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1. 为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。回答下列问题：

(1) 图述实验前为了诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞，必须给小鼠甲，并从小鼠的中得到能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞。
(2) 在进行骨髓瘤细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，并将它们置于（填“95%氧气“或“95%空气”）和5%CO2气体的CO2培养箱，CO2的主要作用是。
(3) 诱导动物细胞融合的常用方法有（写出一种即可）。
(4) 为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于，使用该培养基进行细胞培养的结果是。图中筛选2含多次筛选，原因是，筛选所依据的基本原理是。
【考点】
动物细胞培养技术;
【答案】

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实验探究题 普通
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真题演练
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1. Graves病（GD）可导致甲状腺功能亢进。研究发现GD患者甲状腺细胞表面表达了大量细胞间粘附分子1（ICAM-1），导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体，对治疗GD进行了相关研究。
(1) 科研人员用对小鼠M进行间隔多次免疫，实验用骨髓瘤细胞需置于CO2培养箱中37℃恒温培养，CO2的主要作用是。融合前将部分骨髓瘤细胞置于特定的选择培养基中培养，以检测培养基的选择效果，若培养基符合实验要求，一段时间后培养基中（填“有”或“无”）骨髓瘤细胞生长。
(2) 取小鼠M的脾脏细胞制备成细胞悬液，采用PEG融合法与实验用骨髓瘤细胞进行融合，然后利用上述选择培养基筛选得到细胞，再将获得的上述细胞在多孔培养板上进行克隆化培养并用ICAM-1检测，从中选择出抗体检测呈的细胞，植入小鼠腹腔中，一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。
(3) 若进一步比较实验用抗体对GD模型小鼠（患GD）的治疗作用，可将若干GD模型小鼠均分为A、B、C三组，下表中C组应填的内容是，设置B组的目的是。

对照组（A）

131I治疗组（B）

单克隆抗体治疗组（C）

给GD模型小鼠腹腔注射0.1mL无菌生理盐水

给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1mL无菌生理盐水的131I

给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1mL无菌生理盐水的
实验探究题 普通
2. 某生物兴趣小组从资料上获知：二氯二乙胺能阻止参与DNA复制的酶与DNA的相互作用。他们推测，二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖，可作为一种癌症的化疗药物，并就此问题设计实验进行了探究。

实验材料：肝部长有肿瘤的小鼠，二氯二乙胺溶液，蒸馏水，生理盐水，含有全部营养物质的细胞培养液，显微镜，血细胞计数板，试管，吸管，培养皿等。

(1) 其中某位同学实验操作如下：（请将实验内容补充完整）

a、取洁净的培养皿一个，加入适量的培养液，从小鼠肝部切取肿瘤组织，剪碎，并用处理，使其分散开来，配制成，将其均匀分成5份，置于5个培养皿中并编号。

b、取洁净的试管5支，加入等量的培养液，编号1、2、3、4、5，并在1-4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液，5号试管中加入，作为对照组。

c、将步骤b中配制的溶液分别置于5个培养皿中，摇匀后，在冰箱中培养一段时间。

d、取出5个培养皿，振荡摇匀后，分别吸取适量的培养液，用血细胞计数板在显微镜下观察计数并记录。
(2) 请纠正该同学操作中的一处明显错误：。
(3) 另一位同学按照正确的方法进行实验，得到的结果如图所示。

①在该实验中，自变量是。

②根据实验结果，你能得出的结论是。
实验探究题 普通
3. H18杂交瘤细胞在培养过程中的凋亡现象制约着其生产能力的提高。通过基因工程可能高 H18杂交瘤细胞的抗凋亡能力，相关步骤如下：

①细胞培养。将人肝癌细胞在含10%小牛血清的培养液中培养，一段时间后，用胰脂血浆处理培养液，漂洗后调整细胞悬液浓度为1×107个·mL

②免疫小鼠。向小鼠体内注射肝癌细胞悬液0.8mL，以后每隔2周免疫1次，其免疫2次，最后1次免疫后3天，取脾脏制成细胞悬液备用.

③细胞融合及筛选。将脾脏细胞悬液和骨髓瘤细胞悬液在5g*PEJ 作用下进行降温等选出能产生抗人肝癌的单克隆抗体IIAb18的II18杂交瘤细胞。

④改造H18杂交瘤细胞。利用PCR 技术获得小鼠的母     婴 基因(抗凋亡基因)达载体，通过脂质体法将其导入Ⅱ18杂交瘤细胞中，再筛选出抗调！.能力明显提高出E中杂交瘤细胞。请分析回答：

(1) 步骤①中肝癌细胞合成培养液中特有的成分是，培养液中还需加入一定量抗生素的目的是。
(2) 步骤②中，肝癌细胞免疫小鼠需在一定时间内间隔注射3次，其目的是。
(3) 步骤③中，除了用50%PEG促进细胞融合外，常用的生物诱导因素是，物理诱导方法是。步骤④中通过脂质体法将表达载体导入 H18杂交瘤细胞的过程依赖的原理是。
(4) 与普通抗肝癌药物相比，用抗人肝癌单克隆抗体 HAb18与相应抗癌药物结合制成的“生物导弹”治疗肝癌的主要优点是。
(5) 乙醇有诱导细胞凋亡的作用。为了建立H18杂交瘤细胞凋亡检测模型，科研人员利用不同浓度的乙醇溶液诱导 H18杂交瘤细胞凋亡，其结果如图所示：

抗凋亡细胞株的建立与筛选应选择的诱导条件是(用图中字母表示)。
实验探究题 普通