所用培养基中还添加了（成分）。

(2) 过程③梯度稀释时，先分别向A、B、C三支试管中加入mL无菌水，再依次加入酵母菌培养液的上清液或稀释液1mL，摇匀。取多种稀释倍数的酵母菌培养液0.1mL分别接种到多个平板上，这样做的目的有；甲、乙研究员在10⁵稀释倍数下操作和得到的结果为：甲涂布4个平板，统计的菌落数分别是150、178、259、310；乙涂布4个平板，统计的菌落数分别是152、161、179、188，则1mL培养液中含有的酵母菌数量可能为个。

(3) 过程④中接种环灼烧灭菌的次数为，划线后将培养皿，放入恒温培养箱中培养。

(4) 分离获得的酵母菌还需经过多级筛选才能获取到理想菌株。科研人员利用DY5、RY1、JW14三种菌株，发酵制作杨梅酒，并进行酒精耐受性检测，结果如表、图所示，三种菌株中，最适于杨梅果酒发酵的是，理由有。

菌株名称	酒精度/%	总糖/g·L^-1	总酸/g·L^-1
DY5	7.0	34.23	12.045
RY1	9.0	15.01	12.675
JW14	6.5	33.64	12.099
杨梅汁	-	78.80	10.737

综合题普通

2. [生物-选修1：生物技术实践]

合理使用消毒液有助于减少传染病的传播。某同学比较了3款消毒液A、B、C杀灭细菌的效果，结果如图所示。回答下列问题。

(1) 该同学采用显微镜直接计数法和菌落计数法分别测定同一样品的细菌数量，发现测得的细菌数量前者大于后者，其原因是。

(2) 该同学从100mL细菌原液中取1mL加入无菌水中得到10mL稀释菌液，再从稀释菌液中取200μL涂布平板，菌落计数的结果为100，据此推算细菌原液中细菌浓度为个/mL。

(3) 菌落计数过程中，涂布器应先在酒精灯上灼烧，冷却后再涂布。灼烧的目的是，冷却的目的是。

(4) 据图可知杀菌效果最好的消毒液是，判断依据是。（答出两点即可）

(5) 鉴别培养基可用于反映消毒液杀灭大肠杆菌的效果。大肠杆菌在伊红美蓝培养基上生长的菌落呈色。

综合题普通

3. 幽门螺杆菌（Hp）是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因子，能分解对热不稳定的尿素。研究人员从带菌者胃黏膜样本中分离出该类细菌，并进行大量培养。所利用的培养基成分如下表。回答下列问题：

成分	葡萄糖	蛋白胨	KH₂PO₄	Na₂HPO₄	尿素	琼脂	H₂O
含量	10.0 g	5.0 g	1.4 g	2.1 g	1.0 g	15.0 g	定容至1 L

(1) 实验室中对培养基进行灭菌常用的方法是；分析培养基的成分可知，上述培养基（填“能”或“不能”）用于分离Hp，理由是。

(2) 向培养基中添加酚红指示剂，利用颜色变化可实现对分离的Hp的初步鉴定，该实验原理是，使培养基的碱性增强，从而使酚红指示剂变红。使用后的培养基，在废弃前一定要进行处理，以免污染环境。

(3) 若要对选择培养后的Hp进行计数，采用法（填接种方法）统计活菌的数目，结果往往比实际值偏小，原因是。

实验探究题普通

1. 为提高一株石油降解菌的净化能力，将菌涂布于石油为唯一碳源的固体培养基上，以致死率为90%的辐照剂量诱变处理，下列叙述不合理的是（）

A. 将培养基分装于培养皿中后灭菌，可降低培养基污染的概率 B. 涂布用的菌浓度应控制在30~300个/mL C. 需通过预实验考察辐射时间对存活率的影响，以确定最佳诱变时间 D. 挑取培养基上长出的较大单菌落，给纯化后进行降解效率分析

多选题普通