饮用水安全关乎生命健康。某兴趣小组检验城市自来水是否达标进行了相关实验，请回答有关问题：

1. 饮用水安全关乎生命健康。某兴趣小组检验城市自来水是否达标进行了相关实验，请回答有关问题：

(1) 甲同学用涂布平板法检测大肠杆菌数：配制的培养基中含有蛋白胨、酵母膏、NaCl、 H₂O 和 X ，其中蛋白胨可为大肠杆菌提供和维生素， X 是。

(2) 乙同学用滤膜法检测大肠杆菌数：用滤膜将已知体积的水过滤后放在培养基上培养，在该培养基上大肠杆菌菌落呈现色。该方法所统计样品中含菌数往往偏低的原因是。

(3) 丙同学检测水样中的细菌总量时，先随机取若干灭菌后的空白平板培养一段时间，这样做的目的是。接种后，需要将平板（填“正置”或“倒置”）培养。统计菌落总数时，也可以根据对菌种进行初步的鉴定。

【考点】

微生物的分离和培养;

【答案】

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综合题普通

1. 回答下列（1）、（2）小题：

(1) 镇江香醋具有醋香浓郁、风味纯正、色浓而味鲜，且久存其质不变等特点。这种传统酿造是用含有多种微生物的大曲（麦曲）为糖化发酵剂所进行，这些微生物主要有乳酸菌、醋酸菌、葡萄球菌、大肠杆菌和酵母菌等，其中属于真核生物。其独特的风味与镇江的环境有关外，还在于发酵产生了复杂多样的代谢产物，更在于发酵所用的造成发酵产品具有特殊的原因。为了了解某时期发酵液中醋酸菌的量，要用计数；可在发酵液中加入，这是采用方法将发酵产物中的乳酸进行分离提纯。

(2) 能产生天然药物的某X植物细胞易被Y病毒感染，但某Z细菌具有抗Y病毒的能力。该细菌对病毒具有免疫力的原因是一方面有抗Y病毒的基因，其表达的能把该病毒蛋白水解成氨基酸，另一方面该细菌内有，可使该病毒的DNA切成许多短片段。从该细菌中分离出抗Y病毒的基因，要用到电泳技术，电泳时常使用凝胶作为介质，凝胶的孔隙可起的作用，加样孔一端朝向极。将分离到的基因与Ti质粒重组，导入农杆菌，再整合到Y植物细胞的中，经筛选，并培养获得抗Y病毒的大量X植物细胞，生产大量的天然药物。

综合题普通

2. 郫县豆瓣是中国顶尖调味料之一，也是中国地理标志产品，色泽油润、味辣咸香、回味醇厚，被誉为川菜之魂，其发酵过程有多种酵母菌和其它微生物参与。鲁氏接合酵母是郫县豆瓣发酵﹑后熟过程中一种重要的酵母菌，发酵过程中产生的乙醇等物质在豆瓣风味形成中发挥着重要作用。回答下列问题：

(1) 若要从发酵好的成品郫县豆瓣中分离出不同的酵母菌种，实验流程可以概括为：豆瓣取样→→挑选菌落。挑选菌落时﹐可根据菌落的（答出两点）等特征来区分酵母菌和其他微生物。

(2) 研究人员采用高盐无氧和低盐有氧两种条件培养，分离获得了多种不同的酵母菌株。在郫县豆瓣发酵过程中，起主要作用的酵母菌可能是在培养条件下获得的，原因是。

(3) 下图是在食盐浓度分别为10%、20%、30%的不同条件下﹐鲁氏接合酵母菌的数量增长曲线。据图分析，设计探究鲁氏接合酵母菌最适发酵温度的实验方案时，应该将食盐浓度控制在比较适宜，理由是。

(4) 酵母菌的产醇能力对豆瓣的风味有较大影响。若要测定不同酵母菌种产生乙醇的能力，可以将各种酵母菌培养相同时间后，取等量静置澄清后的培养液，分别加入适量的酸性重铬酸钾溶液，振荡均匀后观察颜色变化，若溶液呈现色，说明发酵过程中产生了乙醇。若要用比色法来测定培养液中乙醇的含量，需要制备标准显色液，该实验标准显色液的配制方法是。

综合题普通

3. 为提高作物产量，种植业往往使用大量的氮素化肥，既增加了生产成本，又易造成环境污染。自生固氮菌营独立生活，为改变这种现状带来了希望。某科研小组利用下面的培养基尝试从土壤中分离固氮能力强的自生固氮菌，以便生产菌肥替代传统化肥。清回答下列问题：

培养基配方表：

成分	葡萄糖	KH₂PO₄	MgSO₄	NaCl	CuSO₄	CaCO₃	琼脂	蒸馏水
用量	10g	0.2g	0.2g	0.2g	0.2g	5g	3.5g	IL

(1) 配制培养基时，按配方表称量、溶化、定容后需经法灭菌后再倒平板。此培养基能分离自生固氮菌的原因是。

(2) 为分离纯化自生固氨菌及观察自生固氮菌的菌落特征，需将土样经后，用灭菌后的（填接种工具名称）采用将菌液接种到平板上培养。

(3) 已知固氮酶的化学本质为蛋白质，不同的蛋白质在不同浓度的盐溶液中溶解度不同。为检测分离得到的自生固氮菌的固氮酶活性。可将固氮菌细胞破碎后采用法分离出固氮酶，该方法的优点是。

(4) 研究发现，土壤中碳含量降低，碳氮比低于40：1时，固氮菌的固氮作用迅速停止。因此纯化后制作的优良菌肥最好与（填“ 氮肥”“磷肥”“钾肥”或“有机肥”）配合施用。

综合题普通