1. 为寻找调控蛋白质分泌的相关途径,科研人员以酸性磷酸酶(P酶)为指标,筛选酵母蛋白质分泌突变株并进行研究。回答下列问题:
(1) 酵母菌合成分泌蛋白的过程中,初步合成的肽链与核糖体一起转移到上继续合成和加工,通过囊泡运输转移到中进一步修饰加工,再由囊泡运输与细胞膜融合后分泌到细胞外。
(2) 无磷酸盐培养液可促进酵母P酶的分泌,胞外P酶的量与其活性呈正相关。科研人员用化学诱变剂处理野生型酵母菌,筛选出蛋白质分泌异常的突变株secl,将野生型菌株和secl置于无磷酸盐培养液中,检测胞外P酶的活性,结果如图所示。

①向反应体系中加入等量的对硝基苯磷酸二钠作为底物,可通过检测来计算P酶的活性。为减少反应液pH变化造成的影响,解决措施是

②转入37℃条件下培养后,secl胞外P酶活性的变化趋势是,表现出分泌缺陷特征,表明secl是一种温度(填“敏感型”或“不敏感型”)突变株。

③转入37℃条件下培养1h,与野生型相比,secl中积累的由高尔基体形成的囊泡明显增多。将secl转回24℃条件下培养并加入蛋白合成抑制剂后,胞外P酶的活性增强。该步骤的目的是探究。secl胞外P酶活性增强的合理解释是

【考点】
细胞器之间的协调配合;
【答案】

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2. 研究发现,真核细胞质基质中游离的核糖体合成的蛋白质(或短肽),可以精准运送到内质网、线粒体、叶绿体、细胞核等结构。回答下列问题。
(1) 分泌蛋白的合成及分泌过程一般需要核糖体、内质网、高尔基体和等细胞器的参与。囊泡与细胞膜融合,将分泌蛋白分泌到细胞外,该过程依赖于膜的
(2) 科学家推测,在分泌蛋白的合成过程中,游离核糖体最初合成的一段氨基酸序列作为信号肽,被位于细胞质基质中的信号识别颗粒(SRP)识别,肽链合成暂停。携带着肽链与核糖体的SRP与内质网膜上的SRP受体(DP)结合,核糖体附着于内质网上,继续合成肽链。这就是信号肽假说,如下图所示。

   

科学家构建了体外的反应体系,证明了该假说。实验分组见表,据材料分析回答以下问题。

实验组别

核糖体

信号识别颗粒(SRP)

内质网

实验结果

l

+

合成的肽链比正常肽链多一段

2

+

+

合成的肽链比正常肽链少一段

3

+

+

+

合成的肽链与正常肽链一致

注:“+’’ 和 “-’’分别代表反应体系中存在或不存在该结构

①假设在合成新生肽链阶段切除了信号肽,游离的核糖体(填“能”或“不能”)附着到内质网上。

②推测组别l的实验结果:核糖体上合成的肽链比正常肽链长的原因是

③组别2中的肽链(填“含有”或“不含有’’)信号序列。其合成的肽链比正常肽链短的原因是

④对比组别2和3的结果,结合图中信息可知,只有结合了信号序列的SRP与内质网上的识别并结合后,肽链的延伸才会继续。

(3) 不同类型的蛋白质在细胞中有相对稳定的空间分布,如内质网蛋白质A一般只在内质网膜上,细胞质基质蛋白质B一般只在细胞质基质中。研究者推测,内质网蛋白质A因起始端含有一段定位信号肽,而分布在内质网上;细胞质基质蛋白质B因无该定位信号肽,而分布在细胞质基质重。研究者用适宜的方法对多肽链进行剪接,证实了该猜测。请简要写出研究者的实验设计思路。(要求:实验包含可相互印证的甲、乙两个组)
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