SRY基因又称雄性性别决定基因，只位于Y染色体上，长度约1.1 kb。某兴趣小组利用PCR技术进行人类性别鉴定实验。请回答下列问题：

1. SRY基因又称雄性性别决定基因，只位于Y染色体上，长度约1.1 kb。某兴趣小组利用PCR技术进行人类性别鉴定实验。请回答下列问题：

(1) 本实验中PCR所需模板来自的口腔上皮细胞。

(2) PCR反应的步骤可分为三步，“高温变性”的目的是，“退火复性”的温度约为，“延伸”阶段需要用到的酶是。

(3) PCR技术成功的关键因素是设计引物，根据引物的特点，最简便的方法是根据SRY基因设计种引物。引物的作用是。如果需要设计相应的酶切位点，只能在引物的端添加相应序列，原因是。

(4) 下图所示是四个小组的电泳结果，为排除实验操作本身对实验结果的影响， PCR体系中加入β -actin基因（细胞骨架蛋白基因），分析图中各条带可以得出的实验结果是。

【考点】

PCR技术的基本操作和应用;

【答案】

您现在未登录，无法查看试题答案与解析。登录

实验探究题困难

1. 家畜胚胎的性别鉴定技术对畜牧业的发展具有重要意义。巢式PCR扩增反应在两次PCR反应中使用两组不同引物，先使用外引物对目标区域DNA片段进行第一次PCR扩增，产生中间产物，然后使用内引物对中间产物进行第二次PCR扩增，产生目标产物。下图是巢式PCR工作原理示意图，请回答：

(1) 巢式PCR反应体系中需要加入模板、、、引物、Mg²⁺、缓冲液等。

(2) 巢式PCR时若用外引物扩增产生了错误片段，再用内引物扩增在错误片段上进行引物配对并扩增的概率，因此，相比于常规PCR获得的产物而言，巢式PCR获得的产物特异性。

(3) 巢式PCR通常在一个试管中进行第一阶段反应，然后将中间产物等转移到第二试管中进行第二阶段反应，不在同一试管完成的主要原因是。

(4) 科研人员利用多重巢式PCR技术同时扩增Y染色体上雄性决定基因(SRY)和常染色体上的酪蛋白基因(CSN1S1)，进行早期胚胎的性别鉴定，并将鉴定后的胚胎进行移植。下表是主要实验步骤，请完成下表：

实验目的	方法步骤要点
胚胎样品DNA提取	选取囊胚的①细胞提取DNA
PCR引物的设计和合成	根据牛的SRY和CSN1S1基因序列设计合成②对引物
PCR过程	预变性→变性→③→延伸
观察扩增结果	电泳分析
受体牛④处理	对受体牛注射前列腺素
胚胎移植	将筛选出的胚胎移植到受体牛的子宫内

(5) 电泳结果如图所示，1~5号为取自不同胚胎的DNA样品进行巢式PCR的产物。A和B条带中代表SRY的是。可以确定1~5号中的3和5号胚胎为性。

(6) 牛胚胎性别的鉴定除了可以利用PCR外，下列方法也可行的有。

①染色体核型分析法

②核酸探针杂交法

③差速离心法

④H-Y抗血清免疫学法(H-Y抗原编码基因位于Y染色体上)

实验探究题困难

2. SRY基因又称雄性性别决定基因，只位于Y染色体上，长度约1.1 kb。某兴趣小组利用PCR技术进行了性别鉴定实验。

请回答下列问题：

(1) 本实验中PCR所需模板来自的口腔上皮细胞。

(2) PCR反应的步骤可分为三步，“高温变性”的目的是，“退火复性”的温度约为，“延伸”阶段需要用到的酶是。

(3) PCR技术成功的关键因素是设计引物，根据引物的特点，最简便的方法是根据SRY基因设计种引物。引物的作用是。如果需要设计相应的酶切位点，只能在引物的端添加相应序列，原因是。

(4) 下图所示是四个小组的电泳结果，为排除实验操作本身对实验结果的影响，PCR体系中加入β-actin基因(细胞骨架蛋白基因)，分析图中各条带可以得出的实验结果是。

实验探究题困难

3. 科学家运用同位素示踪技术及密度梯度离心法进行了DNA复制式探索实验，实验过程如下：在20℃条件下，用T₄噬菌体侵染大肠杆菌，在T₄噬菌体DNA进入活跃复制期时，在培养基中添加含³H标记的糖苷，培养不同时间后，阻断DNA复制，将DNA变性后，离心分离不同程度的T₄噬菌体的DNA，检测离心管不同位置的放射性强度。图1是某同学绘制的DNA复制模式图，图2是实验结果（DNA片段越短，与离心管顶部距离越近）。请回答下列问题：

(1) DNA复制时，DNA聚合酶贝能使新合成的DNA链从5’向3’方向延伸子连。实验结果表明，子链合成的过程存在先合成较的DNA链，再连接成链，所以DNA子链形成时还需要酶。

(2) 根据上述实验结果分析，图1所示的DNA复制的模式图有两处错误，分别是。

实验探究题普通