研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。近期在“科学号”考察船对南中国海科考中，中国科学家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉积物样品，分离、鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。回答下列问题：

1. 研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。近期在“科学号”考察船对南中国海科考中，中国科学家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉积物样品，分离、鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。

回答下列问题：

(1) 研究者先制备富集培养基，然后采用法灭菌，冷却后再接入沉积物样品，28℃厌氧培养一段时间后，获得了含拟杆菌的混合培养物，为了获得纯种培养，除了稀释涂布平板法，还可采用法。据图分析，拟杆菌新菌株在以为碳源时生长状况最好。

(2) 研究发现，将采集的样品置于各种培养基中培养，仍有很多微生物不能被分离筛选出来，推测其原因可能是。（答一点即可）

(3) 藻类细胞解体后的难度解多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。从生态系绘组成成分的角度考虑，拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能是。

(4) 深海冷泉环境特殊，推测此环境下生存的拟杆菌所分泌物各种多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其特性可能还有。

【考点】

微生物的分离和培养; 培养基对微生物的选择作用; 生态系统的物质循环; 灭菌技术;

【答案】

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综合题普通

1. 回答下列（1）、（2）小题：

(1) 镇江香醋具有醋香浓郁、风味纯正、色浓而味鲜，且久存其质不变等特点。这种传统酿造是用含有多种微生物的大曲（麦曲）为糖化发酵剂所进行，这些微生物主要有乳酸菌、醋酸菌、葡萄球菌、大肠杆菌和酵母菌等，其中属于真核生物。其独特的风味与镇江的环境有关外，还在于发酵产生了复杂多样的代谢产物，更在于发酵所用的造成发酵产品具有特殊的原因。为了了解某时期发酵液中醋酸菌的量，要用计数；可在发酵液中加入，这是采用方法将发酵产物中的乳酸进行分离提纯。

(2) 能产生天然药物的某X植物细胞易被Y病毒感染，但某Z细菌具有抗Y病毒的能力。该细菌对病毒具有免疫力的原因是一方面有抗Y病毒的基因，其表达的能把该病毒蛋白水解成氨基酸，另一方面该细菌内有，可使该病毒的DNA切成许多短片段。从该细菌中分离出抗Y病毒的基因，要用到电泳技术，电泳时常使用凝胶作为介质，凝胶的孔隙可起的作用，加样孔一端朝向极。将分离到的基因与Ti质粒重组，导入农杆菌，再整合到Y植物细胞的中，经筛选，并培养获得抗Y病毒的大量X植物细胞，生产大量的天然药物。

综合题普通

2. 郫县豆瓣是中国顶尖调味料之一，也是中国地理标志产品，色泽油润、味辣咸香、回味醇厚，被誉为川菜之魂，其发酵过程有多种酵母菌和其它微生物参与。鲁氏接合酵母是郫县豆瓣发酵﹑后熟过程中一种重要的酵母菌，发酵过程中产生的乙醇等物质在豆瓣风味形成中发挥着重要作用。回答下列问题：

(1) 若要从发酵好的成品郫县豆瓣中分离出不同的酵母菌种，实验流程可以概括为：豆瓣取样→→挑选菌落。挑选菌落时﹐可根据菌落的（答出两点）等特征来区分酵母菌和其他微生物。

(2) 研究人员采用高盐无氧和低盐有氧两种条件培养，分离获得了多种不同的酵母菌株。在郫县豆瓣发酵过程中，起主要作用的酵母菌可能是在培养条件下获得的，原因是。

(3) 下图是在食盐浓度分别为10%、20%、30%的不同条件下﹐鲁氏接合酵母菌的数量增长曲线。据图分析，设计探究鲁氏接合酵母菌最适发酵温度的实验方案时，应该将食盐浓度控制在比较适宜，理由是。

(4) 酵母菌的产醇能力对豆瓣的风味有较大影响。若要测定不同酵母菌种产生乙醇的能力，可以将各种酵母菌培养相同时间后，取等量静置澄清后的培养液，分别加入适量的酸性重铬酸钾溶液，振荡均匀后观察颜色变化，若溶液呈现色，说明发酵过程中产生了乙醇。若要用比色法来测定培养液中乙醇的含量，需要制备标准显色液，该实验标准显色液的配制方法是。

综合题普通

3. 为提高作物产量，种植业往往使用大量的氮素化肥，既增加了生产成本，又易造成环境污染。自生固氮菌营独立生活，为改变这种现状带来了希望。某科研小组利用下面的培养基尝试从土壤中分离固氮能力强的自生固氮菌，以便生产菌肥替代传统化肥。清回答下列问题：

培养基配方表：

成分	葡萄糖	KH₂PO₄	MgSO₄	NaCl	CuSO₄	CaCO₃	琼脂	蒸馏水
用量	10g	0.2g	0.2g	0.2g	0.2g	5g	3.5g	IL

(1) 配制培养基时，按配方表称量、溶化、定容后需经法灭菌后再倒平板。此培养基能分离自生固氮菌的原因是。

(2) 为分离纯化自生固氨菌及观察自生固氮菌的菌落特征，需将土样经后，用灭菌后的（填接种工具名称）采用将菌液接种到平板上培养。

(3) 已知固氮酶的化学本质为蛋白质，不同的蛋白质在不同浓度的盐溶液中溶解度不同。为检测分离得到的自生固氮菌的固氮酶活性。可将固氮菌细胞破碎后采用法分离出固氮酶，该方法的优点是。

(4) 研究发现，土壤中碳含量降低，碳氮比低于40：1时，固氮菌的固氮作用迅速停止。因此纯化后制作的优良菌肥最好与（填“ 氮肥”“磷肥”“钾肥”或“有机肥”）配合施用。

综合题普通