新型冠状病毒抗原检测试剂盒是相对比较简便、快速的检测方法，抗原检测试剂盒的生产依赖于新型冠状病毒单克隆抗体的制备。制取新型冠状病毒S蛋白的单克隆抗体部分过程如下图所示，请回答下列问题：

1. 新型冠状病毒抗原检测试剂盒是相对比较简便、快速的检测方法，抗原检测试剂盒的生产依赖于新型冠状病毒单克隆抗体的制备。制取新型冠状病毒S蛋白的单克隆抗体部分过程如下图所示，请回答下列问题：

(1) 图中操作a是指对小鼠注射，之后一般从该小鼠的中提取淋巴细胞，并在体外让淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合。与诱导植物原生质体融合相比，诱导动物细胞融合的特有方法是。

(2) 诱导融合后至少要经过两次筛选，图中的筛选1是指利用HAT选择培养基将具有特点的细胞筛选出来；筛选2需要将细胞接种到多孔培养板上，每个孔接种个细胞，取上清液作为待测样本进行抗体阳性检测，检测原理如下图所示：

加入酶标抗体一段时间后，需要将未与结合的酶标抗体洗脱。据图可知在抗体检测中，杂交瘤细胞呈阳性的判断依据为。

(3) 单克隆抗体的优点是（答出两点）。利用筛选出的符合要求的细胞生产单克隆抗体，既可以将细胞注入小鼠腹腔内进行生产，也可以在体外生产，两种方式相比，后者的优点是。

【考点】

单克隆抗体的制备过程; 单克隆抗体的优点及应用;

【答案】

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综合题普通

1. EB病毒（EBV）可引发鼻咽癌等癌症。我国科研人员制备有效阻断EBV感染的单克隆抗体，为治疗鼻咽癌和研发疫苗提供帮助。回答下列问题。

(1) 图1中，EBV表面的糖蛋白gHgL与上皮细胞表面受体（如E₂等）结合后，导致gB的发生变化，启动病毒包膜和上皮细胞膜融合。膜融合过程体现了膜具有性。gHgL可作为制备有效阻断EBV感染的单克隆抗体的。

(2) 为了获得可以特异性结合gHgL的单克隆抗体，研究人员首先将荧光标记的gHgL探针加入EBV感染恢复期的外周血中，筛选分离出有荧光标记的细胞；然后提取该细胞中的gHgL抗体mRNA，通过获得相应的cDNA，再扩增出gHgL抗体基因，最后转入细胞成功表达出单克隆抗体。

(3) 科研人员已筛选出可以特异性结合gHgL的单抗D8，与已报道的单抗A1相比，两者都能显著抑制EBV病毒感染上皮细胞。将gHgL与D8或A1混合接触后，检测gHgL与上皮细胞表面受体E2的结合能力，结果如图2。

分析实验结果可知D8与A1作用的区别是；由此可见，制备单抗A1时所用的特定抗原（填“是”或“不是”）gHgL。

(4) 为了更好地阻断EBV感染，研究人员提出采用单抗D8和单抗A₁联合用药，结合上述研究，判断D8、A1是否具有协同效应并说明理由。

综合题普通

2. 如图是生产抗β-干扰素单克隆抗体的过程，回答下列问题：

(1) 与传统方法生产的抗体相比，单克隆抗体的优点是并可大量制备。

(2) 过程①中需将注入小鼠体内，并从小鼠的脾脏中获得相应的B淋巴细胞。

(3) 过程②中，特有的诱导融合的方法是，此过程中能得到的融合细胞有种（仅考虑两两融合）。杂交瘤细胞的特点是。

(4) 过程④中，对获得的杂交瘤细胞进行和，经多次筛选，就可获得能分泌抗β-干扰素单克隆抗体的细胞。在体内条件下培养，从中可提取出抗β-干扰素单克隆抗体。

综合题普通

3. 牛支原体是严重危害牛养殖业的一种病原体，它能引起肺炎、关节炎等多种疾病。VspX蛋白是牛支原体表面的一种脂蛋白，在牛支原体感染宿主细胞时起黏附作用。科研人员制备抗VspX单克隆抗体，进行相关研究。请回答下列问题：

(1) 以VspX蛋白为抗原制备单克隆抗体，需用纯化的VspX蛋白对小鼠进行多次免疫，其目的是刺激机体产生更多的，将该细胞与骨髓瘤细胞融合，在HAT培养基上，细胞不能生长，从而筛选获得杂交瘤细胞。

(2) 杂交瘤细胞（填“能”或“不能”）产生专一抗体，所产生的抗体（填“一定”或“不一定”）能抗VspX蛋白。

(3) 将上述筛选出的杂交瘤细胞培养、稀释后接种到96孔培养板中，每一个孔中尽量只接种个杂交瘤细胞以实现，然后通过ELISA法（又称酶联免疫吸附试验法）检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，可与结合的培养孔为阳性孔。将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖，最终从中获取大量抗VspX抗体。

(4) 将抗VspX抗体与不同抗原进行杂交，免疫印迹分析如图所示，实验结果显示，表明抗VspX抗体具有。

综合题普通