实验材料:人胃癌细胞SGC-7901细胞株,96孔板,细胞培养液,50mg/mL的消癌平、生理盐水,CO2培养箱,MTT作用液(一种检测细胞存活和生长的试剂)等
实验思路:
取对数生长的细胞,计数后配制成细胞悬液,随后加入96孔板,置于37℃CO2培养箱。将细胞悬液均分成6组,用生理盐水和药物(不同浓度的消癌平)作用7d,加MTT作用液,测OD值,计算药物对肿瘤细胞生长的抑制率。抑制率=(对照组OD540-加药组OD540)/对照组OD540×100%。回答下列问题:
(1)癌细胞增殖情况的判定可通过细胞计数,常采用血细胞计数法,若本实验用的对数生长期细胞数量要达到5×106个/mL,则采用25(中)×16(小)规格,每小格高度0.10mm,面积1/100mm2的计数板,计数总数需达个癌细胞;此外癌细胞标志分泌物的检查,也是临床常用方法。本实验中可取经培养后的癌细胞悬液,进行来检测。
(2)请设计实验结果记录表。
(3)分析与讨论:
①用流式细胞仪检测消癌平针剂对人胃癌(SGC-7901)细胞的作用机理如下图,则抑制作用在细胞周期时期,关于抑制作用方式,请你提出合理的假设。
②若采用体内试验的方法研究消癌平对人胃癌细胞治疗作用,在将人胃癌(SGC-7901)细胞制备成的细胞凝块接种到小鼠体内时,应对小鼠作处理。
③为了更全面地了解消癌平对癌细胞的治疗效果,还可以从方面开展研究。(请答出2点)