欲研究药物乙对海拉细胞增殖的抑制作用，请根据以下提供的材料与用具，以海拉细胞的细胞数变化为测定指标，完善实验分组设计和实验思路，预测实验结果并进行分析与讨论．材料与用具：海拉细胞悬液，药物甲溶液（对细胞增殖有影响），药物乙溶液，培养液、培养瓶，血细胞计数板，显微镜等．（要求与说明：细胞计数的具体操作过程不做要求，不考虑加入溶液对体积的影响，实验条件适宜）回答下列问题：

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1. 欲研究药物乙对海拉细胞增殖的抑制作用，请根据以下提供的材料与用具，以海拉细胞的细胞数变化为测定指标，完善实验分组设计和实验思路，预测实验结果并进行分析与讨论．材料与用具：海拉细胞悬液，药物甲溶液（对细胞增殖有影响），药物乙溶液，培养液、培养瓶，血细胞计数板，显微镜等．

（要求与说明：细胞计数的具体操作过程不做要求，不考虑加入溶液对体积的影响，实验条件适宜）回答下列问题：

(1) 实验分组设计：

A 组：海拉细胞悬液+培养液 B 组：海拉细胞悬液+培养液+药物甲溶液

C 组：海拉细胞悬液+培养液+药物甲溶液，培养一段时间后，加入．

(2) 完善实验思路：

(3) 预测实验结果（以坐标曲线图形表示实验结果，并标出加入药物的时间）：

(4) 分析与讨论：

药物甲的作用是．

【考点】

动物细胞培养技术;

【答案】

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实验探究题普通

1. 在一定剂量范围内苜蓿中的黄酮对动物乳腺上皮细胞增殖具有一定促进作用。为研究不同浓度苜蓿黄酮对乳腺上皮细胞的增殖及其对乳酸脱氢酶（LDH）活性的影响，科研人员用MTT法以细胞悬液OD值为观测指标测定细胞增殖能力，进行了相关实验研究。请完善实验思路，并根据实验结果进行分析。

实验材料与仪器：

用二甲基亚砜（DMSO）配置的浓度为25、50、75和100µ/mL苜蓿黄酮溶液、用动物细胞培养液配制的一定密度的动物乳腺上皮细胞悬液、光电比色计、MTT法细胞增殖测定仪器等

（要求与说明：MTT法测定细胞增殖具体操作不作要求；乳酸脱氢酶（LDH）活性检测不作要求；在一定细胞数范围内，OD值与细胞数成正比；培养过程中培养液变化忽略不计；实验条件适宜）

(1) 完善实验思路

①取若干培养瓶，各加入998mL的细胞悬液，分为5组，编号甲~戊，每组5个重复。

②甲组：加入2mL二甲基亚矾；。

③。

④实验第5天，。

⑤。

(2) 结果分析与结论

苜蓿黄酮对某动物乳腺上皮细胞增殖及其乳酸脱氢酶（LDH）活性的影响

项目	时间/d	甲组	乙组25µg/mL	丙组50μg/mL	丁组75μg/mL	戊组100µg/mL
细胞增殖	3	0.37	0.38	0.38.	0.37	0.37
细胞增殖	5	0.39	0.39	0.41*	0.46*	0.40*
乳酸脱氢酶活性	5	1078.80	675.60*	573.21*	1138.04	796.89*

注：表中*表示与对照组比较有统计学上的显著差异，不带*数据表示与对照组无显著差异；（单位：略）

根据上表可得实验结论：

结论一：作用时间较短时（3天），苜蓿黄酮对细胞增殖无明显作用；

结论二：；

结论三：。

(3) 实验分析

细胞呼吸中，乳酸脱氢酶（LDH）催化的反应（填“产生”或“不产生”）ATP，这一催化反应发生在（填“需氧”或“厌氧”）呼吸中。本实验中还可用细胞培养上清液中LDH的浓度代表细胞的受损程度的原因是。为减少微生物对实验结果带来的干扰，实验中的动物细胞培养基中添加的胎牛血清可采用（方法）去除杂菌。

实验探究题普通

2. 某研究小组发现药物M对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖有抑制作用，并具有明显的浓度和时间依赖性，其实验结果如下图所示。请根据以下提供的实验材料与用具，完善实验思路，并得出实验结论。

材料与用具：培养瓶若干，不同浓度的药物M溶液，生理盐水，人乳腺癌细胞MCF-7细胞悬液，含10%胎牛血清的细胞培养液，C0₂培养箱，酶标仪（测定细胞培养液的吸光度值）等。

[要求与说明：细胞数量通过测定相应培养液的吸光度值表示，细胞抑制率=（1-相应组吸光度值）/对照组吸光度值]

请回答：

(1) 实验思路：

①取若干培养瓶均分成四组，编号A、B、C、D，均加入等量的。

②分组处理：。

③细胞培养：。

④数据收集与处理：。

(2) 实验结果：请你绘制一张用于记录实验数据的表格。

(3) 实验结论：。

实验探究题普通

3. 疟原虫是一种单细胞动物，是疟疾的病原体。青蒿素是效果好副作用少的抗疟药。然而，令人担心的是部分疟原虫对青蒿素产生了抗药性。请根据提供的实验材料及部分思路，完善不同种类的疟原虫对青蒿素抗药性情况的探究。

实验材料：培养液、疟原虫甲、疟原虫乙、³H-异亮氨酸、1.0×10^-6mol/L 青蒿素溶液、

DMSO（用于配制青蒿素的溶液）、放射性测量仪。

(1) 实验思路：

①取培养瓶若干，分成4 组，分组如下：，加入的各种试剂等量且适量，每组设置若干个重复样品。

②各组样品同时加入等量的³H-异亮氨酸。在相同且适宜的条件下培养。

③ 。

④统计分析各组数据，通过与对照组数据比较，计算出青蒿素溶液对疟原虫甲与乙生长的抑制率。

(2) 预测实验结果：用一个坐标系和疟原虫甲、乙生长的抑制率变化曲线示意图表示（实验结果表明疟原虫甲对青蒿素溶液敏感度高于疟原虫乙）

(3) 分析与讨论：

①下列生物中，与疟原虫的结构相似的是

A．人成熟的红细胞 B．小球藻 C．变形虫 D．大肠杆菌

②实验中采用³H-异亮氨酸的原因是。

③在上述实验的基础上，探究疟原虫乙吸收的异亮氨酸是否会分泌到细胞外。写出简要的实验思路。

实验探究题普通