干细胞在再生医学领域有巨大的应用前景，如骨髓移植，神经损伤性疾病、肌萎缩症、阿尔茨海默综合症等疾病的治疗方面。2022年8月日本东京医科齿科大学进行了将可分化为软骨的滑膜干细胞进行移植，实现半月板再生的实验。移植手术流程如下图，请回答下列问题：

1. 干细胞在再生医学领域有巨大的应用前景，如骨髓移植，神经损伤性疾病、肌萎缩症、阿尔茨海默综合症等疾病的治疗方面。2022年8月日本东京医科齿科大学进行了将可分化为软骨的滑膜干细胞进行移植，实现半月板再生的实验。移植手术流程如下图，请回答下列问题：

(1) 采集滑膜时，最好采集患者自体的组织，这是因为在后期进行干细胞移植后。进行滑膜干细胞培养时，需要用酶将采集到的滑膜组织块分散成单个细胞，然后用培养液将分散的细胞稀释制成后放入培养瓶内进行培养，培养瓶中的细胞进行有丝分裂，数量不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的。

(2) 滑膜干细胞培养所用的培养基是合成培养基，通常需加入等天然成分。细胞培养所需的气体主要有O₂和CO₂ ，其中O₂的主要作用是。

(3) 最典型的干细胞为胚胎干细胞，是由分离出来的一类细胞。然而，科学家还可以通过体外诱导来获得类似胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞。诱导多能干细胞比胚胎干细胞更有应用前景，理由是。

【考点】

动物细胞培养技术; 胚胎干细胞及其应用;

【答案】

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综合题普通

1. 人体心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（eTnT）、肌钙蛋白1（cTnl）和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTnl在血液中的含量上升可作为心肌损伤的特异性指标。为制备出抗cTnl的单克隆抗体，研究人员完成了以下实验。请据图回答下列问题：

(1) 动物细胞培养时，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体条件为与5%CO₂的混合气体。为了防止培养细胞时有害代谢物的积累，可采用的方法，以清除代谢物。

(2) 以cTnl作为抗原进行注射，引起小鼠产生免疫反应，经细胞诱导融合，甲、乙、丙中只含杂交瘤细胞的是；诱导动物细胞融合的常用方法有：（写出两种）。

(3) 图示过程中的②表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行，之后稀释、培养、再检测，多次重复上述操作，其目的是筛选获得的杂交瘤细胞。

(4) 为进一步降低鼠源性单克隆抗体诱发的免疫反应，研究人员通过蛋白质工程对单克隆抗体进行人工改造，通过将“嫁接”到人的抗体上，获得嵌合抗体。

综合题普通

2. 在肿瘤患者的治疗中，被动免疫治疗是指被动地将具有抗肿瘤活性的免疫制剂或细胞回输给肿瘤患者机体进行治疗，该治疗方案适用于肿瘤晚期患者，主要分为单克隆抗体治疗和过继性细胞治疗两类，其中过继性细胞治疗相关过程如图所示。回答下列问题：

(1) 在单克隆抗体治疗中，为了获取能产生抗肿瘤细胞的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。筛选所用的培养基属于培养基（按功能），筛选出来的杂交瘤细胞进行和才可以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

(2) 科学家将细胞毒素与单克隆抗体结合，制成了抗体—药物偶联物（ADC），ADC通常由三部分组成，其中抗体的作用是。

(3) 过继性细胞治疗中，从肿瘤患者体内获取的免疫细胞置于适宜环境下培养，培养过程中会出现分裂受阻，其原因主要有（答出2点），培养过程中出现接触抑制现象时，可用酶处理贴壁细胞使之分散成单个细胞进行传代培养。

(4) 过继性细胞治疗能有效避免免疫排斥，其原因是。

综合题普通

3. 2018年1月25日报道，两只克隆猕猴“中中”和“华华”在中国诞生，突破了现有技术无法克隆灵长类动物的世界难题，将为阿尔茨海默症、自闭症等脑疾病带来前所未有的光明前景，图为过程流程图，请回答下列有关问题：

(1) 欲获得单个雌猕猴体细胞，可用酶处理动物组织块。动物细胞培养一般分为和传代培养两个阶段过程。在前一阶段，贴壁的细胞会出现现象，所以要进行传代培养。

(2) ①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至时期再进行，目前使用的去核方法是。②表示。

(3) A细胞的获得过程属于（有性/无性）生殖，在培养早期胚胎时，培养液中通常要添加等一些天然成分。

(4) 根据下图回答相关问题：

若上图表示动物细胞融合的过程，过程①区别于植物细胞常用的诱导剂是。

若上图表示制备单克隆抗体的部分过程，甲细胞为小鼠的骨髓瘤细胞，则乙细胞为。

综合题普通