1.
苹果生长过程中易受真菌感染,科研人员将在其他植物中发现的BG2基因转入苹果中,该基因控制合成的β-1,3葡聚糖酶可降解许多病原真菌的细胞壁,从而抑制真菌的生长与繁殖。请回答下列问题:
(1)
利用PCR技术克隆BG2基因时,应选择下图中的引物(填序号),引物的作用是。
(2)
下图为构建含BG2基因重组质粒的过程。研究人员用XbaⅠ和NotⅠ切割质粒,用NotⅠ和SpeⅠ切割目的基因后,二者可连接在一起构成重组质粒,原因是。若BG2基因两端没有NotⅠ识别序列,PCR时可在引物(填序号)的(填“3”或“5”)端加上NotⅠ识别序列。图中增强子是一段能使基因转录频率明显增加的DNA序列,其参与构成的复合启动子的作用是:①,②增强转录活性。
(3)
GUS基因为常用的报告基因,只能在导入真核细胞后正确表达,而在农杆菌中不能正确表达。转GUS基因的植物组织浸泡在含有某底物的营养液中,GUS能与底物发生反应使营养液呈现蓝色。将构建好的BG2重组质粒与经Ca2+处理后的农杆菌共培养,然后将菌液接种至含的培养基上可筛选出含有BG2重组质粒的农杆菌,再将其与苹果外植体共培养进行转化,通过(写出筛选过程),从而获得成功转化的受体细胞。
【考点】
PCR技术的基本操作和应用;
基因工程的操作程序(详细);