1.
聚羟基脂肪酸酯（PHA）是一种可降解的生物大分子，常用来制备环保塑料包装袋，研究人员通过构建受温度控制的大肠杆菌表达体系来生产PHA。为实现通过温度控制工程菌合成所需的蛋白质，科研人员利用下图方案，构建了相关的基因表达载体，然后将其导入大肠杆菌，获得相应的工程菌。
(1)
图1所示的基因表达载体中，RFP基因和GFP基因属于；启动子M和启动子R的类型虽然不同，但是二者都能与结合，启动基因的转录。
(2)
大肠杆菌在30℃和37℃均可生长和繁殖，据图1分析，当培养温度为30℃时，C基因编码的C蛋白形成二聚体，因而大肠杆菌表达荧光蛋白。
(3)
PHA的合成过程中，可由单体分子3HB和4HB随机聚合形成随机共聚物；也可以先合成3HB聚合体，再合成4HB聚合体，最后形成分段共聚物（如图2所示），其中分段共聚物形式的pHA品质更佳。请完善以下表格，通过改造上述方案以实现应用工程菌大规模生产优质PHA（不考虑各种酶在不同温度下的活性差异）。
操作 | 目的 |
对上述方案表达载体的改造为：①，并加入持续表达启动子连接的②基因。将构建好的表达载体导入大肠杆菌，获得工程菌。 | 获得可以合成PHA的工程菌。 |
以③为原料配置培养基，灭菌后加入上述工程菌。 | 配制培养基、接种。 |
控制发酵条件：30℃发酵12小时，随后切换至37℃发酵36小时。 | 发酵48小时，获得3HB 比例为④的分段共聚物。 |
【考点】
基因工程的操作程序（详细）;
基因工程综合;
能力提升
