1. 回答与高山兀鹫肠道微生物的分离鉴定与耐药性分析有关的问题:
(1) 细菌的分离与纯化。在无菌条件下,将高山兀鹫粪便样本,放入1 mL无菌水中,3000r /min离心5 min。取100μL,在无菌水中进行10倍梯度稀释,制成10-1至10-9梯度稀释液。分别吸取其中的不同梯度稀释液接种在LB琼脂和MRS琼脂培养基(乳酸细菌培养基)上。分别在有氧以及培养环境中,37℃培养24-48 h。然后挑取表征(颜色、大小、形状)不同的于LB肉汤和MRS肉汤中,分别在相应培养环境中37℃培养12 h。
(2) 药敏试验。采用药敏纸片琼脂扩散法,将特定的菌液均匀接种在琼脂培养基上,贴上34种药敏纸片。将贴有药敏纸片的培养基,放入培养箱中37℃培养16 h后测量直径,并依据抗菌药物敏感性试验的技术要求判定结果。以大肠埃希氏菌为质控菌株,若质控菌株的正常,则药敏试验的结果可靠。
(3) 当细菌长期处于含抗生素的生存环境时,在作用下,敏感菌株被抑制或杀灭,而天然耐药或获得性耐药菌株则继续生存、繁殖和克隆传播,进一步导致细菌的耐药性
【考点】
微生物的分离和培养;
【答案】

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2. 西花蓟马是一种对农作物危害性极大的害虫,球孢白僵菌是一种常见的虫生真菌。为了获得对西花蓟马高毒力、产孢子(该菌的繁殖体)能力强,且在继代培养过程中毒性较稳定的球孢白僵菌菌株,某研究小组开展了有关实验。回答下列问题:
(1) 欲获得球孢白僵菌,可从体内寻找,再通过毒性实验筛选出对西花蓟马高毒力的菌株。
(2) 将(1)中筛选得到的菌株,接种到CMA培养基(玉米粉20g·L-1、麦麸10g·L-1、蛋白胨5g·L-1、KH2PO4 3g·L-1、NH4NO3 1g·L-1、MgSO4·7H2O 1g·L-1、琼脂15g·L-1)上,可筛选出毒力高、产孢子能力强的菌株。该过程中常用的接种方法有
(3) 从物理性质上看,CMA培养基属于,该培养基中为球孢白僵菌提供碳源的成分有。通常,制备培养基时要根据所培养的微生物种类不同来调节培养基的pH,其原因是
(4) 为筛选出在继代培养过程中能使球抱白佩菌毒性较稳定的培养基,研究小组将(2)中筛选得到的菌株分别接种到3种培养基CMA、CMA +蝉蜕粉、CMA +西花蓟马尸粉)中,进行继代培养,用各代菌株分别处理西花蓟马,并统计其死亡率,结果如下表。

培养代数

第5天的校正累积死亡率(%)

CMA培养基

CMA+蝉蜕粉

CMA+西花蓟马尸粉培养基

1

93.62

89.36

93.62

2

89.36

91.49

93.62

3

74.47

93.62

93.62

4

78.72

93.62

97.87

5

65.96

87.23

93.62

分析表中结果,可得出的结论是。 为长期保存筛选得到的球孢白低菌优良菌种,可以采用的方法。

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