防止杂菌污染和获得纯净微生物培养物是研究和应用微生物的前提，也是发酵工程的重要基础。下列关于无菌操作技术的叙述，正确的是（）

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1. 防止杂菌污染和获得纯净微生物培养物是研究和应用微生物的前提，也是发酵工程的重要基础。下列关于无菌操作技术的叙述，正确的是（）

A. 将培养基转移到三角瓶和试管中时必须使用三角漏斗 B. 接种环在划线前后都要进行灼烧并立即划线以免灭菌失效 C. 无菌技术只能用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染 D. 高压蒸汽灭菌时，灭菌时间应从高压蒸汽灭菌锅开始加热时计时

【考点】

灭菌技术;

【答案】

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单选题容易

基础巩固

能力提升

拓展培优

真题演练

换一批

1. 微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，以防止杂菌污染，请分析下列操作，错误的是（）

①煮沸消毒可以杀死微生物的细胞和部分芽孢

②接种操作要在酒精灯火焰附近进行

③培养基要进行高压蒸汽灭菌

④加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌

⑤紫外线消毒可以对接种室、超净工作台和操作人员进行消毒，以杀死物体表面或者空气中的微生物

⑥在接种过程中，试管口、瓶口等易被污染的部位，也可以通过火焰灼烧来灭菌

A. ①② B. ⑤⑥ C. ③⑤ D. ④⑤

单选题容易

2. 下列操作能达到灭菌目的的是（）

A. 使用紫外灯照射教室 B. 使用开水烫洗玻璃罐 C. 用免洗酒精凝胶擦手 D. 在火焰上灼烧接种环

单选题容易

3. 下列操作能达到灭菌目的的是（）

A. 用免洗酒精凝胶擦手 B. 制作泡菜前用开水烫洗容器 C. 在火焰上灼烧接种环 D. 防疫期间用石炭酸喷洒教室

单选题容易

1. 苯丙酮尿症（PKU）患者由于苯丙氨酸代谢途径中的酶缺陷，导致苯丙氨酸及其代谢产物苯丙酮酸在体内蓄积，从而对神经系统造成损伤，低蛋白饮食是目前主要的治疗手段。为探究新的治疗手段，科研人员在大肠埃希菌EcN菌株中导入苯丙氨酸裂解酶基因，构建了表达苯丙氨酸裂解酶的工程益生菌EcN-PAL，并分别在有氧、缺氧条件下培养EcN-PAL和EcN，检测苯丙氨酸降解率，结果如图。下列分析错误的是( )

注：苯丙氨酸降解率= $\text{[math]}$ ×100%

A. 培养基应加入一定浓度的苯丙氨酸并进行高压蒸汽灭菌处理 B. 设置EcN组是为了排除苯丙氨酸自然降解对实验结果的干扰 C. 对比有氧、缺氧条件下的表现可帮助评价其在消化道中作用 D. 若EcN-PAL能大量分泌苯丙氨酸裂解酶可以提高其治疗效果

单选题普通

2. 在器械灭菌时，通常会在高压蒸汽灭菌锅中放置生物指示剂来检验灭菌效果，自含型生物指示剂如图所示。为检验生物指示剂是否出现阳性变化，需用工具在塑料瓶外挤破安瓿瓶，使菌片浸没在培养液内。最终根据灭菌与未灭菌的生物指示剂的阳性变化情况，判断器械灭菌效果。下列叙述错误的是（）

A. 安瓿瓶中培养液的作用是使芽孢复苏 B. 菌片中芽孢的耐热性大于器械上的可能污染菌 C. 挤破安瓿瓶后，需培养一段时间再观察是否出现阳性变化 D. 若灭菌与未灭菌的生物指示剂均不出现阳性变化，则说明灭菌效果良好

单选题普通

3. 对下列实验用具或实验材料进行灭菌时，可以依次采用灼烧灭菌、干热灭菌、紫外线照射、高压蒸汽灭菌的是（）

A. 培养皿、吸管、接种箱、培养基 B. 吸管、接种环、培养基、接种箱 C. 接种环、培养基、吸管、接种箱 D. 接种环、培养皿、接种箱、培养基

单选题普通

1. 我国盐碱土面积约9913万hm² ，其中pH值高于9、盐含量大于0.6%的重度盐碱地每年以1.4%的增长率增长。利用固氮微生物改善植物根际环境，是盐碱地改良的重要方法。科研人员欲从热带珊瑚岛礁的土壤中分离并鉴定耐盐碱固氮菌的单菌落，以期应用于盐碱地改良。根据所学内容，回答下列问题：

(1) 分离目的菌株时所利用的培养基从物理形态和功能上划分，属于培养基。培养基中必须添加的营养成分有；调节pH值高于9应在（填“灭菌前”或“灭菌后”）进行。

(2) 得到土壤浸出液后用法接种到培养基上可得到单菌落并进行计数；接种过程中使用的接种工具应采用灭菌；该种计数方法结果往往小于实际细菌数的原因是。

(3) 将接种后的平板置于适宜的环境中进行培养，同时将一个未接种的空白平板置于相同的环境中进行培养的目的是。

(4) 培养一段时间后研究人员可根据菌落的形状、大小、颜色等特征初步区分所获得菌落是否为固氮菌，原因是在一定的培养条件下，。实验过程中还发现在高盐、高pH、无氮培养上进行长时间培养后会出现一些特殊的菌落，将它们单独转移到新制备的高盐、高pH、无氮培养基上时却无法生长，形成这种现象的原因是。

实验探究题普通

2. 木质素是一类复杂的有机聚合物，在维管植物和一些藻类的支持组织中起着重要的结构作用，在细胞壁的形成中特别重要，特别是在木材和树皮中，因为这些部分富含木质素，从而赋予它们刚性并且不容易腐烂的特性。科研团队尝试从木材场土壤中筛选分离出木质素分解菌，实验流程如下图所示。请回答下列问题：

(1) 用于培养微生物的培养基可以为微生物提供的营养物质主要有。实验时，一般对配制的培养基采用法进行灭菌，对培养皿、烧瓶及吸管等玻璃器皿一般用法灭菌。

(2) 若每个环节的稀释倍数与步骤②的稀释倍数相同，则步骤④试管内的无菌水是mL。图示操作过程中，共将1g土壤稀释了倍。实验过程中，纯化细菌的关键是无菌操作和。

(3) ⑤纯化培养过程中所采用的接种方法是，在五个固体培养基上分别接种0.1mL该菌菌液，适宜条件下培养一段时间后，若培养基上的菌落数分别为：28、70、144、139、131，则每克土壤样品中该菌的数量约为个。

实验探究题普通

3. 我国科学家在土壤中筛选出分泌单宁酶的黑曲霉Lys117，利用基因工程对其进行改造，提取单宁酶基因与强表达组件（强表达启动子和信号肽）结合，最终实现单宁酶的高产。回答下列问题：

(1) 培养黑曲霉Lys117时，配制的培养基需要先调pH，再经过灭菌，pH一般调至（填“酸性”或“碱性”）。

(2) 单宁酶基因扩增时设计引物的作用是，应选择的引物是图中。选用限制酶切割目的基因时不可选用Sau3AⅠ的原因是。

(3) 基因工程的核心是，利用农杆菌的Ti质粒作为载体，Ti质粒上的可以整合到受体细胞的染色体DNA上并稳定存在和表达。

(4) 为了检测技术成果，将重组Ti质粒用特定方法导入黑曲霉Lys117，科研工作者通过检测，最终鉴定出目标黑曲霉。

综合题普通

1. β-苯乙醇是赋予白酒特征风味的物质。从某酒厂采集并筛选到一株产β-苯乙醇的酵母菌应用于白酒生产。下列叙述正确的是（）

A. 所用培养基及接种工具分别采用湿热灭菌和灼烧灭菌 B. 通过配制培养基、灭菌、分离和培养能获得该酵母菌 C. 还需进行发酵实验检测该酵母菌产β-苯乙醇的能力 D. 该酵母菌的应用有利于白酒新产品的开发

多选题普通

2. 航天员叶光富和王亚平在天宫课堂上展示了培养的心肌细胞跳动的视频。下列相关叙述正确的是（）

A. 培养心肌细胞的器具和试剂都要先进行高压蒸汽灭菌 B. 培养心肌细胞的时候既需要氧气也需要二氧化碳 C. 心肌细胞在培养容器中通过有丝分裂不断增殖 D. 心肌细胞在神经细胞发出的神经冲动的支配下跳动

单选题普通

3. 灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是（　　）

A. 动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行 B. 微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染 C. 为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌 D. 可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌

单选题普通