抗虫和耐除草剂玉米双抗12-5是我国自主研发的转基因品种。为给监管转基因生物安全提供依据，采用PC方法进行目的基因监测，反应程序如图所示。下列叙述正确的是（）

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1. 抗虫和耐除草剂玉米双抗12-5是我国自主研发的转基因品种。为给监管转基因生物安全提供依据，采用PC方法进行目的基因监测，反应程序如图所示。下列叙述正确的是（）

A. 预变性过程可促进模板DNA边解旋边复制 B. 后延伸过程可使目的基因的扩增更加充分 C. 延伸过程无需引物参与即可完成半保留复制 D. 转基因品种经检测含有目的基因后即可上市

【考点】

PCR技术的基本操作和应用; 转基因生物的安全性问题;

【答案】

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单选题普通

基础巩固

能力提升

变式训练

拓展培优

换一批

1. 关于采用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物的实验，下列叙述正确的是（）

A. 琼脂糖凝胶浓度的选择需考虑待分离DNA片段的大小 B. 凝胶载样缓冲液中指示剂的作用是指示DNA分子的具体位置 C. 在同一电场作用下，DNA片段越长，向负极迁移速率越快 D. 琼脂糖凝胶中的DNA分子可在紫光灯下被检测出来

单选题容易

2. 某实验利用PCR技术获取目的基因，实验结果显示除目的基因条带（引物与模板完全配对）外，还有2条非特异条带（引物和模板不完全配对）。为了减少反应非特异条带的产生，以下措施中有效的是（）

A. 增加模板DNA的量 B. 延长热变性的时间 C. 延长延伸的时间 D. 提高复性的温度

单选题容易

1. 为研究拟南芥植株E基因的功能，科研人员将T-DNA插入到E基因中，导致其发生突变，突变后的基因记为e。为验证某拟南芥植株的基因型，科研人员根据基因E和T-DNA的序列，设计了三种引物，引物的结合位置如图所示。已知完整的E基因和T-DNA整合后，因片段长度过大，不能完成整个融合基因的PCR扩增。科研人员提取该植株的总DNA，分别用引物“I+III”组合及“II+III”组合进行PCR，两种引物组合均能完成扩增。拟南芥植株的基因型为（）

A. Ee B. EE C. ee D. EE或Ee

单选题困难

2. 新冠疫情的快速控制，离不开政府的科学决策和我国对新冠病毒（RNA病毒）的快速检测能力。荧光定量PCR技术可定量检测样本中DNA含量，其原理是：在PCR反应体系中加入引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探针处会水解探针，使荧光监测系统接受到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成（如右图）。Ct值（循环阈值）的含义为：每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数。下列说法不正确的是（）

A. 检测新冠病毒时，需加入逆转录酶将新冠病毒RNA转化为cDNA B. PCR每个循环包括变性、退火（引物和模板结合）、延伸3个阶段 C. C_t值就越大表示被检测样本中病毒数目越多，患者危险性更高 D. 若样本被污染，RNA酶将病毒RNA降解，检测结果可能为阴性

单选题普通

3. 某校学习小组进行PCR实验，甲、乙、丙三名同学分别以酵母菌为材料，进行PCR扩增，各取20ul产物进行凝胶电泳，得到的结果如下图。下列叙述错误的是（）

A. 凝胶a端靠近电泳槽的负极接线柱 B. 甲同学设置的PCR循环次数可能比乙同学多 C. 丙同学所用的引物可能与甲乙同学的不一样 D. 丙同学扩增得到的片段比甲乙同学的要大

单选题普通

1. 最早的双脱氧测序法是PCR反应体系中，分别再加入一种少量的双脱氧核苷三磷酸（ddATP、ddCTP、ddGTP或ddTTP），子链延伸时，双脱氧核苷三磷酸也遵循碱基互补酸对原则，以加入ddATP的体系为例：若配对的为ddATP，延伸终止；若配对的为脱氧原苷三磷酸（dATP），继续延伸；PCR产物变性后电泳检测。通过该方法测序某疾病患者及对照个体的一段序列，结果如图所示。下列叙述正确的是（）

A. 上述PCR反应体系中只加入一种引物 B. 电泳时产物的片段越小，迁移速率越慢 C. 5'-CTACCCGTGAT-3'为对照个体的一段序列 D. 患者该段序列中某位点的碱基C突变为G

多选题普通

2. 免疫PCR是对微量抗原的一种检测方法。下图是利用该技术检测牛乳中微量抗生素的流程图：首先将抗体1固定在微板上，冲洗后加入待检的牛乳，再加入DNA标记的抗体2，进行PCR扩增，最后进行电泳检测，相关叙述正确的是（）

A. 图示中的DNA可以是非牛乳基因中的DNA片段 B. 如果第三次冲洗不充分则有可能出现假阳性现象 C. 电泳检测结果只能判断阳性与否，无法判断牛乳中抗生素的含量 D. 微量抗原抗体反应通过PCR技术间接扩增放大，从而达到可检测的水平

多选题困难

3. 重叠延伸PCR技术是一种通过寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板，经过多次PCR扩增。从而获得目的基因的方法。该技术在扩增较长片段的DNA，不同来源的DNA片段拼接、基因的定点诱变等方面具有广泛的应用前景，下图表示利用重叠延伸PCR技术扩增某目的基因的过程。下列叙述正确的是（）

A. 引物中G＋C的含量越高，引物与模板DNA结合的稳定性越高 B. 在第一阶段由于引物2和引物3发生碱基互补配对，因此两者置于不同反应系统中 C. 引物1、2组成的反应系统和引物3、4组成的反应系统中均进行一次复制，共产生4种双链DNA分子 D. 在引物1、2组成的反应系统中，经第一阶段要形成图示双链DNA，至少要经过3次复制

多选题普通

1. 研究者通过利用T-DNA随机插入野生型水稻染色体DNA中，导致被插入的基因功能丧失，以此构建水稻突变体库，从中筛选出一株穗粒数异常的突变体A进行实验探究。请回答下列问题：

(1) 用某种限制酶处理水稻突变体A的DNA（如下图所示）后，用DNA连接酶将两端的黏性末端连接成环，以此为模板，利用图中的引物（填序号）组合进行PCR扩增，目的是扩增出T-DNA插入位置两端的未知序列，反应过程中引物与模板DNA链碱基互补配对结合的阶段是。

(2) 将T-DNA两端的未知序列与野生型水稻基因组序列比对，确定T-DNA插入了2号染色体上的B基因中，该突变体A的穗粒数及产量明显（填“低于”或“高于”）野生型，据此推测B基因可能促进水稻穗粒的形成，原因是。

(3) 考虑转基因技术的安全性，适合选用（填“不育”或“可育”）水稻株系作为实验材料，选此株系的原因是。

综合题普通

2. 科学家采用了下图所示流程，将除草剂抗性基因导入到玉米细胞中，以期获得抗除草剂性状的转基因玉米。转化过程中常有残留农杆菌附着在愈伤组织表面，进而导致未转化的愈伤组织也可能在含除草剂的培养基中生长，称为假阳性。请回答下列问题：

注：报告基因含有内含子，不能在原核生物中正确表达，其正确表达产物能催化无色物质K呈蓝色

(1) 基因表达载体除了含目的基因、特定限制酶切割位点、复制原点外，还必须有，以确保导入的基因正常表达。除草剂抗性基因G必须插入到Ti质粒的T-DNA中，原因是。

(2) 利用PCR技术，可以鉴定被侵染的愈伤组织中是否含有除草剂抗性基因G。除草剂抗性基因G的部分序列如下：

5'-ATGGCT……AGGAAC-3'

3'-TACCGA……TCCTTG-5'

根据上述序列应选择引物（填字母）进行PCR；一个目的基因G扩增5次，共需要个引物。

A．引物：5'-TACCGA—3' B．引物：5'—GTTCCT—3'

C．引物：5'—AUGGCU-3' D．引物：5'—ATGGCT—3'

(3) 通过在培养基中添加进行“筛选1”，通常在培养基中添加无色物质K进行“筛选2”的目的是。从抗除草剂玉米叶片中提取抗除草剂基因的DNA过程中，加入95%冷酒精的目的是。

(4) 科学家设法将目的基因整合到受体细胞的叶绿体基因组中，目的是。

综合题困难

3. 科研人员将酵母菌的DAK基因导入天竺葵的叶绿体中，获得了同化甲醛能力较强的天竺葵。为测定转基因天竺葵同化甲醛的能力，科研人员进行了实验，获得如图所示的结果。

(1) 将DAK基因和载体选用双酶法进行切割，限制酶具有专一性，从限制酶的作用特点分析，具体体现是（答2点）。

(2) 常使用PCR特异性地快速扩增目的基因，原理是。PCR反应需要在一定缓冲溶液中进行，需要加入DNA聚合酶，其作用是。用设计的引物和合适的条件进行PCR，其产物用电泳鉴定，结果发现有目的基因以外的杂带存在，分析可能原因是：。

(3) 将DAK基因导入天竺葵的叶绿体中，可以避免花粉扩散引起的基因污染，原因是。

(4) 据曲线图分析可知，实验结论是。欲获得上述曲线中的实验数据，如何进行实验，大体实验思路是。

综合题普通