1. 研究发现,胰腺癌的发生及恶性发展与端粒酶活性高有关.为寻找抑制胰腺癌细胞增殖存活偶的有效途径,研究人员针对人端粒酶RNA(hTR)序列(5′﹣CCUAAC﹣3′)合成3种寡核苷酸:PS﹣ODN1、PS﹣ODN2和PS﹣ODN3.分别将3种寡核苷酸加入胰腺癌P3细胞和人成纤维细胞培养液中,在相同且适宜条件下培养一段时间后,测定细胞存活率和P3细胞端粒酶活性,记过如下表.表PS﹣ODN处理后细胞存活率和端粒酶活性

 

序列

成纤维细胞存活率%

P3细胞存活率%

P3细胞端粒酶相对活性

PS﹣ODN1

5′﹣GTTAGG﹣3′

103.04

33.34

0.28

PS﹣ODN2

5′﹣CCTAAC﹣3′

95.36

81.37

0.97

PS﹣ODN3

5′﹣AACTCC﹣3′

106.4

91.54

0.95

请回答问题:

(1)癌细胞表面 减少,导致其极易在体内扩散.部分胰腺癌患者出现血糖升高的症状,其原因是 

(2)将胰腺癌P3细胞和人皮肤成纤维细胞培养在含有 等营养物质(答出两种即可)的培养液中,培养过程中需充入5%CO2 , 其目的是 

(3)测定细胞存活率时以 的培养液中的细胞数量为100%.有表中数据可知, 可引起P3细胞存活率明显下降,其原因是寡核苷酸序列可以与hTR序列 , 从而降低端粒酶的活性.

(4)PS﹣ODN序列对成纤维细胞的存活率无显著影响,是因为

【考点】
动物细胞培养技术;
【答案】

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1.

有同学从资料上获知:二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用,由此推测:二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖,可作为一种癌症的化疗药物,并就此问题设计实验进行了探究.以下为该同学设计的实验方案:

(一)实验材料:

肝部长有肿瘤的小鼠,二氯二乙胺溶液,蒸馏水,生理盐水,含有全部营养物质的细胞培养液,显微镜,试管,吸管等.

(二)实验步骤:

①取洁净的培养皿一个,加入适量的培养液.

②从小鼠肝部切取肿瘤组织并将其剪碎,利用某种酶处理,使细胞分散开,置于培养皿中培养.

③取洁净的试管5支,加入等量培养液,编号1、2、3、4、5,在1﹣4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液,5号试管中加入等量生理盐水.

④分别从5支试管吸取适量的培养液,在显微镜下观察计数,记录数据.

⑤从培养皿中吸取等量的培养液置于1﹣5号试管中,振荡后,在冰箱中培养一段时间.

⑥从静置的5支试管中吸取适量的培养液,在显微镜下观察计数,记录数据.

(三)分析

(1)在该实验中,遵循了实验设计的哪些原则? (至少写出2个).

(2)第②步中所用的“某种酶”是指 酶.上述细胞培养液中必需包含细胞生长所需的营养物质,如: (至少写出3种)等.在第④步和第⑥步中,除题目中所给出的实验器材之外,还有一件必需的实验器材是 .

(3)请指出并纠正上面这位同学在第⑤步和第⑥步的操作上的错误:

第⑤步: ;

第⑥步: .

(4)该学生根据修改后的正确方法进行实验,得到的结果如下:

实验组别

1

2

3

4

5

二氯二乙胺浓度(mg/mL)

0.1

0.2

0.3

0.4

0

培养前细胞数目(个/mL)

350

363

342

335

336

培养后细胞数目(个/mL)

320

275

186

96

560

根据实验结果,你能得出的结论是: .

(5)请根据上述实验结果,绘出培养后细胞数目的折线图.

 .

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