1.
牛和羊的瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解尿素。某研究小组欲从瘤胃内筛选出能高效降解尿素的细菌，设计了如下实验。
I.取样：从刚宰杀的牛的瘤胃中取样，将样品装入事先灭过菌的锥形瓶中。
Ⅱ.培养基的配制和灭菌：
配制全营养LB固体培养基。配方：水、蛋白胨， 酵母提取物，NaCl，琼脂糖。（备注：琼脂糖是一种链状多糖，35—40℃时形成半固体状凝胶，90℃以上溶解；琼脂主要成分为琼脂糖和果胶，还有少量含氮化合物等）
配制尿素固体培养基。配方：水、葡萄糖，NaCl，K2HPO4 ， 尿素，酚红，琼脂糖。（备注：酚红是一种酸碱指示剂，在酸性时呈黄色，碱性时呈红色。）
Ⅲ.制备瘤胃稀释液如图并接种。
Ⅳ.在无氧条件下进行微生物的培养、观察与计数。
回答下列问题：
(1)
尿素固体培养基需用琼脂糖做凝固剂而不用琼脂的原因是。
(2)
尿素培养基中加酚红的原因是以尿素为氮源的微生物培养一段时间后，由于细菌产生的向周围扩散，将培养基中的尿素分解，产生的使培养基中的酚红由黄色变成红色。
(3)
该小组采用稀释涂布平板法对瘤胃中分解尿素的细菌进行分离和计数。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板（2种平板）先行培养了一段时间，这样做的目的是。经适当培养，每隔24h统计一次菌落数目。为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数，将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计具有红色环带的菌落数，结果如下表，其中号试管的稀释倍数比较合适（请从上图中1—5号试管中选择填写）。
(4)
接下来，该小组对周围红色区域（填“大”或“小”）的菌落进行平板划线法纯化和分离，以便获得单菌落。操作时，接种环通过方法灭菌。在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是。
稀释倍数 | 1×103 | 1×104 | 1×105 | 1×106 | 1×107 |
菌落数 | >500 | 367 | 248 | 36 | 18 |
【考点】
微生物的分离和培养;
培养基对微生物的选择作用;
尿素分解菌的分离与计数;
能力提升
