尿素是一种高浓度氮肥，被土壤中某些细菌分解为氨后，可以被植物吸收利用。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中的活菌数目，培养基配方如下表所示。回答下列问题：KH2PO4Na2HPO4MgSO4.7H2O1.4g2.1g0.2g蛋白胨葡萄糖尿素琼脂1.0g10.0g1.0g15.0g

1. 尿素是一种高浓度氮肥，被土壤中某些细菌分解为氨后，可以被植物吸收利用。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中的活菌数目，培养基配方如下表所示。回答下列问题：

KH₂PO₄	Na₂HPO₄	MgSO_4.7H₂O
1.4g	2.1g	0.2g
蛋白胨	葡萄糖	尿素	琼脂
1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

(1) 根据培养基的成分分析，该同学（填“能”或“不能”）分离出土壤中分解尿素的细菌，原因是。在接种前需要检测培养基灭菌是否彻底，常用的检测方法是。

(2) 某同学在分离纯化土壤中分解尿素的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是，为避免此种现象发生，正确的操作方法是。

(3) 尿素分解菌因为能合成，从而能将尿素分解成CO₂和。

【考点】

尿素分解菌的分离与计数;

【答案】

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综合题普通

1. 利用下表所示配方制备的培养基可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。回答下列问题。

成分	KH₂PO₄	Na₂HPO₄	MgSO₄·7H₂O	葡萄糖	尿素	琼脂	H₂O
含量	1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0	15.0	定容至1000mL

(1) 根据物理形态划分，该培养基是，判断依据是。该配方中尿素主要作为。

(2) 利用该配方表制备培养基的具体操作步骤是：配制培养基→（用“→”和文字表示）。

(3) 在分离纯化微生物时，若要统计细菌数量，接种方法宜采用，该过程所用接种工具常用的灭菌操作是将该接种工具浸在酒精中，然后放在。

综合题普通

2. 下图是从土壤中筛选细菌的过程。请回答下列问题：

(1) 土壤中存在能分解尿素的细菌，这些细菌中的脲酶催化尿素分解成。因此，图中选择培养基应以尿素为微生物营养中唯一氮源。鉴别培养基还需添加作指示剂。

(2) 在向培养基接种土壤稀释液中微生物时，最常用的方法是和。

(3) 若在3个细菌培养基平板上均接种稀释倍数为10⁵的土壤样品0.1mL，培养一段时间，平板上菌落数分别为35个、33个、34个，则可推测每克土壤样品中的细菌数为个。运用这种方法统计的结果往往较实际值（填“偏大”或“偏小”），原因是。

综合题普通

3. 如表所示甲、乙分别是分离两种土壤中微生物的培养基的配方，图丙所示为相关分离过程，回答下列问题：

KH₂PO₄	1.4 g	纤维素粉	5.0 g
Na₂HPO₄	2.1 g	NaNO₃	1.0 g
MgSO₄·7H₂O	0.2 g	Na₂HPO₄	1.2 g
葡萄糖	10.0 g	KH₂PO₄	0.9 g
尿素	1.0 g	MgSO₄·7H₂O	0.5 g
琼脂	15.0 g	KCl	0.5 g
		酵母膏	0.5 g
		水解酪素	0.5 g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000 mL
甲		乙

注：水解酪素，即水解酪蛋白，由酪蛋白水解得到。

(1) 从功能上看，甲培养基属于。从物理性质上看，甲培养基属于。其中提供氮源的物质是。

(2) 如果将乙培养基配制成固体培养基，则在该培养基上长出的菌落是否都能分解纤维素？。如果培养基中加入可以筛选出具有分解纤维素能力的菌株，同时透明圈越(填“大”或“小”)，表示该菌分解纤维素的能力越强。

(3) 为了计数微生物的数量，图丙采用法进行接种培养计数，除此之外，还可以采用法进行计数。其中前一种计数方法所得结果要比后一种计数方法所得结果(填“大”或“小”)。

(4) 用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目(填“少”或“多”)，原因是。

(5) 一位同学利用图丙的方法步骤在4个平板培养基上分别接种0.1 mL土壤稀释液④，培养后菌落数分别为180、155、176、129个，则1 mL原土壤样液①中微生物数量约为。

综合题普通