1.
人β防御素是一种由H基因编码的抗菌肽，抑菌谱广，可通过构建重组酵母菌及其发酵实现量产。
(1)
本实验选用毕赤酵母表达载体pPIC9K（如图甲所示），扩增目的基因时设计的一对引物（P1和P2）如图丙所示。
(2)
毕赤酵母真核表达系统最大的优点在于该体系可对目的蛋白，直接表达出具有生物活性的蛋白。
(3)
重组毕赤酵母合成的β防御素在面包制作中还具有局限性。因β防御素的糖链结构与哺乳动物糖蛋白链结构的差异存在抗原性，作为防腐剂添加，有引起机体免疫反应造成过敏的危险。请结合已有的基因工程和蛋白质工程知识给出改良思路去除上述β防御素的糖链结构：。
(4)
工业化发酵生产β防御素的过程一般包括菌种的选育，扩大培养、、接种、发酵、产品的分离、提纯等方面，将β防御素工程菌接种至发酵罐内进行扩增，培养过程中可定期取样并使用细菌计数板对（填“菌体”或“菌落”）进行直接计数，以评估增殖情况。发酵结束后，采用（答出2点）等方法获得所需的发酵产品。
①本实验中引物的作用是。
②结合载体与引物，推测本实验中采用的一对限制酶是。
【考点】
PCR技术的基本操作和应用;
基因工程的应用;
基因工程的操作程序（详细）;
发酵工程的应用;
能力提升
