为研究30Kc6蛋白对家蚕细胞凋亡的抑制作用,请根据以下提供材料与用具,以家蚕细胞的细胞数目变化和DNA碎片化为测定指标,完善实验思路,预测实验结果并进行分析与讨论。
材料与用具:家蚕细胞悬液、一定浓度的H2O2溶液、30Kc6蛋白溶液、培养液、培养瓶、血细胞计数板、显微镜、DNA碎片化测定试剂盒等。(要求与说明:细胞计数的具体操作过程和DNA碎片化测定试剂盒的具体操作不做要求,不考虑加入溶液对体积的影响,实验条件适宜)
回答下列问题:
(一)实验思路:
家蚕细胞悬液加入到含培养液的培养瓶中,用血细胞计数板在显微镜下计数,用DNA碎片化测定试剂盒检测DNA碎片化情况,并记录。
将各瓶细胞悬液随机均分为A、B、C、D4组,A、B组用适量且等量的一定浓度的H2O2溶液处理,C、D组不作处理。
(1)每隔一段时间,分别取上述4组培养瓶内的培养物,。
(2)当细胞数量和DNA碎片化程度达到一定值时,向B、C组分别加入
。
重复步骤(3),统计并分析所得的数据。
(二)预测实验结果(4分,以坐标曲线图形式表示DNA碎片化程度变化情况,并标出加入药物的时间点)。
(三)分析讨论:
(3)细胞凋亡过程除了DNA碎片化外,同时还伴随着线粒体的破裂现象,这些现象都是基因的结果。