我国科学家已经率先成功地应用体细胞进行克隆，获得两只克隆猴——“中中”和“华华”，该技术在其他哺乳动物（如牛、羊）中也获得了成功。下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图。回答下列问题：

1. 我国科学家已经率先成功地应用体细胞进行克隆，获得两只克隆猴——“中中”和“华华”，该技术在其他哺乳动物（如牛、羊）中也获得了成功。下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图。回答下列问题：

(1) 图中除利用体细胞核移植技术外，还涉及的技术手段有。

(2) 过程②普遍使用的去核方法是。通过体细胞核移植产生后代丁牛属于（填“有性”或“无性”）生殖。

(3) 早期胚胎进行移植时，是否需要进行免疫排斥检测?（填“是”或“否”）。不考虑变异，与甲牛相比，出生后的丁牛细胞的遗传物质（填“完全改变”“部分改变”或“完全不变”）。

(4) 牛在自然情况下，胚胎虽然最早可在发育到8～16细胞阶段时进入子宫，但为了提高移植后胚胎的发育率和妊娠率，在实践中通常用发育到阶段的胚胎进行移植。移植前需要对代孕母牛进行处理，才能使胚胎正常着床。

【考点】

动物细胞培养技术; 动物细胞核移植技术; 胚胎移植;

【答案】

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综合题普通

1. 在转基因体细胞核移植过程中，供体细胞对重构胚的正确重编程及以后的发育有着非常重要的影响。利用转hLF基因的山羊成纤维细胞进行核移植（过程如图所示），可以作为核移植奶山羊的生产。回答下列问题：

(1) 转hLF基因的山羊成纤维细胞作为（填“供体”或“受体”）进行核移植，在进行核移植前需要进行细胞培养，通常会在培养基中加入血清，其作用是，图中选用卵母细胞的原因是（答一点）。

(2) 过程①表示，过程②的具体操作是。

(3) 获得的重构胚（填“能”或“不能”）直接移入受体山羊体内，原因是。

综合题普通

2. 双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交——杂交瘤细胞技术(免疫的B 淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术)生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题：

(1) 诱导细胞融合时利用的病毒表面含有的糖蛋白和一些酶，能够与细胞膜上的(填化学本质)发生作用，使得细胞互相凝聚，细胞膜上的重新排布，细胞发生融合。筛选1利用HAT 培养基进行筛选，而筛选2通过多次的来完成。过程②选用的骨髓瘤细胞 (选填“能”或“不能”)在 HAT培养基上生长。

(2) 图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。

(3) 与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是。

综合题普通

3. 人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答问题：

(1) 由图可看出，单克隆抗体制备过程运用的动物细胞工程技术有（写出两种），给小鼠注射HCG的目的是，①过程促进两种细胞融合的方法有（写出两种）。

(2) 图中过程②③为两次筛选过程，过程②是指细胞群稀释，然后都放在特定的培养基的多孔培养皿中培养，只有能够存活且增殖；过程③是用方法，经多次筛选得到能产生所需抗体的杂交瘤细胞群。

(3) 最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是。通过该过程生产的单克隆抗体可以与特异性结合，从而诊断早孕。

综合题普通