苏云金杆菌是杀灭玉米螟的重要生物，灭蚊球孢菌具有杀灭蚊子的效能，某人将这两种菌的原生质体融合获得既能杀蚊又能杀螟的新菌株，过程见下图。微生物原生质体的获得等过程和植物的类似。下列叙述错误的是（）

多选题容易

A. 两者培养基的成分有所不同，但易获得某种优良个体 B. 为了获得单细胞悬液，所用的材料和操作有所不同 C. 为了获得杂交细胞，所需要提供的诱导因素有所不同 D. 动物细胞的传代培养一般用液体培养基，比植物组织培养更易获得细胞株

多选题容易

3. 植物体细胞杂交技术的一般流程如图所示，通过该技术可实现不同种、属的杂交，打破生殖隔离，实现了远缘杂交育种。下列叙述正确的是（）

A. 步骤①需要在等渗溶液中进行，这样可以保证原生质体的正常形态 B. 步骤②是该技术的关键环节，融合的细胞均具有两种细胞的遗传物质 C. C形成杂种细胞的过程中线粒体等细胞器参与细胞壁的形成 D. 步骤④⑤的原理是植物细胞的全能性，某些基因会在特定时期表达

多选题容易

1. 利用山金柑愈伤组织细胞(2n) 和早花柠檬叶肉细胞(2n) 进行体细胞杂交可以得到高品质、抗逆性强的杂种植株。如图是7组杂种植株核 DNA 和线粒体 DNA 来源鉴定的结果。下列分析正确的是（）

A. 进行原生质体融合有多种手段，如电刺激、离心、振荡、聚乙二醇、病毒等诱导 B. 细胞融合依赖膜的流动性，获得的融合原生质体需放在无菌水中以防杂菌污染 C. 可通过观察融合后细胞的颜色进行初步筛选 D. 由图可知，杂种植株的核基因只来自早花柠檬，线粒体基因只来自山金柑

多选题普通

2. 某兴趣小组利用植物组织培养技术培育了“手指”植物，但是发现其在培育过程中易感染黑腐病菌而患黑腐病，而野生黑芥具有抗黑腐病抗性，于是设计了“手指”植物与野生黑芥的植物体细胞杂交实验。下列相关叙述正确的是（）

A. 该植物体细胞杂交成功的原理是细胞膜的流动性 B. 酶解细胞壁的过程是在低渗酶解液中完成的 C. 杂种细胞形成的标志是新细胞壁的形成 D. 可用黑腐病菌接种实验检测杂种植株是否具有黑腐病抗性

多选题普通

3. 花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图所示，下列有关叙述错误的是（）

A. 图1培育杂种植株所用的技术体现了植物细胞全能性和细胞膜流动性原理 B. 图1过程①是在无菌水中进行，过程②是在固体培养基中进行 C. 两种植物细胞融合成功的标志是杂种细胞进行有丝分裂 D. 病菌悬浮液均匀喷施于杂种植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，可筛选抗病性强的杂种植株

多选题普通

1. 下列有关细胞工程的叙述，正确的有（　　）

①植物体细胞杂交技术，能克服远缘杂交不亲和的障碍

②动物细胞培养时不能用机械的方法将组织分散成单个细胞

③利用动物细胞培养技术和细胞融合技术可以制备单克隆抗体

④利用核移植技术可以培育试管婴儿

⑤桑葚胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化”

⑥胚胎移植一般只包括从供体、受体的选择到移植结束，而不包括后续的检查过程

A. 2项 B. 3项 C. 4项 D. 5项

单选题普通

2. 下图表示用灭活的仙台病毒诱导动物细胞融合的部分过程，下列相关叙述正确的是（　　）

A. 细胞A和细胞B必须为同种细胞才能融合 B. 细胞C同时有细胞A和细胞B的遗传物质 C. 该融合过程体现了细胞膜具有选择透过性 D. 植物细胞的融合过程与动物细胞完全相同

单选题容易

3. 科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的细胞膜上的蛋白质，其培育过程如图所示，下列分析正确的是（）

A. 过程①表示在低渗溶液中用酶解法处理植物细胞获得原生质体 B. 植物体细胞杂交过程中可以用灭活的病毒对原生质体进行诱导融合 C. 过程②可以根据是否发生质壁分离现象鉴别杂种细胞的细胞壁是否再生 D. 过程③培养基中生长素/细胞分裂素的比值较高有利于愈伤组织的形成

单选题普通

1. 枸杞是一味传统中药，野生黑果枸杞富含花青素，且抗逆性强，但比人工种植的宁夏枸杞个体小、产量低。研究人员尝试利用不对称植物体细胞杂交技术将野生黑果枸杞的抗逆性状转移到宁夏枸杞中。

(1) 愈伤组织细胞生长旺盛，是制备原生质体的良好材料。在特定的培养条件下，外植体经过转变成愈伤组织，培养基中是影响该过程中植物细胞发育方向的关键因素。

(2) 不对称植物体细胞杂交操作过程如下：

①对黑果枸杞原生质体进行辐射处理，使其细胞核中的部分断裂，用药物处理宁夏枸杞原生质体，使其细胞质中的某些酶失活，两种原生质体都失去分裂能力。

②用化学诱导剂诱导原生质体融合，培养体系中只有两种不同枸杞的融合原生质体可分裂形成再生愈伤组织。

(3) 研究人员对3种愈伤组织的同工酶进行检测。同工酶是功能相同，但酶本身的分子结构、理化性质等方面有所不同的一组酶。

①过氧化氢酶的功能是。将提取的愈伤组织蛋白质进行电泳，电泳后的凝胶浸泡在淀粉、KI和H₂O₂混合溶液中，已知KI遇O₂生成I₂ ，一段时间后过氧化氢酶所在部位显色，如下图所示。显色条带为色，显色深浅由酶的决定。

②结果显示融合原生质体再生愈伤组织中缺乏来自的部分过氧化氢同工酶，原因可能是。

(4) 本研究中，获得多株杂种植株后下一阶段的研究方向是。

综合题困难

2. 甘蔗是蔗糖的主要来源，甘蔗R具有高产高糖的优良特性但耐寒性差；甘蔗G 是耐寒品种。科研人员利用植物体细胞杂交技术以期快速培育出耐寒性更强且性状更优良的甘蔗新品种。

(1) 如图1，利用去除细胞壁获得原生质体。分别加入 IOA 和 R-6G钝化后诱导原生质体融合。仅有杂种原生质体可持续分裂形成再生细胞团，原因是。

(2) 科研人员发现制备原生质体及原生质体融合后均会不同程度发生氧化褐变、细胞壁再生困难的现象。为解决这一问题，科研人员利用甘蔗杂种原生质体进行以下实验。

①由图2可知，甘蔗杂种原生质体再生过程中最好使用。

②科研人员推测激素通过促进果胶合成关键酶基因GAUT 表达，从而促进细胞壁再生，请将下表补充完整为该推测提供证据（选填下列字母）。

组别	激素使用	实验处理	检测指标
1		原生质体中转入过量表达GAUT基因载体
2	a	原生质体中转入抑制GAUT基因表达载体
3		不转入基因的原生质体

a.不使用激素

b.使用激素组合1

c.使用激素组合 2

d.原生质体中2，4-D和6-BA的含量

e.完成再生壁的细胞比例

③上表实验是否能够达成完整验证推测的目的?请简述理由。

实验探究题困难

3. 学习以下材料，回答（1）~（4）题。

利用植物体细胞杂交技术育种

植物体细胞杂交技术分为对称杂交和不对称杂交。对称杂交是指双亲细胞的遗传物质完整融合于杂种植株中，但远缘体细胞杂交往往出现双亲染色体排斥及随机丢失、愈伤组织难以分化、杂种细胞形态异常等现象。因此，科学家发展了不对称体细胞杂交技术，即通过射线、紫外线等因素处理供体（提供少量遗传物质的细胞）原生质体，造成部分染色体断裂、易位、消除，用碘乙酰胺（IOA）处理受体原生质体，抑制其细胞分裂，之后融合时只将供体部分染色体或基因转移到受体亲本。

花椰菜（2n=18）营养价值和经济价值较高，但其生产常受到多种病害影响。黑芥（2n=16）携带抗黑腐病等抗性基因。以黑芥叶肉细胞为供体、花椰菜下胚轴细胞为受体，利用不对称体细胞杂交技术培育抗黑腐病的花椰菜。融合后筛选杂种细胞的方法很多，可在显微镜下观察融合原生质体的形态、检测染色体数目，通过流式细胞仪测定融合细胞DNA含量，观察杂种植株的性状表现等。

除花椰菜和黑芥外，育种工作者尝试进行多种作物的不对称体细胞杂交，如抗白叶枯病的疣粒野生稻和栽培水稻杂交、耐盐抗病的野生高冰草和普通小麦杂交，以期获得优质高产的水稻和小麦。不对称杂交获得的杂种植株大多表现为供体和受体的中间类型，但有少数杂种表型偏向受体植株，这些类型的杂种植株将成为创新育种的理想材料。

(1) 请在①~⑤中补充恰当的名称，完善利用不对称体细胞杂交技术培育抗黑腐病花椰菜的部分技术流程：①；②；③；④；⑤。

(2) 利用植物体细胞杂交技术育种的优势体现在___（多选）。 A. 与有性杂交育种相比，打破了生殖隔离的限制 B. 与转基因育种相比，可转移未知或多基因控制的性状 C. 与诱变育种相比，无需筛选即可获得纯种个体 D. 与多倍体育种相比，染色体数目没有发生变化

(3) 花椰菜和黑芥体细胞杂交获得的再生植株染色体数目介于 19和68之间，染色体数目不等的原因是。最好选择染色体数目的再生植株进行后续育种研究。

(4) 在耐盐抗病的野生高冰草和普通小麦不对称体细胞杂交过程中，为快速获得优质高产小麦，科研小组首选仅有的2株表型偏向小麦的杂种植株，将其作为育种材料，原因是。

综合题困难

1. 科研人员利用植物体细胞杂交技术培育矮牵牛新品种，技术流程示意图如下。

下列叙述正确的是（　　）

A. 愈伤组织是幼嫩叶片通过细胞分化形成的 B. 获得的杂种植株都能表现双亲的优良性状 C. 可用聚乙二醇诱导原生质体甲和乙的融合和细胞壁再生 D. 用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织以获得原生质体

单选题普通

2. 为培育具有市场竞争力的无籽柑橘，研究者设计如下流程。相关叙述不正确的是（）

A. 过程①需使用胰蛋白酶处理 B. 实现过程②依赖膜的流动性 C. 过程③需应用植物组培技术 D. 三倍体植株可产生无籽柑橘

单选题普通

3. 两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如下图所示。下列说法错误的是（）

A. 过程①需使用纤维素酶和果胶酶处理细胞 B. 过程②的目的是使中间偃麦草的染色体断裂 C. 过程③中常用灭活的病毒诱导原生质体融合 D. 耐盐小麦的染色体上整合了中间偃麦草的染色体片段

单选题普通