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1. 某研究所利用基因工程、胚胎工程等技术获得能产生人凝血因子的转基因山羊．回答下列问题：

（1）基因工程的基本操作流程中，当获取目的基因后，在将其中导入受体细胞前需要进行一个重要的操作步骤，即构建 ，该步骤使用的两种工具酶分别是 ．

（2）从公羊体内采集的精子需经过 处理，才能在体外与卵细胞结合形成受精卵．常用 法将目的基因导入受精卵中，受精卵在体外培养至 阶段时再移植到母羊子宫中．

（3）利用分子杂交技术可检测转基因山羊细胞中的人凝血因子是否转录出了 （填“tRNA”、“mRNA”或“rRNA”）；利用针对 的抗体进行抗原﹣抗体杂交，可检测目的基因是否翻译．

【考点】
基因工程的基本工具（详细）;
【答案】

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1.

回答利用农杆菌转化法培育转基因植物的相关问题：

（1）培育转基因植物过程的核心步骤是构建基因表达载体，其目的是使目的基因在受体细胞中 ， 并且可以通过复制遗传给下一代，同时，使目的基因表达和发挥作用．

（2）构建基因表达载体时，可利用DNA连接酶连接被限制酶切开的 键．

（3）组成基因表达载体的单体是 ．基因表达载体中的启动子是 识别和结合的部位，这种结合完成后才能驱动目的基因通过 （填过程）合成mRNA．

（4）用两种限制酶XbaI和SacI（两种酶切出的黏性末端不同）切割某DNA，获得含目的基因的片段．若利用该片段构建基因表达载体，应选用下图中的何种Ti质粒？ 

（5）将受体细胞培养成植株需要应用 技术，该技术的理论依据是
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2. 基因疫苗指的是DNA疫苗，是将编码外源性抗原的基因插入到含真核表达系统的质粒上，然后将质粒直接导人人或动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答．回答下列问题：

（1）要获得编码抗原的基因，首先要提取出病原体的DNA或RNA，并将RNA ，要大量获得表达特异抗原的基因，可采用 方法．

（2）将抗原基因插入质粒的过程，即构建基因表达载体的过程，通常一个基因表达载体的组成，除了抗原基因（目的基因）外，还有 

（3）一般将重组质粒利用的方法送人受体细胞，进入细胞核并表达抗原蛋白．

（4）与传统疫苗相比，基因疫苗不仅能在宿主体内较长时间存在，还可以诱导产生（填“体液免疫”“细胞免疫”或“体液免疫和细胞免疫”）．

（5）一个质粒载体可插入多个抗原基因组成多价疫苗，导人这样的疫苗可达到 的目的．

（6）基因疫苗是在基因治疗技术的基础上发展而来的．基因治疗是把 导入病人体内，使该基因表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的．
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