农杆菌侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的T-DNA插入到植物基因组中。图示为利用农杆菌培育转基因植物的基本流程，下列叙述正确的是（）

1. 科研人员分别将蛋白 C基因和蛋白 G（葡萄糖转运蛋白）基因与空质粒连接，构建表达载体。将空质粒和上述两种表达载体分别转入三组蛋白G缺陷细胞，在三种不同浓度的葡萄糖间隔刺激下，测定三组细胞的葡萄糖转运速率，结果如下图。下列分析正确的是（）

A. 实验结果推测蛋白C与葡萄糖转运过程无关 B. I组实验的目的是排除空质粒对实验结果的影响 C. II、III组葡萄糖转运速率随葡萄糖浓度增加而减小 D. 实验结果表明蛋白 C的转运功能强于蛋白 G

多选题普通

2. 下图是培育抗除草剂玉米的技术路线图，含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列相关叙述正确的是（）

A. 过程①用两种限制酶就可防止酶切产物自身环化 B. 过程②用Ca²⁺处理可提高转化成功率 C. 过程③应在培养基中加入除草剂和物质K D. 筛选得到的A是无农杆菌附着的转化愈伤组织

多选题普通

3. 科研人员先分别PCR扩增尿酸酶基因和原核生物胞外蛋白信号肽基因（编码的肽链能引导新合成的蛋白质转移、分泌），再将它们拼接形成融合基因，并导入大肠杆菌生产尿酸酶．相关叙述正确的是（　　）

A. 扩增两类基因时可以通过设计引物来控制两类基因的拼接方向 B. 构建融合基因的目的是使大肠杆菌能合成尿酸酶并分泌到细胞外 C. 融合基因导入大肠杆菌前需构建基因表达载体，以保证目的基因正常表达和遗传 D. 在导入融合基因前，应先用NaCl处理大肠杆菌，使其变为感受态细胞

多选题普通

1. 培育耐盐碱作物对保障粮食安全具有重要意义。研究人员将野生大豆S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因GsSAMS转入水稻中，增强了水稻对盐碱的耐受性。下列叙述正确的是（　　）

A. GsSAMS基因的转入增加了水稻染色体的数量 B. GsSAMS基因转入水稻后最终定位于核糖体中 C. GsSAMS基因在水稻中使用与大豆不同的遗传密码 D. GsSAMS基因在水稻中成功表达了其编码的蛋白质

单选题普通

2. 盐碱胁迫下植物应激反应产生的H₂O₂对细胞有毒害作用。禾本科农作物AT1蛋白通过调节细胞膜上PIP2s蛋白磷酸化水平，影响H₂O₂的跨膜转运，如图所示。下列叙述错误的是（）

A. 细胞膜上PIP2s蛋白高磷酸化水平是其提高H₂O₂外排能力所必需的 B. PIP2s蛋白磷酸化被抑制，促进H₂O₂外排，从而减轻其对细胞的毒害 C. 敲除AT1基因或降低其表达可提高禾本科农作物的耐盐碱能力 D. 从特殊物种中发掘逆境胁迫相关基因是改良农作物抗逆性的有效途径

单选题普通

3. 镰刀形细胞贫血症是一种单基因遗传病，由正常血红蛋白基因 (HbA) 突变为镰刀形细胞贫血症基因 (Hbs) 引起， HbA 和 Hbs 的某片段如图甲。对胎儿基因检测的主要原理是： Mst Ⅱ限制酶处理扩增后的 DNA；加热使酶切片段解旋，用荧光标记的 CTGACTCCT序列与其杂交；凝胶电泳分离。图乙是凝胶电泳后荧光出现的三种可能性下列叙述错误的是（）

A. 提取胎儿DNA样品后，扩增DNA需要添加特定的引物 B. 用MstⅡI限制酶处理DNA不充分，可能把正常人误判为携带者 C. 荧光标记序列越长，图乙-c中两个DNA条带间的距离越大 D. 若某胎儿检测结果为图乙-b，则该胎儿为镰刀形细胞贫血症患者

单选题普通

1. 半乳糖醇可作为新型甜味剂应用于糖果、面包等食品工业。酿酒酵母长期用于食品加工业，具有很强的食品安全性与大规模发酵能力。为构建酿酒酵母工程菌株生产半乳糖醇，回答下列问题：

(1) 为将木糖还原酶基因（如图甲）准确连接至pRS313质粒（如图乙）内，需在引物1、2的5’端分别引入限制酶B、A的识别位点，经PCR扩增得到木糖还原酶基因。对目的基因和pRS313质粒进行限制酶B、A双酶切处理，目的是。经酶切后的目的基因和质粒经DNA连接酶连接得到。

（注：氨苄青霉素作用于细菌的细胞壁，抑制细菌细胞壁的合成）

(2) 将重组质粒导入（填“酿酒酵母”或“大肠杆菌”）中，采用法将菌液接种至含有氨苄青霉素的LB平板进行筛选。挑取单菌落进行DNA测序，测序验证正确后，利用质粒提取试剂盒提取重组质粒。

(3) 将重组质粒导入酿酒酵母时，需利用醋酸锂-Tris-EDTA．缓冲液-PEG共同处理酿酒酵母，其中EDTA的作用是抑制DNA酶的活性，防止。

(4) 取各重组菌株制成等浓度的菌液，等量接种到含等量D-半乳糖的培养基中，发酵12h后立即离心并分离沉淀和上清液以终止发酵。测定上清液中半乳糖醇的含量，比较各重组菌株单位时间内半乳糖醇的产量，结果表明导入黑曲霉木糖还原酶基因anxr的pRS313-anxr工程菌株是优势菌株。这属于对（填“基因”、“基因表达产物”或“个体性状”）的检测，检测时需以菌株作为阴性对照。

(5) pRS313-anxr工程菌株中D-半乳糖的代谢途径如图丙，为进一步提高D-半乳糖转化为半乳糖醇的效率；研究者对工程菌中的半乳糖激酶基因进行，通过DNA测序筛选成功改造的菌株。据图分析，除木糖还原酶和半乳糖激酶外，限制半乳糖醇产量的因素还有（写出2点即可）。

综合题普通

2. 学习以下材料，回答(1)~(4)题。

构建抗病毒感染和防基因污染的工程菌

基因工程问世以来，人们构建出不同种类的工程菌用于生产各种药物、工业产品和生物材料等。但是自然界有很多病毒可侵染这些工程菌，导致发酵失败并造成大量经济损失。此外，工程菌还可能将其基因传播给自然界中其他微生物，造成基因污染。为了解决上述问题，科研人员尝试构建抗病毒感染和防基因污染的工程菌。

科研人员首先通过重构遗传密码构建了一种大肠杆菌S。生物体中有六种密码子对应丝氨酸，科研人员对大肠杆菌基因组进行改造，将丝氨酸密码子UCG、UCA对应的基因序列变为其他四种丝氨酸密码子所对应的 DNA碱基序列，同时敲除上述两种密码子所对应tRNA的编码序列，得到大肠杆菌S。但随后科研人员发现仍有一些病毒可以感染大肠杆菌S，可见仅重构几组密码子是不够的，有些病毒能够绕过这些缺失的密码子。

近日，科研人员在大肠杆菌S的基础上，向其基因组中添加了两种编码诱骗tRNA的基因，并进行一系列改造，构建出了一种不会被任何已知病毒感染的大肠杆菌L。L菌诱骗病毒的机理如下图所示，图中显示了L菌中携带亮氨酸的两种诱骗tRNA。因为亮氨酸和丝氨酸在物理和化学性质上差别很大，导致所合成的病毒蛋白质丧失正常的结构功能，从而使病毒无法完成复制。虽然某些病毒自身可携带正确的tRNA基因，转录出少量正确的tRNA，但在大肠杆菌L中诱骗tRNA占比很高，可有效抑制病毒的自我复制。

此外，通过基因组改造，L菌的亮氨酸密码子也被替换为UCG或 UCA，并且L菌只能在含有人工添加的特殊物质的培养基中生存，保证其基因在自然界中不会传播给其他微生物。

目前，很多医用、工业生产等所需材料主要通过化学方法合成，成本高昂。上述研究为在未来使用改造后的微生物大量合成这些材料降低成本提供了研究基础。