纤维素酶的成本能否下降，是能否实现乙醇工业化生产的关键因素．纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取．某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养．①培养纤维素酶分解菌的土样最好选择在环境采集．②以下是一种培养基配方：纤维素5g、NaNO31g、Na2HPO4•7H2O1.2g、KH2PO40.9g、MgSO4•7H2O0.5g、KCl 0.5g、酵母膏0.5g、水解酪素0.5g（蒸馏水定容到1000mL）．该培养基能够增加样品中纤维素分解菌的浓度，其原理是培养基中是主要碳源，有利于纤维素分解菌生长，同时抑制其他微生物生长．③为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入刚果红染液，将筛选获得的菌液稀释后用方法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生透明圈的菌落作为菌种进行扩大培养．

1. MRSA菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，对青霉素等多种抗生素有抗性．为研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA菌生长的影响，某兴趣小组的实验设计及结果如表．

组别	培养基中的添加物	MRSA菌
1	100µg/mL蛋白质H	生长正常
2	2µg/mL青霉素	生长正常
3	2 µ g/mL青霉素+100lµ g/mL蛋白质H	死亡

请回答下列问题：

（1）青霉素的用量是该实验的变量．应保持，目的是

（2）第2组和第3组对比表明MRSA菌对有抗性，能杀死MRSA菌．

（3）蛋白质H不是新型抗生素，理由是．

（4）测定培养液中MRSA菌的活菌数量，不宜在显微镜下用直接计数，适合选用法进行计数，原因是直接计数获得的结果包含活的MRSA菌和死的RSA菌的总数，而用涂布法进行计数，计数的是菌落数，一个菌落一般来源于稀释液中的一个活菌．

填空题普通

2.

井冈霉素是我国目前防治水稻纹枯病的主导农药，由于多年的单一使用，部分地区纹枯病菌对其产生了不同程度的抗药性，迫切需要研发有类似效果的新型替代生物农药．从细菌M18中提取的申嗪霉素能有效抑制水稻纹枯菌，与其它农药相比对人体和动物安全性高．为了开发更稳定、高产的新型菌株，科研人员进行了以下研究．请回答下列问题：

（1）筛选菌株选择（健康/患纹枯病）的水稻植株的根切成小段放入液体培养基中培养24h后，取适量培养液涂布于琼脂平板上，培养5天后，挑选形态不同的，对其进行编号．然后挑取少许菌株分别接种于长满水稻纹枯菌的琼脂平板上，培养3天后，观察纹枯菌的生长，根据选出编号为P12的理想菌株．

（2）鉴定菌株P12所属的细菌类型提取P12基因组DNA，扩增其16S rDNA（能体现不同菌属之间的差异），扩增过程需要的酶有，还需要特定的．对其测序后确定该菌株所属细菌类型．

（3）检测P12的细胞毒性

用人肺癌细胞系A549作为指示株系，在37℃恒温培养箱中培养．通入的空气应含，培养液中含少量胎牛血清，目的是 .2h后分别将相同浓度的P12、M18和DH5α（人体肠道内共生的大肠杆菌）菌液5μL加入A549细胞培养液中，4h后测定吸光值，以表示乳酸脱氢酶（LDH）的释放量．LDH是活细胞内含有的酶，当细胞受到细菌攻击时，细胞膜的改变，LDH释放至细胞外．测定结果显示，P12对A549细胞的毒性

（4）部分地区的纹枯菌对井冈霉素产生抗药性的原因，是由于对细菌进行长期的选择，使细菌的发生了改变的结果．