1. 某生物兴趣小组从资料上获知:二氯二乙胺能阻止参与DNA复制的酶与DNA的相互作用。他们推测,二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖,可作为一种癌症的化疗药物,并就此问题设计实验进行了探究。

实验材料:肝部长有肿瘤的小鼠,二氯二乙胺溶液,蒸馏水,生理盐水,含有全部营养物质的细胞培养液,显微镜,血细胞计数板,试管,吸管,培养皿等。

(1) 其中某位同学实验操作如下:(请将实验内容补充完整)

a、取洁净的培养皿一个,加入适量的培养液,从小鼠肝部切取肿瘤组织,剪碎,并用处理,使其分散开来,配制成,将其均匀分成5份,置于5个培养皿中并编号。

b、取洁净的试管5支,加入等量的培养液,编号1、2、3、4、5,并在1-4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液,5号试管中加入,作为对照组。

c、将步骤b中配制的溶液分别置于5个培养皿中,摇匀后,在冰箱中培养一段时间。

d、取出5个培养皿,振荡摇匀后,分别吸取适量的培养液,用血细胞计数板在显微镜下观察计数并记录。

(2) 请纠正该同学操作中的一处明显错误:
(3) 另一位同学按照正确的方法进行实验,得到的结果如图所示。

①在该实验中,自变量是

②根据实验结果,你能得出的结论是

【考点】
动物细胞培养技术;
【答案】

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3. H18杂交瘤细胞在培养过程中的凋亡现象制约着其生产能力的提高。通过基因工程可能高 H18杂交瘤细胞的抗凋亡能力,相关步骤如下:

①细胞培养。将人肝癌细胞在含10%小牛血清的培养液中培养,一段时间后,用胰脂血浆处理培养液,漂洗后调整细胞悬液浓度为1×107个·mL

②免疫小鼠。向小鼠体内注射肝癌细胞悬液0.8mL,以后每隔2周免疫1次,其免疫2次,最后1次免疫后3天,取脾脏制成细胞悬液备用.

③细胞融合及筛选。将脾脏细胞悬液和骨髓瘤细胞悬液在5g*PEJ 作用下进行降温等选出能产生抗人肝癌的单克隆抗体IIAb18的II18杂交瘤细胞。

④改造H18杂交瘤细胞。利用PCR 技术获得小鼠的母     婴 基因(抗凋亡基因)达载体,通过脂质体法将其导入Ⅱ18杂交瘤细胞中,再筛选出抗调!.能力明显提高出E中杂交瘤细胞。请分析回答:

(1) 步骤①中肝癌细胞合成培养液中特有的成分是,培养液中还需加入一定量抗生素的目的是
(2) 步骤②中,肝癌细胞免疫小鼠需在一定时间内间隔注射3次,其目的是
(3) 步骤③中,除了用50%PEG促进细胞融合外,常用的生物诱导因素是,物理诱导方法是。步骤④中通过脂质体法将表达载体导入 H18杂交瘤细胞的过程依赖的原理是
(4) 与普通抗肝癌药物相比,用抗人肝癌单克隆抗体 HAb18与相应抗癌药物结合制成的“生物导弹”治疗肝癌的主要优点是
(5) 乙醇有诱导细胞凋亡的作用。为了建立H18杂交瘤细胞凋亡检测模型,科研人员利用不同浓度的乙醇溶液诱导 H18杂交瘤细胞凋亡,其结果如图所示:

抗凋亡细胞株的建立与筛选应选择的诱导条件是(用图中字母表示)。

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