(XhoI、KpnI、PstI为三种不同黏性末端的限制酶识别位点;amp'基因为氨苄青霉素抗性基因)
回答下列问题:
Ⅰ.N蛋白胞外段抗原制备,流程如图1
Ⅱ.N蛋白胞外段单克隆抗体制备,流程如图2
分步实验目标
简易操作、结果、分析
PCR鉴定正向重组质粒Y-M(图Ⅱ中融合片段M中有白色的箭头,代表方向)
①选择图Ⅱ引物; ②PCR目的产物约为bp。
确保M及连接处序列正确,Y-M的连接处上游含有Hind III+EcoR V的识别序列,下游含有EcoR V+BamH I的识别序列
③质粒测序,图Ⅲ中正确的是(选填序列编号)
检测融合蛋白定位
④对照质粒Y-GFP(仅表达GFP)与实验质粒Y-M分别导入细胞,发现对照组整个细胞均有绿色荧光,而实验组荧光集中在纤毛基部,说明。
实验材料与试剂:①ALK菌裂解的上清液②带荧光标记的K的抗体③带荧光标记的C的抗体④肿瘤细胞
实验步骤:先加入保温后漂洗,再加入保温后漂洗,检测荧光强度。