(1) 为了使目的基因能与图示质粒高效正确构建表达载体，需在目的基因的两端加上的碱基序列。（编号选填）

①EcorR I②Kpn I③Acc65 I       ④Bgl Ⅱ

(2) 结合上述信息，以下叙述正确的是       。 A. 受体细胞应选取氨苄青霉素敏感型 B. 可以使用Ca²⁺处理大肠杆菌，使重组质粒能够被其吸收 C. 培养受体细胞的培养基必须加入甲醇 D. 目的基因成功表达的标志是受体细胞能在培养基上生长 (3) 待培养12h后，挑取单菌落分离DNA进行PCR扩增，若扩增后的DNA样品电泳结果显示有968bp和1566bp两个片段，则下图（深色部分为目的基因区段）中对应两个片段的引物组合分别为和。（请用图8中编号选填）

(4) 检测上述构建的甲醇工程菌，其MDH的表达量远高于一般大肠杆菌，但仍无法确定是否成功构建能同化甲醇能力较强的工程菌。下列叙述中能支持该观点的是     。 A. 尚未对工程菌合成的相关蛋白的活性进行测定 B. 尚未对工程菌分解甲醇的能力进行鉴定 C. 尚未在个体生物学水平进行抗原-抗体杂交 D. 尚未对目的基因进行碱基序列的测定和比较 (5) 利用DNA探针（单链DNA）能与待测样本中mRNA互补结合形成双链复合杂交体，从而可确定受体细胞中是否含有目的基因。检测发现部分受体细胞无目的蛋白却有目的基因，原因可能是表达过程中的过程受阻；现拟对原因做出进一步的精准判断，请简要写出实验思路和预期结果：。