1.
将天然Ti质粒改造成含有Vir基因的辅助质粒（辅助T-DNA转移）和不含有Vir基因、含有T-DNA的穿梭质粒，共同转入农杆菌，可提高转化效率。细菌和棉花对密码子偏好不同，为提高翻译效率，增强棉花抗病虫害能力，进行如下操作。回答下列问题。
注：F1-F3，R1-R3表示引物；T-DNA-LB表示左边界；T-DNA-RB表示右边界；Ori表示复制原点；KanR表示卡那霉素抗性基因；HygBR表示潮霉素B抗性基因。
(1)
从苏云金杆菌提取DNA时，需加入蛋白酶，其作用是。提取过程中加入体积分数为95%的预冷酒精，其目的是。
(2)
本操作中获取目的基因的方法是和。
(3)
穿梭质粒中p35s为启动子，其作用是，驱动目的基因转录；插入两个p35s启动子，其目的可能是。
(4)
根据图中穿梭质粒上的KanR和HygBR两个标记基因的位置，用基因对应的抗生素初步筛选转化的棉花愈伤组织。
(5)
为检测棉花植株是否导入目的基因，提取棉花植株染色体DNA作模板，进行PCR，应选用的引物是和。
(6)
本研究采用的部分生物技术属于蛋白质工程，理由是______。
A.
通过含有双质粒的农杆菌转化棉花细胞
B.
将苏云金杆菌Bt基因导入棉花细胞中表达
C.
将1-1362基因序列改变为棉花细胞偏好密码子的基因序列
D.
用1-1362合成基因序列和1363-1848天然基因序列获得改造的抗虫蛋白
【考点】
DNA的粗提取和鉴定;
蛋白质工程;
基因工程的操作程序（详细）;
能力提升
