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1. 科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加快转基因奶牛的繁殖速度，可以对此转基因奶牛进行克隆（如下图所示）。

(1) 在进行细胞培养之前，要对取自转基因奶牛的组织进行分离，形成单个细胞，这一过程中需要利用处理。
(2) 在进行原代培养时，细胞的增殖方式是。此外，细胞增殖还表现出贴壁生长和等特点。
(3) 使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，目的是。
(4) 动物细胞培养时，培养液中要通入一定浓度的CO2 ， 目的是。
(5) 操作中需要将含人生长激素基因的奶牛体细胞的细胞核移入去核的中。选它作为受体细胞的原因除了它体积大，易操作，营养丰富外，还因为它的细胞质中可能含有。
【考点】
动物细胞培养技术;
【答案】

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1. 成纤维细胞生长因子（FGF20）会在肺癌、胃癌和结肠癌细胞中过量表达，可作为潜在的肿瘤标志物。因此抗FGF20抗体可用于癌症的早期诊断筛查。研究者设计如图流程制备抗FGF20单克隆抗体。请回答下列问题：

(1) 图中①过程可用酶处理剪碎后的小鼠脾脏，使剪碎的脾脏分散成单个细胞，然后加入培养液制成细胞悬液。
(2) ②过程应先用（生物法）诱导细胞融合，再进行筛选。按功能分类，此次筛选所采用的培养基属于，经筛选获得的杂交瘤细胞的特点是。
(3) ③过程需对得到的杂交瘤细胞进行克隆化培养和，经多次筛选，以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
(4) 单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原（病原体或癌变细胞等）并与之结合，而且绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这体现了单克隆抗体的优点是。
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2. 人体心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（eTnT）、肌钙蛋白1（cTnl）和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTnl在血液中的含量上升可作为心肌损伤的特异性指标。为制备出抗cTnl的单克隆抗体，研究人员完成了以下实验。请据图回答下列问题：

(1) 动物细胞培养时，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体条件为与5%CO2的混合气体。为了防止培养细胞时有害代谢物的积累，可采用的方法，以清除代谢物。
(2) 以cTnl作为抗原进行注射，引起小鼠产生免疫反应，经细胞诱导融合，甲、乙、丙中只含杂交瘤细胞的是；诱导动物细胞融合的常用方法有：（写出两种）。
(3) 图示过程中的②表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行，之后稀释、培养、再检测，多次重复上述操作，其目的是筛选获得的杂交瘤细胞。
(4) 为进一步降低鼠源性单克隆抗体诱发的免疫反应，研究人员通过蛋白质工程对单克隆抗体进行人工改造，通过将“嫁接”到人的抗体上，获得嵌合抗体。
综合题 普通
3. 2018年1月25日报道，两只克隆猕猴“中中”和“华华”在中国诞生，突破了现有技术无法克隆灵长类动物的世界难题，将为阿尔茨海默症、自闭症等脑疾病带来前所未有的光明前景，图为过程流程图，请回答下列有关问题：

(1) 动物细胞培养一般分为和传代培养两个阶段过程。在前一阶段，贴壁的细胞会出现象，所以要进行传代培养。
(2) ①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至时期再进行，目前使用的去核方法是。②表示。
(3) 回答下列关于利用单克隆抗体技术制备抗蛇毒素的相关问题：

①B淋巴细胞不能直接用于抗体的大规模生产，原因是，将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合；通过（答三种）等方式诱导细胞融合，可以获得杂交瘤细胞。

②体外培养杂交瘤细胞时，除了无菌、营养条件、适宜的温度和pH，还需要保证气体环境，其中需要的气体主要有O2和CO2 ， O2是所必需的，CO2的作用是。
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