1. 科研人员探究了细胞中N基因对动物细胞增殖过程中利用能源物质途径的影响。
(1) 为探究细胞增殖过程中对不同能源物质的利用情况,科研人员设计了两种含不同能源物质的培养基,观察细胞增殖情况,操作和结果如图1(+表示添加该物质,-表示不添加该物质)。依据图1中,可推测N基因促进细胞增殖。本实验可得出结论:

(2) 研究人员进一步对比转N基因小鼠与正常小鼠培养相同时间后培养液中的葡萄糖与乳酸水平,发现均有显著差异,结果如图2(图中横线表示该组平均值),推测N基因

(3) 为进一步检验上述推测,研究者设计了系列实验,以下是其中一个实验的方案。已知GLUT4是依赖胰岛素的葡萄糖转运蛋白,分布于肌肉和脂肪组织等。基于上述推测,请完善表格中的实验设计和预期结果。

组别

实验材料

实验处理

检测指标和预期结果

细胞相对数量

检测液中葡萄糖余量

A

转N基因小鼠的脂肪细胞

GLUT4阻断剂

加入①

B

【考点】
血糖平衡调节;
【答案】

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1. 下图表示葡萄糖及其他物质影响胰岛素合成的机制。请回答下列问题:

(1) 血糖浓度升高时,葡萄糖感受器产生兴奋,经过神经中枢处理后,神经冲动通过(选填“交感” “副交感”)神经传递信号,促进胰岛素的分泌。上述过程属于调节。
(2) 除血糖外,图1中的等物质也能促进胰岛素的释放,导致血糖浓度下降。
(3) FGF-21(生长因子)有类似胰岛素的调节作用。为探究FGF-21 降糖和改善胰岛素抵抗的机理,科研人员进行了如下实验,请完善下表:

实验步骤

简要流程

取出冻存的 HepG2细胞(源于人的肝胚胎瘤细胞),复苏后转入适宜条件下培养,当形成单层细胞后,需用②酶处理后进行传代培养,后续实验中取处于③(选填“对数期”“稳定期”)的细胞。

建立病理细胞模型

取适量的HepG2细胞, 加入200μL 新配制的 100mmol/L 胰岛素于适宜条件下培养,使细胞产生④

葡萄糖摄取能力检测

取适量的模型细胞,实验组分别加入适量的100nmol/L 胰岛素、⑤、100nmol/L 胰岛素+FGF-21 的混悬液培养细胞24h。检测不同处理组细胞的葡萄糖摄取能力,结果如图2。

基因表达能力检测

提取不同处理的细胞总RNA,利用实时荧光定量PCR检测HepG2细胞中⑥水平, 结果如图3。

结果分析

与对照组相比,胰岛素单独作用后的模型细胞对葡萄糖摄取率差异不显著,说明⑦;胰岛素和FGF-21对模型细胞的葡萄糖摄取存在⑧作用;FGF-21通过⑨促进HepG2细胞摄取葡萄糖和改善胰岛素抵抗。

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