豆科植物紫花苜蓿产草量高，含丰富的动物必需氨基酸，被誉为“牧草之王”。某地盐碱胁迫影响了紫花苜蓿的生长发育，科研人员从紫花苜蓿根瘤中筛选分离耐盐碱的根瘤菌的主要流程如图所示，其中序号代表相应的步骤。回答下列问题：

1. 豆科植物紫花苜蓿产草量高，含丰富的动物必需氨基酸，被誉为“牧草之王”。某地盐碱胁迫影响了紫花苜蓿的生长发育，科研人员从紫花苜蓿根瘤中筛选分离耐盐碱的根瘤菌的主要流程如图所示，其中序号代表相应的步骤。回答下列问题：

(1) 实验称取的1g根瘤（填“能”或“不能”）进行灭菌处理。上述实验过程中用到的接种方法是。科研人员发现从盐碱地紫花苜蓿根瘤中成功筛选分离出耐盐碱的根瘤菌的概率更高，主要原因是。

(2) YMA培养基可以用于培养、分离和计数根瘤菌，步骤④中还需要同时培养一个平板做对照，以确定YMA培养基未被杂菌污染。若图中YMA培养基培养后分别长出了165、169、161个菌落，则该样本中每克根瘤中约含根瘤菌个。

(3) Ashby培养基也称阿须贝氏无氮培养基，Ashby培养基中应含有等基本营养物质。与YMA培养基相比，改良的Ashby培养基中的含量应更高，以更好实现筛选耐盐根瘤菌的实验目的。

【考点】

微生物的分离和培养; 测定某种微生物的数量;

【答案】

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综合题普通

1. “民以食为天，食以安为先”，食品安全关系千家万户，食用变质食物、细菌污染的食物都会对人体健康造成严重危害。生物兴趣小组对某网红美食中的细菌数进行调查，如图是食物样品中细菌培养的简化流程。回答下列问题：

(1) 制备培养基时需添加等营养物质，配制好的培养基要用法灭菌。

(2) 本实验所用的接种方法为法，出现图B所示现象的原因是。纯化培养时将单个微生物分散在固体培养基上，除上述方法外还有法，这两种方法均可获得单菌落。

(3) 运用本实验方法计数的结果往往较实际值偏，原因是。

(4) 生物兴趣小组统计得到不同稀释倍数下培养基上的菌落数如下表所示，表中稀释倍数为时适合计数，该稀释倍数下统计得到的数值计算得到的原培养液每毫升含有的细菌数是个。根据以上数据给出的食用建议是。

培养基	不同稀释度平均菌落数/个
培养基	10¹	10²	10³
1	765	98	20
2	760	85	46
3	890	93	26

综合题普通

2. 磷是植物生长的重要元素，施入土中的磷大多数与Ca²⁺等离子结合形成难溶性磷酸盐。科研人员从贡柑果园土中选出可以将难溶性或不溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌，主要流程见下图，请回答下列问题：

(1) 步骤③将土壤悬浮液稀释了倍。经步骤③最后一次稀释之后若在3个平板上分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，得到的结果是：39、38、37，则每克土样中的活菌数为个。运用这种方法统计的结果往往较实际值，原因是。

(2) 步骤④中待菌落长好后挑出溶磷圈直径（D）与菌落直径（d）比值较的菌落。

(3) 要判断选择培养基是否起到了选择作用，需要设置作为对照。

(4) 为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基中，并在37℃、200r·min^-1摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到如图所示曲线。

用摇床进行培养的好处、。

图示结果表明最优良的解磷菌株是。

综合题普通

3. 红曲色素是广泛应用于食品等行业的天然色素，主要通过红曲霉菌发酵生产。现有商业菌株生产红曲色素能力低，且会产生对动物肾脏、肝脏有毒害的桔青霉素。科研人员拟获得优质红曲霉菌。

(1) 将待选菌样品接种到含大米研磨液的液体培养基中，扩大培养2 天后进行，依次分别涂布于固体培养基上培养，通过观察特征对菌种进行初步鉴定。

(2) 以菌株为对照进行发酵指标的比较，初步筛选出3种菌株。选取4种大米为基质进行发酵，结束后检测相应物质的含量，结果如图1。

应选择作为目标菌株进行后续生产研究。

(3) 氮源种类及发酵温度对所选红曲霉菌代谢产物合成的影响如图2所示。

根据所有研究结果，依次写出红曲色素发酵罐中优选的碳源、氮源及控制的温度条件。

综合题普通