人体心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（eTnT）、肌钙蛋白1（cTnl）和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTnl在血液中的含量上升可作为心肌损伤的特异性指标。为制备出抗cTnl的单克隆抗体，研究人员完成了以下实验。请据图回答下列问题：

1. 人体心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（eTnT）、肌钙蛋白1（cTnl）和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTnl在血液中的含量上升可作为心肌损伤的特异性指标。为制备出抗cTnl的单克隆抗体，研究人员完成了以下实验。请据图回答下列问题：

(1) 动物细胞培养时，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体条件为与5%CO₂的混合气体。为了防止培养细胞时有害代谢物的积累，可采用的方法，以清除代谢物。

(2) 以cTnl作为抗原进行注射，引起小鼠产生免疫反应，经细胞诱导融合，甲、乙、丙中只含杂交瘤细胞的是；诱导动物细胞融合的常用方法有：（写出两种）。

(3) 图示过程中的②表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行，之后稀释、培养、再检测，多次重复上述操作，其目的是筛选获得的杂交瘤细胞。

(4) 为进一步降低鼠源性单克隆抗体诱发的免疫反应，研究人员通过蛋白质工程对单克隆抗体进行人工改造，通过将“嫁接”到人的抗体上，获得嵌合抗体。

【考点】

动物细胞培养技术;

【答案】

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综合题普通

1. 在肿瘤患者的治疗中，被动免疫治疗是指被动地将具有抗肿瘤活性的免疫制剂或细胞回输给肿瘤患者机体进行治疗，该治疗方案适用于肿瘤晚期患者，主要分为单克隆抗体治疗和过继性细胞治疗两类，其中过继性细胞治疗相关过程如图所示。回答下列问题：

(1) 在单克隆抗体治疗中，为了获取能产生抗肿瘤细胞的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。筛选所用的培养基属于培养基（按功能），筛选出来的杂交瘤细胞进行和才可以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

(2) 科学家将细胞毒素与单克隆抗体结合，制成了抗体—药物偶联物（ADC），ADC通常由三部分组成，其中抗体的作用是。

(3) 过继性细胞治疗中，从肿瘤患者体内获取的免疫细胞置于适宜环境下培养，培养过程中会出现分裂受阻，其原因主要有（答出2点），培养过程中出现接触抑制现象时，可用酶处理贴壁细胞使之分散成单个细胞进行传代培养。

(4) 过继性细胞治疗能有效避免免疫排斥，其原因是。

综合题普通

2. 2018年1月25日报道，两只克隆猕猴“中中”和“华华”在中国诞生，突破了现有技术无法克隆灵长类动物的世界难题，将为阿尔茨海默症、自闭症等脑疾病带来前所未有的光明前景，图为过程流程图，请回答下列有关问题：

(1) 欲获得单个雌猕猴体细胞，可用酶处理动物组织块。动物细胞培养一般分为和传代培养两个阶段过程。在前一阶段，贴壁的细胞会出现现象，所以要进行传代培养。

(2) ①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至时期再进行，目前使用的去核方法是。②表示。

(3) A细胞的获得过程属于（有性/无性）生殖，在培养早期胚胎时，培养液中通常要添加等一些天然成分。

(4) 根据下图回答相关问题：

若上图表示动物细胞融合的过程，过程①区别于植物细胞常用的诱导剂是。

若上图表示制备单克隆抗体的部分过程，甲细胞为小鼠的骨髓瘤细胞，则乙细胞为。

综合题普通

3. 科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加快转基因奶牛的繁殖速度，可以对此转基因奶牛进行克隆（如下图所示）。

(1) 在进行细胞培养之前，要对取自转基因奶牛的组织进行分离，形成单个细胞，这一过程中需要利用处理。

(2) 在进行原代培养时，细胞的增殖方式是。此外，细胞增殖还表现出贴壁生长和等特点。

(3) 使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，目的是。

(4) 动物细胞培养时，培养液中要通入一定浓度的CO₂ ，目的是。

(5) 操作中需要将含人生长激素基因的奶牛体细胞的细胞核移入去核的中。选它作为受体细胞的原因除了它体积大，易操作，营养丰富外，还因为它的细胞质中可能含有。

综合题普通