1.
科研人员研究调控蔗糖转移酶基因（SUC2）的两种蛋白质Snf1和Snf2之间的相互作用的原理如下：真核细胞起始基因转录需要有转录激活因子的参与。酵母转录因子GAL4在结构上是组件式的，由DNA结构功能域（BD）和转录激活结构域（AD）组成。两个结构域分开时不能激活转录，只有当两者空间上接近时，才具有GAL4转录因子活性。BD与基因上游激活序列UAS结合后，激活AD与启动子结合，使启动子下游基因转录。图1为研究相互作用的X蛋白和Y蛋白的机制模式图。回答下列问题：
(1)
操作中，需要用酶将目的基因分别插入酵母表达载体中，得到两种融合表达载体（如图2）。酶切时通常选用两种不同的酶，这样做的目的是。
(2)
酵母染色体上能被GAL4激活转录、显示两种蛋白质相互作用的基因称为报告基因。若用AUR1—C（抗生素AbA抗性基因）和HIS3（组氨酸合成基因）作为报告基因，那么作为被转化的酵母细胞在抗生素抗性和营养需求上应满足的条件是。转化后需要在添加的培养基上培养筛选。除此之外，还要将酵母的GAL4基因敲除，原因是。
(3)
LacZ基因编码产生的β—半乳糖苷酶可以分解X—gal产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色；否则菌落为白色。科研人员采用LacZ作为报告基因，根据上述原理，验证了蛋白质Snf1和Snf2之间存在相互作用。写出实验思路并预期结果及推论：。
【考点】
基因工程的操作程序（详细）;
能力提升
真题演练
