下列关于小鼠成纤维细胞的培养过程及原理的叙述正确的是（）

1. 从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。下列叙述正确的是（）

A. 传代培养时，培养皿需密封防止污染 B. 选取①的细胞进行传代培养比②更合理 C. 直接用离心法收集细胞进行传代培养 D. 细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关

单选题普通

2. 某动物细胞培养过程中，细胞贴壁生长至接触抑制时，需分装培养，实验操作过程如图。

下列叙述错误的是（）

A. ①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离 B. ②加培养液的目的是促进细胞增殖 C. ③分装时需调整到合适的细胞密度 D. 整个过程需要在无菌、无毒条件下进行

单选题普通

3. 为探究H基因对肿瘤细胞M增殖能力的影响，分别将H基因和突变h基因过量表达的细胞M在含琼脂的半固体培养基中培养，检测细胞克隆（由单个细胞分裂形成的肉眼可见的细胞群）数量如下表，作为判断肿瘤细胞恶性程度的指标之一。下列叙述错误的是（）

	①	②	③	④
10%血清	-	+	+	+
H基因	-	-	+	-
突变h基因	-	-	-	+
细胞克隆数量（个）	5	9	15	27

注：“+”表示加入或过量表达；“-”表示未加入或无表达

A. 血清为细胞M的生长增殖提供了营养物质等天然成分 B. 克隆间相互离散，能有效避免克隆内细胞的接触抑制 C. H基因过量表达导致克隆数增加，说明其不是抑癌基因 D. 突变h基因过量表达，容易引起细胞M在体内分散和转移

单选题普通

1. 我国研究人员创造出一种新型干细胞——异种杂合二倍体胚胎干细胞，具体研究过程如下图所示，下列叙述正确的是（）

A. 单倍体囊胚1最可能是由卵子发育而来的，单倍体ES应取自囊胚的内细胞团 B. 培养液中除了需要加入血清等营养物质，还需要加入抗生素等消灭病毒 C. 体外培养条件下ES细胞可以增殖而不发生分化 D. ES细胞在形态上表现为体积大、细胞核小、核仁明显

多选题普通

2. 图是某动物细胞培养时，培养液中活细胞和死亡细胞密度统计结果．相关叙述正确的是（）

A. 实验中要控制胰蛋白酶溶液浓度和处理时间，以免损伤细胞 B. 培养液中应适当加入青霉素、链霉素，以避免杂菌污染 C. 曲线bc段产生的主要原因是培养液中营养物质不足及有害代谢产物积累等 D. 培养第6天时，新产生的细胞数等于死亡细胞数

多选题普通

3. 研究发现，胰腺癌的发生及恶性发展与端粒酶活性高有关．为寻找抑制胰腺癌细胞增殖存活偶的有效途径，研究人员针对人端粒酶RNA（hTR）序列（5′﹣CCUAAC﹣3′）合成3种寡核苷酸：PS﹣ODN1、PS﹣ODN2和PS﹣ODN3．分别将3种寡核苷酸加入胰腺癌P3细胞和人成纤维细胞培养液中，在相同且适宜条件下培养一段时间后，测定细胞存活率和P3细胞端粒酶活性，记过如下表．表PS﹣ODN处理后细胞存活率和端粒酶活性

	序列	成纤维细胞存活率%	P3细胞存活率%	P3细胞端粒酶相对活性
PS﹣ODN1	5′﹣GTTAGG﹣3′	103.04	33.34	0.28
PS﹣ODN2	5′﹣CCTAAC﹣3′	95.36	81.37	0.97
PS﹣ODN3	5′﹣AACTCC﹣3′	106.4	91.54	0.95

请回答问题：

（1）癌细胞表面减少，导致其极易在体内扩散．部分胰腺癌患者出现血糖升高的症状，其原因是

（2）将胰腺癌P3细胞和人皮肤成纤维细胞培养在含有等营养物质（答出两种即可）的培养液中，培养过程中需充入5%CO₂ ，其目的是

（3）测定细胞存活率时以的培养液中的细胞数量为100%．有表中数据可知，可引起P3细胞存活率明显下降，其原因是寡核苷酸序列可以与hTR序列，从而降低端粒酶的活性．

（4）PS﹣ODN序列对成纤维细胞的存活率无显著影响，是因为

填空题普通

1. 干细胞在再生医学领域有巨大的应用前景，如骨髓移植，神经损伤性疾病、肌萎缩症、阿尔茨海默综合症等疾病的治疗方面。2022年8月日本东京医科齿科大学进行了将可分化为软骨的滑膜干细胞进行移植，实现半月板再生的实验。移植手术流程如下图，请回答下列问题：

(1) 采集滑膜时，最好采集患者自体的组织，这是因为在后期进行干细胞移植后。进行滑膜干细胞培养时，需要用酶将采集到的滑膜组织块分散成单个细胞，然后用培养液将分散的细胞稀释制成后放入培养瓶内进行培养，培养瓶中的细胞进行有丝分裂，数量不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的。

(2) 滑膜干细胞培养所用的培养基是合成培养基，通常需加入等天然成分。细胞培养所需的气体主要有O₂和CO₂ ，其中O₂的主要作用是。

(3) 最典型的干细胞为胚胎干细胞，是由分离出来的一类细胞。然而，科学家还可以通过体外诱导来获得类似胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞。诱导多能干细胞比胚胎干细胞更有应用前景，理由是。

综合题普通

2. 一种杂交瘤细胞只能产生一种抗体，将两株不同杂交瘤细胞融合形成双杂交瘤细胞，双杂交瘤细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖，可以产生双特异性抗体。长春花所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。图1是科研人员通过免疫的B淋巴细胞和杂交骨髓瘤细胞杂交技术生产双特异性抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图示。回答下列问题。

(1) 据图1分析，双特异性抗体生产过程中，应先将分别注射到小鼠体内，一段时间后获取小鼠脾脏并用酶进行处理分离出B淋巴细胞。诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合时，常用的方法有。双杂交瘤细胞在进行传代培养前，（填“需要”或“不需要”）上述酶处理。

(2) HAT培养基可用于杂交瘤细胞的筛选，其中含有次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷3种关键成分。哺乳动物的DNA合成有D和S两条途径，氨基蝶呤可阻断D途径。S途径需要HGPRT和TK两种酶的参与，以催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷用于DNA合成。骨髓瘤细胞是人工筛选的缺乏HGPRT和TK基因。上述培养基上细胞能生长并大量增殖，原因是。

(3) 过程④的作用是对经过程③选择培养的杂交瘤细胞进行，筛选出足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

(4) 抗体都是由两条H链和两条L链组成的4条肽链对称结构，据图2分析，双杂交瘤细胞在理论上会产生多种抗体，原因是。

实验探究题普通

3. 癌症的免疫疗法是指重新激活抗肿瘤的免疫细胞，进而克服肿瘤的免疫逃逸。某些种类癌细胞表面有高表达的银蛋白PSMA，CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。图甲为科研人员尝试构建的双特异性抗体PSMA×CD28生产流程图；图乙为双特异性抗体PSMA×CD28的结构及作用机理图，请据图分析：

(1) 图甲分析可知，制备双特异性抗体PSMA×CD28的过程中，用到的动物细胞工程技术主要有（答出2点）。

(2) 双特异性抗体PSMA×CD28制备时，应先将（物质X）分别注射到小鼠体内再分离出B淋巴细胞。与诱导植物原生质体融合不同的是可用的诱导方法。将第一次筛选获得的细胞进行多倍稀释，借助多孔细胞培养板，利用原理进行第二次筛选，选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。

(3) 抗体都是由两条H链和两条L链组成的4条肽链对称结构。由于融合细胞会表达出两种L链和两种H链且L链和H链又能随机组合，因此杂交瘤细胞A×B会产生（填“一种”或“多种”）抗体。双特异性抗体PSMA×CD28协助杀伤癌细胞的机理是。

综合题普通

1. 航天员叶光富和王亚平在天宫课堂上展示了培养的心肌细胞跳动的视频。下列相关叙述正确的是（）

A. 培养心肌细胞的器具和试剂都要先进行高压蒸汽灭菌 B. 培养心肌细胞的时候既需要氧气也需要二氧化碳 C. 心肌细胞在培养容器中通过有丝分裂不断增殖 D. 心肌细胞在神经细胞发出的神经冲动的支配下跳动

单选题普通

2. 某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究，结果发现其培养的原代神经元生长缓慢，其原因不可能的是（　　）

A. 实验材料取自小鼠胚胎的脑组织 B. 为了防止污染将培养瓶瓶口密封 C. 血清经过高温处理后加入培养基 D. 所使用的培养基呈弱酸性

单选题普通

3. 灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是（　　）

A. 动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行 B. 微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染 C. 为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌 D. 可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌

单选题普通