1.

为研究30Kc6蛋白对家蚕细胞凋亡的抑制作用,请根据以下提供材料与用具,以家蚕细胞的细胞数目变化和DNA碎片化为测定指标,完善实验思路,预测实验结果并进行分析与讨论。

材料与用具:家蚕细胞悬液、一定浓度的H2O2溶液、30Kc6蛋白溶液、培养液、培养瓶、血细胞计数板、显微镜、DNA碎片化测定试剂盒等。(要求与说明:细胞计数的具体操作过程和DNA碎片化测定试剂盒的具体操作不做要求,不考虑加入溶液对体积的影响,实验条件适宜)

回答下列问题:

(一)实验思路:

家蚕细胞悬液加入到含培养液的培养瓶中,用血细胞计数板在显微镜下计数,用DNA碎片化测定试剂盒检测DNA碎片化情况,并记录。

将各瓶细胞悬液随机均分为A、B、C、D4组,A、B组用适量且等量的一定浓度的H2O2溶液处理,C、D组不作处理。

(1)每隔一段时间,分别取上述4组培养瓶内的培养物,
(2)当细胞数量和DNA碎片化程度达到一定值时,向B、C组分别加入

重复步骤(3),统计并分析所得的数据。

(二)预测实验结果(4分,以坐标曲线图形式表示DNA碎片化程度变化情况,并标出加入药物的时间点)。

(三)分析讨论:

(3)细胞凋亡过程除了DNA碎片化外,同时还伴随着线粒体的破裂现象,这些现象都是基因的结果。
(4)实验用H2O2需要控制特定浓度的原因是
【考点】
细胞分化及其意义; 细胞的凋亡;
【答案】

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2. 有研究表明,某种物质P能够促进成熟脂肪细胞的凋亡从而影响肥胖者的体重,为了验证上述研究成果,请根据以下提供的实验材料,完善实验思路并预测实验结果及分析。

实验材料:培养瓶若干、细胞培养液、成熟脂肪细胞悬液、物质P、TUNEL检测试剂盒(检测细胞凋亡情况)、血细胞计数板(用于细胞计数)

(要求和说明:不考虑加入物质P后体积变化等误差,成熟脂肪细胞不具分裂能力,TUNEL检测试剂盒及血细胞计数板的具体检测方法不作要求)

(1) 完善实验思路:

①取培养瓶并各加入等量适量的细胞培养液,分组处理如下,每组设置若干个重复样品

A组:+适量成熟脂肪细胞悬液;B组:

②各组样品都置于相同且适宜的条件下培养

③在实验开始和培养过程中每隔相同时间用TUNEL检测试剂盒检测,借助血细胞计数板检测成熟脂肪细胞的数目。

(2) 预测实验结果:请设计一个坐标系,并绘制成熟脂肪细胞数量变化的曲线示意图(注:用N0表示原始细胞数量)
(3) 分析与讨论

①本实验选择成熟脂肪细胞的原因:避免细胞的对实验结果检测的影响。

②细胞凋亡是严格受调控的死亡,机体的细胞凋亡过程中始终有膜封闭,没有内含物释放,(填“会”或“不会”)引起炎症。

③实验结果表明,物质P能显著提高成熟脂肪细胞的凋亡率,其机理是物质P可以抑制脂肪细胞中miR基因的表达,由此推断,miR基因的活跃表达对脂肪细胞起到(填“促进”或“减缓”)凋亡的作用,导致肥胖。

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