第一步:选择生长良好的芦笋愈伤组织用0.1%甲磺酸乙酯(EMS)处理24h,洗去EMS继代培养2~3周。其中EMS的作用是;继代培养2~3周的目的是。
第二步:转入含0.5mg/LAEC的继代培养基中继续培养。其中0.5mg/LAEC的作用是。
第三步:挑选存活的细胞团转入培养基继代培养3~4周,使细胞快速增殖。
第四步:将愈伤组织转移至分化培养基上使其分化成苗,3周后可出现丛状苗。在此过程中,由体细胞发育成的类似胚的结构称为。
第五步:取一定数量的单个试管苗切取长为0.5~1cm的小段于诱导培养基上形成愈伤组织,此过程称为。按照试管苗次序将愈伤组织编号,每一块愈伤组织可以看作一个独立的细胞系。
第六步:将每个编号愈伤组织分别转移到含0.5mg/LAEC的培养基上,淘汰的细胞系;
第七步:将每个抗性细胞系的一半愈伤组织接种到分化培养基上使其分化成苗,另一半用于氨基酸分析。
第八步:用氨基酸分析仪分析各抗性细胞系的氨基酸含量,并和作比较,选择含量明显提高的抗性细胞系。对分化植株也做相应的检测以筛选出高氨基酸含量的再生植株无性系;
第九步:无性繁殖变异植株,观察农艺性状,并对其后代进行遗传学分析。其中变异植株进行无性繁殖而不是有性生殖的原因是。
分析与讨论: