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1. 某生物兴趣小组开展了“分离土壤中分解尿素的细菌并进行计数”的实验。回答下列问题：

(1) 步骤①中，取土壤样品装在信封中备用。所用铁铲和信封在使用前都需要进行处理。
(2) 实验中，使用的培养基配方：KH2PO41.4g，Na2HPO42.1g，MgSO4·7H2O0.2g，葡萄糖10.0g，尿素1.0g，蒸馏水1000mL，琼脂，无菌水及调节pH的试剂等。根据物理性质区分，该培养基为；该培养基中为微生物提供碳源和能源的物质是，该培养基中尿素的作用是。
(3) 步骤④中，将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中，（填步骤），再进行涂布。若步骤④中的3个细菌培养基平板上均接种0.1mL稀释液，培养一段时间，平板上菌落数分别为35个、33个、34个，则可推测每克土壤样品中的细菌数为个。运用这种方法统计的结果往往较实际值小，原因是。
【考点】
微生物的分离和培养; 尿素分解菌的分离与计数; 组织培养基的成分及作用; 培养基概述及其分类;
【答案】

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综合题 普通
能力提升
换一批
1. 某兴趣小组试图从土壤中分离能分解尿素的细菌，相关流程如图所示。回答下列问题：

   

(1) 某同学配制以下的培养基成分：葡萄糖10.0g、蛋白胨5.0g、KH2PO41.4g 、 Na2HPO42.1g、尿素1.0g、琼脂15.0g、H2O（定容至1L）。分析培养基的成分，根据物理性质可知此培养基属于培养基，此培养基（填“能”或“不能”）用于分离出能分解尿素的细菌，理由是。
(2) 将配制好的培养基灭菌，待培养基冷却至℃左右时在酒精灯火焰附近倒平板，培养基冷却凝固后，将培养皿倒过来放置的原因是（答出1点）。
(3) 据图分析，该兴趣小组设置了三个培养皿进行接种，所采用的接种方法是，培养一段时间后，选择菌落数为的平板进行计数，统计结果比实际活菌数（“偏大”或“偏小”），原因是。
综合题 困难
2. 红曲色素是广泛应用于食品等行业的天然色素，主要通过红曲霉菌发酵生产。现有商业菌株生产红曲色素能力低，且会产生对动物肾脏、肝脏有毒害的桔青霉素。科研人员拟获得优质红曲霉菌。
(1) 将待选菌样品接种到含大米研磨液的液体培养基中，扩大培养2 天后进行，依次分别涂布于固体培养基上培养，通过观察特征对菌种进行初步鉴定。
(2) 以菌株为对照进行发酵指标的比较，初步筛选出3种菌株。选取4种大米为基质进行发酵，结束后检测相应物质的含量，结果如图1。

       

应选择作为目标菌株进行后续生产研究。
(3) 氮源种类及发酵温度对所选红曲霉菌代谢产物合成的影响如图2所示。

   

根据所有研究结果，依次写出红曲色素发酵罐中优选的碳源、氮源及控制的温度条件。
综合题 普通
3. 淀粉酶在工业生产上应用最早，迄今仍是用途最广、产量最大的酶制剂产品之一。为了提高淀粉酶的生产水平，首先要从土壤中筛选出产淀粉酶的活性菌株。某研究人员对所取土样进行产淀粉酶的细菌的分离操作（A组）和计数操作（B组），过程如图Ⅰ。图Ⅱ是一种接种方法示意图。请回答下列问题：

（1）步骤③、④所用培养基的成分，最大的区别是种类不同。

（2）步骤④、⑤所用培养基的成分，最大的区别是固体培养基中添加了。步骤⑤、⑧接种时需设置未接种培养基做对照，目的是。

（3）步骤⑦中，将1mL菌液分别稀释10倍和100倍，每种稀释度经过步骤⑧各在3个平板上接种（每个平板的接种量为0.1mL），经适当培养后，2组平板上的菌落数分别为59、57、58和2、7、5。据此可得出每升菌液中的活菌数为个，据此可推测适宜的土壤稀释倍数为倍。

（4）图Ⅱ所用的接种方法（填“能”或“不能”）对活菌进行计数；甲、乙、丙为划线的三个区域，为正确完成整个接种过程，接种环要进行次灼烧灭菌，其中灭菌目的相同的是第次。
综合题 普通