1.
人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种对预防和治疗急性心肌梗塞等血栓性疾病有良好效果的糖蛋白。某科研机构培育出了含htPA基因的转基因兔，并从转基因母兔乳汁中成功获得了大量的htPA，其培育流程如图所示。回答下列问题：
(1)
在构建重组质粒时，需要用到的酶是，通常会用到两种不同的酶对目的基因和质粒进行酶切处理，目的是。代孕母兔接受早期胚胎允许其着床并妊娠，其生理基础包括（答出2点）。
(2)
生长激素（GH）可促进动物细胞增殖和乳腺生长发育及维持泌乳。研究人员将GH基因导入htPA单转基因兔体内，获得htPA/GH双转基因兔，以期提高兔乳清中的htPA表达量。
①显微注射GH基因准备：制备GH基因重组质粒。
②对兔进行和同期发情处理：选取3只未发情的htPA单转基因兔作为供体（标号a、b、c），适量注射FSG/hCG（两种促性腺激素），与正常公兔配种，在母兔的（填部位）形成受精卵。在供体兔配种的同时，选取成年健康母兔作为受体，耳缘静脉注射适量hCG。
③双转基因兔的制备：显微注射GH基因重组质粒到受精卵内，适宜条件培养，胚胎移植。
④转基因兔的整合筛选：无菌剪取新生仔兔的耳尖组织少许，提取基因组。针对htPA和GH两种基因，设计对引物进行PCR检测。对PCR反应产物进行，确定条带大小是否正确。
⑤htPA含量测定：分别测定htPA单转基因兔和htPA/GH双转基因兔乳清中的htPA的表达量
【考点】
PCR技术的基本操作和应用;
胚胎移植;
基因工程的基本工具（详细）;
基因工程的操作程序（详细）;
能力提升
