水稻恶苗病主要由镰刀菌引起，是水稻苗期至穗期的主要病害之一。研究人员开展相关实验，从水稻根基土壤中筛选水稻恶苗病拮抗菌，并探究其抗菌机制。相关实验过程如图所示。回答下列问题：

1. 水稻恶苗病主要由镰刀菌引起，是水稻苗期至穗期的主要病害之一。研究人员开展相关实验，从水稻根基土壤中筛选水稻恶苗病拮抗菌，并探究其抗菌机制。相关实验过程如图所示。

回答下列问题：

(1) 步骤①中需从（填“患病”或“健康”）的水稻根基土壤获取菌株。步骤②和③中“a”表示。接种后在28℃条件下培养1-2天，根据对步骤④中获得的纯培养物进行初步的鉴定和分类。

(2) 按照步骤⑤进行拮抗菌筛选，在甲处接种等量的拮抗菌菌株J1、J2后，培养一段时间，结果如图所示。据图判断，的抑菌效果更佳，依据是。该实验还需设置对照组，对照组的操作是。

(3) 用去除拮抗菌菌株J1后的无菌发酵液处理病原菌菌丝体，发现菌丝明显变短，推测拮抗菌抑菌的原理是。

(4) 实验筛选出的菌株需要先进行大田种植试验以检测防治效果，原因是。

【考点】

微生物的分离和培养; 培养基对微生物的选择作用;

【答案】

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实验探究题普通

1. 黄曲霉素是由黄曲霉和寄生曲霉等产生的代谢产物，具有极强的毒性和致癌性，主要污染粮油及其制品。科研人员用黄曲霉素Bl（AFB1）的结构类似物——豆香素（C₉H₆O₂）筛选出能高效降解AFB1的值的菌株，请回答下列问题：

(1) 为了筛选到AFB1降解菌，常从霉烂的花生、玉米和棉花中采样，原因可能是。

(2) 筛选AFB1降解菌时，培养基中唯一的碳源物质是，加入琼脂的目的是，接种后，培养基中AFB1降解菌的数量会逐渐。

(3) 菌体对有机物的降解途径有胞外分泌物降解和菌体吸附降解两种。实验小组对降解菌的发酵液进行离心，发现上清液中AFB1的残留率明显低于菌悬液的。

①分析以上信息可知，菌体降解AFB1的途径主要是。

②经检测发现上清液中存在多种蛋白质，请设计实验验证蛋白质K是降解AFB1的有效成分，要求简要写出实验思路和预期结果（实验材料：培养过降解菌的上清液、蛋白质K水解酶、含AFB1的培养基）

。

实验探究题普通

2. 某同学从土壤中分离得到A和B两株可以降解秸秆的细菌，在此基础上采用平板培养法比较二者降解秸秆的能力，并分析两个菌株的其他生理功能。

实验所用的培养基成分如下。

培养基Ⅰ：K₂HPO₄ ， MgSO₄ ， NH₄NO₃ ，纤维素，刚果红。

培养基Ⅱ：K₂HPO₄ ， MgSO₄ ，纤维素，刚果红。

操作步骤：

①将A、B菌株分别接种在两瓶液体培养基Ⅰ中培养，得到A、B菌液；

②液体培养基Ⅰ、Ⅱ中添加琼脂，分别制成平板Ⅰ、Ⅱ。

回答下列问题。

菌株	透明圈大小
菌株	平板Ⅰ	平板Ⅱ
A	+++	++
B	++	-

(1) 培养基在制备的过程中需要灭菌，最常用的灭菌方式是。培养基中NH₄NO₃的作用是为菌株的生长提供氮源，氮源在菌体内可以参与合成（答出2种即可）等生物大分子。

(2) 为了比较A、B降解秸秆的能力，某同学利用步骤②所得到的平板Ⅰ、Ⅱ进行实验，结果如表所示（“+”表示有透明圈，“+”越多表示透明圈越大，“－”表示无透明圈），推测该同学的实验思路是：在无菌条件下，。

(3) 该同学还设计了一个利用秸秆生产燃料乙醇的小型实验。实验流程如图所示。

①在粉碎的秸秆中接种菌T，菌T应该选择（A/B）更适宜，其原因是。

②本实验收集的淋洗液中的可以作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式的优点是。

实验探究题普通

3. 为确定某致病细菌对不同抗生素的敏感性，研究人员设置了四组实验：分别将含有A、B、C、D四种抗生素（含量相同）的滤纸片均匀置于同一平板上的不同位置，放在培养箱中培养一定时间后，观察其透明圈的大小，实验结果如下表。回答下列问题：

实验组别	抗生素种类	实验结果
1	A	滤纸片周围出现透明圈
2	B	滤纸片周围没有出现透明圈
3	C	滤纸片周围的透明圈比含A的小
4	D	滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落

(1) 配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，溶解、定容后，并进行灭菌。

(2) 若该实验需要计算菌落数，宜选择菌落数在_，采用稀释涂布平板法统计的结果往往较实际值偏低，原因是。

(3) 微生物培养的关键是，根据实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素种类为；在排除杂菌污染的情况下，第4组实验说明细菌对抗生素D产生了。

(4) 该实验还缺少一组空白对照，请尝试补充：。

实验探究题普通