蛋白质工程是在深入了解蛋白质分子的结构与功能关系的基础上进行的，它最终要达到的目的是（）

1. 干扰素在体外保存非常困难。干扰素由166个氨基酸组成，如果将其分子上第17位的一个半胱氨酸变成丝氨酸，那么在－70℃的条件下可以保存半年。若利用蛋白质工程的原理和方法生产新型干扰素，下列思路最可行的是（）

A. 用DNA合成仪合成新的干扰素基因 B. 利用基因定点突变技术改造干扰素基因 C. 直接改造mRNA，进行密码子的替换 D. 生产正常干扰素，再进行氨基酸的替换

单选题普通

2. 中华鲟是地球上最古老的脊椎动物，被称为“活化石”．研究者试图通过蛋白质工程改造中华鲟体内的某些蛋白质，使其更加适应现在的水域环境．以下说法错误的是（）

A. 该工程可以定向改变蛋白质分子的结构 B. 改造蛋白质是通过改造基因结构而实现的 C. 改造后的中华鲟和现有中华鲟仍是同一物种 D. 改造后的中华鲟的后代不具有改造的蛋白质

单选题普通

1.

如图是生产某种特定蛋白质的工程技术模式图，相关说法正确的是（　　）

A. 核酸片段a是DNA，④过程是利用PCR扩增 B. ⑥过程常用显微注射技术，DNA浓度保持在1～3ug/mL C. ⑦过程需要激素、维生素、氨基酸和核苷酸等 D. 实施⑧前对胚胎进行分割得到同卵双胎的可能性大，分割时间越早越容易成功

多选题普通

2.

已知生物体内有一种蛋白质（P），该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质（P₁）不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性。回答下列问题：

（1）从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的进行改造。
（2）以P基因序列为基础，获得P₁基因的途径有修饰基因或合成基因，所获得的基因表达时是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括的复制；以及遗传信息在不同分子之间的流动，即。
（3）蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过和，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，在经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物进行鉴定。

填空题普通

1. 为验证pdx1蛋白是决定胰岛形成的最为关键的蛋白质。科研人员以斑马鱼为模式生物，先获得在胰岛区域特异性表达GFP（绿色荧光蛋白，可在荧光显微镜下观察到绿色荧光）的转基因斑马鱼（G品系斑马鱼）。特异性敲除G品系斑马鱼的pdx1基因，获得N品系斑马鱼。回答下列问题：

(1) 制备G品系斑马鱼。

①获得GFP基因。方法一：可从库中获得GFP基因的序列信息，再通过人工合成的方法获得。方法二：以含GFP基因的质粒作为进行PCR，扩增得到大量GFP基因。

②制备重组质粒。将基因的启动子和GFP基因相连后，再与质粒相连。

③导入受体细胞。将重组质粒导入斑马鱼的受精卵，选择受精卵为受体细胞的原因是。

④筛选G品系斑马鱼。若在荧光显微镜下观察小鱼的各个器官时发现，表明成功得到G品系斑马鱼。

⑤筛选纯合G品系斑马鱼。鉴定GFP插入的位置，针对插入位点的上下游设计了引物1、2，针对GFP基因自身序列设计了引物3、4，各引物的位置如图1所示。将G品系斑马鱼相互交配，提取不同子代个体的DNA用引物1、2进行PCR并电泳，结果如图2所示。加样孔对应的个体是纯合G品系斑马鱼。若改用引物3、4进行PCR并电泳，加样孔对应的个体是纯合野生型斑马鱼。

(2) 制备N品系斑马鱼。CRISPR-Cas9技术能特异性敲除基因。制备针对pdx1基因的CRISPR-Cas9体系，采用的方法导入G品系斑马鱼的受精卵中。筛选获得了1个pdx1突变品系（N），PCR后进行，得到的序列如下图3所示（图中下划线表示替换，“-”表示缺失1个碱基）。预计突变品系N的pdx1蛋白含个氨基酸。（已知密码子：CCU-脯氨酸；UAA、UGA和UAG为终止密码子）